请高手分析饲用植酸酶活性的检测结果总是很低的原因。

tgz5637 · 发表于 2008-7-5 17:17:11

酶制剂检测，导致误差最大的因素就是底物和稀释倍数。制定植酸酶行业标准的时候，对测定显色的吸光值线性范围规定得很大，这对测定未知样时，会造成很大困惑。可以看看这篇
http://www.jmyingheng.com/ >技术交流>生物技术>《酶制剂检测的非定义性因素的影响》一文。
c 指的是回归方程，这里一般是指一元方程y=ax+b。怎么由标准曲线求回归方程恐怕你要查看书了。检测方法以浓度对吸光值做图，得到的c的单位就是umol/ml，以物质的量对吸光值做图，得到的c的单位就是umol。

如果怀疑试剂有问题，就全部重配重买。
这些只能自己检查-----pH增加pH精密试纸对照校正缓冲液、底物溶液。pH电计用标准液，看看配对了没有？显色剂配对了没有？分光光度计有无偏差？植酸钠底物是否有效？同时注意底物必须现配现用，不能使用超过12小时的底物溶液。
其他的可以把做标准曲线的测定值发来本站邮箱，就可知道回归方程是多少。
最好找已知酶活的样品，做平行测定，可以知道是试剂问题，还是酶本身失活了。

[ 本帖最后由 tgz5637 于 2008-7-5 17:46 编辑 ]

tgz5637 · 发表于 2008-7-7 09:19:17

回归方程数值偏低，表明做标准曲线时，同一梯度标准样液的测定吸光度值偏大；
查查什么原因导致吸光值偏大？显色剂配制错误，分光度计平时是否常用，测其他产品有无问题？标准曲线至少5个数据点的相关性，要求达到 r=0.999。

qinqin0226 · 发表于 2008-7-7 22:59:19

很好的学习机会啊,我本来也要做这个实验的,刚申请了药品的,现在不用做了，由别人去做了,很有些遗憾哦.

JH_C · 发表于 2008-7-16 11:37:18

底物1%燕麦木聚糖经冰冻保存后取出，会产生沉淀，请问还能继续使用吗？

fangke3546 · 发表于 2008-7-18 20:57:27

tgz5637能讲讲标准曲线的问题吗
我做出来的系数这么与你的相差那么大啊，我的在18左右
另外我想问一下，牛血清白蛋白组分几对检测好一些？
谢谢

tgz5637 · 发表于 2008-7-19 15:56:09

直接把标准曲线数据贴上来看看

关于标准曲线请看这个网址。http://www.esnips.com/nsdoc/5426 ... f0a/?action=forceDL

xiaoyanzhu2002 · 发表于 2008-7-29 10:14:27

您的确是高手。受教了，非常感谢！

bingerhan · 发表于 2008-10-21 23:58:57

我想请问一下测植酸酶时标准曲线怎么绘制？怎样来确定它的浓度范围？酶样的稀释倍数又该如何确定？为什么最后都要使样液保持在某一个浓度左右？谢谢！

xiedahai · 发表于 2008-10-22 00:15:19

领教了！请问有没有市场上几大植酸酶公司产品的植酸酶活性的检测数据（不是厂家提供的数据）？在此先谢谢了！

默者 · 发表于 2008-10-22 07:43:37

酶制剂活性测定通常有“测不准”原理，刚开始做的时候酶活总是不稳定，不过时间长了以后便会趋于稳定

请高手分析饲用植酸酶活性的检测结果总是很低的原因。

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木聚糖酶检测

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