蛋白指标检测遇到的几个问题!(急盼回复,43楼又有新问题)

徐徐0

最近用凯氏定氮法测定饲料粗蛋白,每次出的结果都与实际的数字相差好大
我找了一下原因,个人认为可能产生结果误差的在这几方面:
指示剂:按国标的方法配制了一份(溴钾酚绿与甲基红3:1体积混合),按照学校培训教材上面的也配制了一份(0.1%的甲基红乙醇溶液与0.5%溴钾酚绿乙醇溶液等体积混合)后面附上标定标准溶液浓度时加入指示剂的颜色
0.05mol/LHCL标准溶液:4.5mlHCL溶于1000ml水中
还有就是标定浓度时需要用的基准物:无水碳酸钠(我用的是分析纯级的)
在凯氏烧瓶中加入试样的时候,部分试样沾附在瓶壁,残留于纸上!

我大概的查了能出错的几个地方,指示剂做了2种,虽然显示的颜色不一样,但标定的结果,得到的数字是一样的!
标准溶液也重新做了一份,但最终检测的结果,得出的蛋白数字跟实际还是相差太大!(测了几个样,棉粕只得到32个蛋白,实际是40左右;菜粕得到32左右,实际在36左右)

最近刚接触检测这事,碰上的问题还不懂怎么解决,不知道我的描述是否清楚,只盼望搞同行的能帮忙疏通一下思路!
小弟我在此先谢过各位啦!

牛郎阿飞

楼主很会思考，继续努力

徐徐0

多谢沙发的支持,顶上去,继续寻求帮助!

五丰

标定浓度时需要用的基准物:无水碳酸钠（注意：必须得优级纯或基准级！）做标定用的无水碳酸钠一定要在270~300°C的电热箱里烘干至恒重，再有：一定要做3个以上的平行试样，而且注意在电炉上加热时的次数（一般是两到三次，必须得把二氧化碳赶跑干净！）计算结果的时候一定要看看几份结果的相对平均偏差是不是在0.1%范围内，如果不是就得重做。

徐徐0

首先非常感谢五丰的回答,但我又有了几个问题
如果是从市场上刚买回来的那种无水碳酸钠,还需要烘干这步骤么?
还有就是,我用的是蒸馏水,电炉加热的次数是否没必要那么多次啦?

469013250

无水碳酸钠需要烘干的。

五丰

无论是什么时候买的无水碳酸钠都必须经过烘干这一步骤；实验用水一般都是指蒸馏水，电炉加热的次数则要依据你滴定时溶液恰好由绿色变为暗紫色，再放到电炉上加热煮沸两分钟，这时溶液不变色（不变回原来的绿色）才可以。

五丰

说明一下，我一般都要进行两次加热。一次加热和三次加热的现象也有过，但是不多，4次以上的就没有出现过。

五丰

化学纯、分析纯与基准试剂、优级纯差别很大的。所以你标定溶液浓度一定要用基准试剂或优级纯。

徐徐0

非常感谢五丰的作答,又学到了不少!
暗紫跟暗红,哪个更准确些?
最主要的问题,实验结果跟实际偏差太大,会是在哪些地方出差错呢?
按说,AR的无水碳酸钠和PT的只在标定HCL浓度时用到,就"C"这一个数据而已(我用AR级的标定0.05mol/l的HCL3份平行样结果在0.05683左右,这个值是否偏高?),不可能影响到那么多的蛋白数字吧!(有时候相差10多个蛋白的)