2.2 结果分析 添加不同量的海藻糖对植酸酶热稳定性的影响(见图2)
从图2可见,植酸酶溶液中加入等体积的海藻糖溶液,85 ℃处理5 min后均能提高在高温下的热稳定性,加入40、60和80 mg海藻糖的植酸酶其酶活保留率分别达到了53.4%、57.1%和67.4%,较原酶活保留率17.1%分别提高了36.3、40、50.3个百分点。添加80 mg海藻糖对植酸酶的热稳定性提高效果最好。 3 讨论 3.1 研究进展酶的稳定性一直是困扰其大规模应用的主要原因。为了保持酶的活力,国内外大多采用在浓缩液中加入金属离子、多元醇、多糖类化合物等方法。海藻糖作为一种多醇化合物,既可通过氢健与酶蛋白表面分子相连结,也能通过氢健有效地与外部水分子相连结,使酶蛋白分子稳定。本试验在植酸酶中加入不同质量的海藻糖均能提高商品植酸酶在高温下的热稳定性,其中以80 mg海藻糖的效果最好。其在生产中的应用如何尚需作进一步的研究。 随着基因工程与蛋白质工程技术的发展,定点突变、同序方法和定向进化技术将逐渐应用于酶的热稳定性研究。在分子水平上对植酸酶基因进行改造,使植酸酶本身就具有良好的热稳定性无疑是很有意义的。 3.2 影响试验效果的其它因素 在试验过程中由于试验条件和试验环境的限制,试验结果受诸多因素的影响,其影响因素除了pH值、温度、湿度、作用时间、抑制剂、激活剂、底物和产物浓度,以及植酸、植酸酶来源等外,还表现在以下几个方面:① 植酸酶的活性会因放置时间的加长而使其活性降低,故其酶活力保留率也会随之降低。② 试验水浴温度不太稳定时有变化,从而使试验结果出现偏差。 4 结论 本试验采用绝对法对不同浓度的海藻糖对植酸酶热稳定性的影响进行研究,结果表明添加80 mg海藻糖对植酸酶的热稳定性提高效果最好,酶活力保留率提高了50.3个百分点。在植酸酶液中加入海藻糖比不加时酶活力保留率提高36.3~50.3个百分点。 (参考文献20篇,刊略,需者可函索)(编辑:沈桂宇,guiyush@126.com)李融,天津农学院动物科学系,300384,天津。 苏琰(通讯作者),扬州大学生物科学与技术学院。 |