纳米氧化铜和纳米铜对肉仔鸡铜表观消化率的影响

　　１﹒３﹒２ 纳米氧化铜。采用固相反应合成方法制备，球形，粒径 １００ ｎｍ，大小均匀，无团聚现象（图 ２）， 纯度 １００ ％， 由山东科技大学提供。

　　１﹒４ 检测指标与方法

　　１﹒４﹒１ 样品的采集。采用全收粪法，从饲喂试验日粮开始，连续 ７ ｄ 收集受试鸡的全部排泄物，剔除杂质， 在 ６０-６５ ℃干燥箱中烘 ５-６ ｈ，室内冷却制成风干样品，准确称量各组受试鸡的排泄物并粉碎， 用样品袋封装、标号， 保存备用。

　　１﹒４﹒２ 采食量。采用清箱底的方法， 精确计算 ５ ｄ 内各组受试鸡的采食量。

　　１﹒４﹒３ 饲料和粪便中铜、锌、铁、锰含量的测定。精确称取０﹒２５０ ０ ｇ 样品于 ２５０ ｍｌ 锥形瓶中，加入 ３０ ｍｌ 浓硝酸，置电炉上灰化至黄烟逸尽， 冷却后加入 １０ ｍｌ高氯酸，加热至无色，冷却，加 ５０ ｍｌ 去离子水，置电炉上加热至沸腾，赶尽二氧化氮，冷却后定容至 ５０ ｍｌ，在 ＴＡＳ!９９０Ｆ 原子吸收分光光度计（北京普析通用仪器有限公司） 上用火焰法测定铜、锌、铁、锰的含量。

　　１﹒４﹒４ 粪便中粗蛋白含量的测定。采用半微量凯氏定氮法。

　　１﹒４﹒５ 蛋白质和微量元素表观消化率的计算。粗蛋白质表观消化率 （ ％） ＝（ 饲料采食量×饲料粗蛋白质含量－ 排泄物量×排泄物粗蛋白含量） （／ 饲料采食量×饲料粗蛋白质含量）×１００﹔ 微量元素表观消化率（ ％） ＝（ 饲料采食量×饲料微量元素含量－ 排泄物量×排泄物微量元素含量） （／ 饲料采食量×饲料微量元素含量） ×１００。

　　１﹒５ 数据处理与分析   铜回收率为９９﹒５７ ％，变异系数为１﹒２５ ％﹔锌回收率为９９﹒３２％，变异系数为１﹒４１％﹔铁回收率为９９﹒０２％，变异系数为１﹒６５ ％﹔锰回收率为９９﹒１８ ％，变异系数为１﹒１９％。各数据采用 χ２ 检验进行比较。

　　２ 结果与分析

　　２﹒１ 不同形式的铜和铜化合物对饲料中粗蛋白质表观消化率的影响   试验结果表明，添加氧化铜、硫酸铜、纳米氧化铜和纳米铜组蛋白质表观消化率分别为 ７３﹒８０％、６４﹒８６％、７２﹒８５ ％和 ６８﹒９４ ％，经 χ２ 检验， 各组粗蛋白质的表观消化率差异不显着（ Ｐ＞０﹒０５）。

　　２﹒２ 不同形式的铜和铜化合物对饲料中铜、锌、铁、锰表观消化率的影响   试验结果表明，添加硫酸铜、氧化铜、纳米氧化铜和纳米铜组铜的表观消化率分别为 ２６﹒８０％、１４﹒０４％、５１﹒２１ ％、４２﹒４９ ％， 经 χ２ 检验，纳米氧化铜组铜的表观消化率极显着高于硫酸铜和氧化铜组（Ｐ＜０﹒０１），与氧化铜组相比，添加纳米铜极显着提高铜的表观消化率（Ｐ＜０﹒０１），与硫酸铜组相比，纳米铜组显着提高铜表观消化率（Ｐ＜０﹒０５）﹔锌的表观消化率分别为３２﹒４６ ％、４１﹒１１ ％、６７﹒６１ ％、５４﹒２７ ％， 经χ２ 检验，纳米氧化铜组极显着高于硫酸铜组（Ｐ＜０﹒０１），显着高于氧化铜组（Ｐ＜０﹒０５），纳米铜组显着高于硫酸铜组（Ｐ＜０﹒０５），与氧化铜组无显着差异（Ｐ＞０﹒０５）﹔铁的表观消化率分别为６８﹒５８ ％、６６﹒０６ ％、７７﹒５９ ％、５７﹒０５ ％， 经 χ２ 检验，纳米铜和纳米氧化铜组与硫酸铜和氧化铜组差异不显着 （Ｐ＞０﹒０５）﹔锰的表观消化率分别为２８﹒１５ ％、１７﹒７９ ％、４３﹒８１ ％和５９﹒３８ ％，经 χ２ 检验，纳米氧化铜组显着高于硫酸铜组（ Ｐ＜０﹒０５），极显着高于氧化铜组（Ｐ＜０﹒０１），纳米铜组极显着高于硫酸铜组（Ｐ＜０﹒０１）和氧化铜组（Ｐ＜０﹒０１） 。

　　３ 讨论

　　Ｆｌｏｒｅｎｃｅ 等认为，营养物质的颗粒大小是影响胃肠道对其吸收的一个关键因素[９]。Ｊａｎｉ 等报道，小鼠口服３种不同大小的聚苯乙烯微粒 （ ５０、５００ ｎｍ 和 １ μｍ）６ｈ 内，５０ｎｍ 粒子出现在淋巴结中并有最大程度的吸收，口服１８ｈ后５００ｎｍ微粒才在肝、脾中出现， 而 １μｍ粒子只有少量吸收[１０]。

　　Ｄｅｓａｉ 在对小鼠的研究中指出﹕ １００ ｎｍ 粒子比其他大粒子的吸收率高 １０-２５０ 倍[１１]。另据报道，粒径小于５μｍ的微粒可通过肺， 粒径小于 ３００ ｎｍ 的微粒可进入血液循环，小于 １００ｎｍ 的微粒能进入骨髓。因此， 纳米颗粒更容易通过胃肠黏膜，从而使其生物利用率得以提高[１２]。该试验结果表明，与硫酸铜、氧化铜相比，在肉鸡饲料中添加纳米氧化铜和纳米铜可显着提高铜的表观消化率。这可能是由于纳米微粒具有表面效应和小尺寸效应。纳米微粒在胃肠道的吸收可以不通过离子交换而直接渗透， 从而提高了吸收的速度和利用率[１３]。纳米氧化铜和纳米铜的铜表观消化率提高， 也可能有相同的机制。

　　张婉如等报道， Ｆｅ２＋、Ｚｎ２＋、Ｍｎ２＋与 Ｃｕ２＋竞争蛋白质的结合点，而 Ｃｕ２＋只有与蛋白质相结合才能被吸收，这种竞争是相互的[１４－１６]。该试验结果显示，与硫酸铜和氧化铜相比，添加纳米氧化铜显着提高了锌和锰的表观消化率。这可能是因为纳米氧化铜以纳米颗粒的形式吸收，而不是以离子的形式吸收，减弱了 Ｃｕ２＋对 Ｚｎ２＋和 Ｍｎ２＋的拮抗用，使 Ｚｎ２＋和 Ｍｎ２＋更容易与蛋白质结合，从而提高锌和锰的利用率。这也表明纳米氧化铜可以扩散吸收，而非主动吸收，其详细机制有待进一步研究。

　　（田相迪，朱风华， 孙金全，李曙明，朱连勤）

　　参考文献略