关于产胶原蛋白酶菌株的筛选

kiroco

在实验过程中，发现了很多的问题，比如在初筛平板上可以看到明胶酶产生菌周围有隐约的雾状圈，而且在冰箱中放置一段时间后更加明显，通过后面实验也知道了这样选出的菌大都是能分解明胶的，而且此时的圈的边缘与滴加了酸性汞后产生的透明圈的边缘是一致的，这大大的提高了对目的菌株的筛选效率和准确度；在遇到前后两次实验得到的数据相距很远时（如菌落水解圈与菌落大小的比值），采用多次测量后抛弃相距太远的值，再求平均的方式；在测定酶的活力的开始阶段是一个漫漫摸索的过程，往往是显色后颜色太深，仪器不能测定或是数据大大的超过了标准曲线的有效范围，需要对酶液和胶原逐个浓度的稀释，在多次的测量后确定为实验中的数据；等等。


对COL-J菌重复做了牛皮消化实验和酶活性测定实验，得到与前面实验相近的结果，表明此菌的胶原蛋白酶活力稳定。而且本实验所测的酶活是在常规条件下测定的，在后续的菌的培养条件的优化后，相信酶活力还会有很大的提高，具有更高的应用价值。


应当注意的是，透明圈直径与菌落直径之比的大小不能完全代表酶活大小, 仅以此作为弹性蛋白酶酶活力大小的定量指标是不太可靠的[10]，只能作为大体的依据，本实验的研究结果与之一致，如COL-J的比例为3.71，不是最大的，但却是牛皮消化效果最好的。透明圈法对于大多数的菌株还是有用的，对本实验有很好的指导意义。