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[养猪技术] 【原创】猪唾液用于疾病诊断的实用指南

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发表于 2016-8-12 11:19:53 | 显示全部楼层 |阅读模式

  一、唾液用于疾病诊断的常用方法

  1、疾病监控

  预后分析及唾液可用于动物疾病信号的监控,及评估猪群内的流行病原。预后分析

  并不是一种诊断程序,因此唾液也不能用作排除感染的依据。

  2、检测抗体

  唾液样品可用于检测PRRSV抗体,血清学检查不适合用于普遍存在的病原,如PCV2。

  3、检测病原RNA/DNA

  唾液样品还可用于检测造成肺炎的病原,如猪肺炎支原体、PRRSV、SIV等,但这些病原在唾液中的存在并不一定与疾病相关。

  二、动物选择

  1、感染者:选择已表现出感染信号的动物

  2、无症状者:随机选择无症状的动物

  3、跟踪感染时间:同一动物进行两次取样,两次间隔2-4周

  4、检查感染状况:对不同年龄群的动物分别取样(如4、8、12、16、20、24周龄)

  三、取样数量

  由于缺乏对唾液样品的诊断灵敏度的相关数据,最适样品大小目前还没有最终确定。样品数量取决于观察的单位,不能超过栏水平。

  下表1列出了不同发病率情况下的唾液取样数,实际取样数应等于或高于表中的数值。

液1.png
  四、取样前准备工作

  准备一条新的、干净的、原色棉绳,直径适合于猪场的大小和年龄。如断奶仔猪为1cm,生长育肥猪可为2cm。禁止使用合成纤维绳,因为它们的吸收唾液的能力不及棉绳。

  绳子的长度取决于具体的固定的位置,如固定在天花板,则需要较长;如固定在栏壁,则长度较短。

  一条绳子足够适用于10-15头取样猪。但是,如果栏舍内饲养猪只增加,则需增加取样绳的数量。

  每栏使用一条新的棉绳。

  准备一些灭菌的试管(5-12mL)用于储存收集到的唾液样品,确保试验无菌。

  取样最好在猪只进食前或后的2小时执行,这样可提高猪只对取样绳的兴趣,提高取样效率。

  五、取样技术

  1、固定取样绳。在栏舍内选择一个位置固定取样绳,要保证栏内所有猪均可接触到取

  样绳。固定位置应干净,远离饮水和进食区。取样绳的低端应与猪站立时嘴的高度相平。如果同栏内分配多个取样绳,它们的位置应尽可能的分开。

  2、取样绳放置时间为30min。如果发现试验猪对取样绳不够活跃,可延长至1小时。

液2.png
  3、小心取下取样绳,注意不要接触到地面。将取样绳内的唾液挤至一个干净的塑料袋或容器内。

  4、将上述塑料袋剪开一个小口,将里面的唾液转移至准备好的无菌试管内。每个样品至少需要2ml。

液3.png
  5、收集后,如果发现试管内有明显的杂质,如饲料等,则需用离心机对样品进行纯化。离心速度为2000x g,10分钟。

  6、在试管上标明取样栏舍、取样猪场、取样日期。

  六、样品保存

  在将样品送往试验室前,可暂时先将样品储存于冰箱内,但必需在1天送往试验室分析。如果不能,则应该将样品保存于–20至–80°C冷库。

  七、送检

  在送检前应确保你所选的试验室具备唾液分析的能力。常规血液、组织的分析方法并不适用于唾液。另还需附上相关的信息,如兽医姓名、猪场名称、发票信息、所取样品的动物种类和年龄、取样日期、取样数、样品类型、检测项目等。

译者:户启蔚
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