巴尔吡尔对畜禽常见病原菌体外抑菌效果研究

畜牧人专题

　　完成单位：华中农业大学农业微生物学国家重点实验室305分室
　　为了试验巴尔吡尔对畜禽常见病原菌体外抑菌效果，进行了此次研究。选用金黄色葡萄球菌、伤寒沙门氏菌、巴氏杆菌和魏氏梭菌等4种畜禽常见病原，与不同浓度的巴尔吡尔共培养，检测巴尔吡尔的抑菌效果。
　　1  材料与方法
　　1.1  材料
　　1.1.1  药品  分别放置了1年和2年的巴尔吡尔溶液，由北京娜尔生物技术有限公司提供。
　　1.1.2  菌种  金黄色葡萄球菌J6、伤寒沙门氏菌SL1344、巴氏杆菌091028、魏氏梭菌20100302由华中农业大学农业微生物学国家重点实验室鉴定、保存和提供。
　　1.1.3  培养基  TSA、TSB培养基
　　1.1.4  器材  20mm×23mm的12孔细胞培养板，酶标仪
　　1.2  方法
　　1.2.1抑菌试验
　　抑菌试验使用4个浓度梯度的巴尔吡尔药液，分别为原液，用TSB按1：2，1:5及1:10稀释的药液。 将4个浓度梯度的药液分别加入12孔细胞培养板中（20mm×23mm），每孔2.5mL。将培养了8h的菌液用TSB作10000倍稀释，培养板每孔加入25?l。另设一孔不加菌液的药液（2.5mL TSB+25?l药液）对照和不加药液的菌液对照（2.5mL TSB+25?l菌液），置于37℃温箱培养16h，检测OD600值，计算抑菌率，分析并判定抑菌效果。
　　1.2.2 抑菌率计算
　　抑菌率的计算使用下列公式。

　　抑菌率%=[（OD细菌对照-OD空白对照）-（OD试验孔-OD空白对照）]/（OD细菌对照-OD空白对照）*100%

　　2  结果
　　不同浓度的巴尔吡尔药液对4种病原菌的抑菌率各不相同，从0-100%。各抑菌率见表1
　　表1 不同浓度的巴尔吡尔药液对4种病原菌的抑菌率

		抑菌率(%)
	菌   名	原液	1/2	1/5	1/10
放置1年的消毒液	葡萄球菌	100	100	99	96
	沙门氏菌	90	88	89	64
	巴氏杆菌	94	92	94	94
	魏氏梭菌	95	99	94	94
放置2年消毒液	葡萄球菌	93	91	93	0
	沙门氏菌	90	87	88	0
	巴氏杆菌	94	91	93	93
	魏氏梭菌	94	93	94	94

　　2.1 不同稀释倍数的巴尔吡尔药液对同一种菌的杀菌效果不同。随着稀释倍数的增大，抑菌率有所下降，杀菌效果降低。原液的抑菌率最高，抑菌效果最好。1:2和1:5稀释的消毒液抑菌率差别不大，而1:10稀释的消毒液抑菌率则明显降低。
　　2.2 同一稀释度的巴尔吡尔药液对不同菌种的杀菌效果也不同。以放置一年的消毒液1:5稀释的药液为例，其对葡萄球菌的抑菌率达99%，而对伤寒沙门氏菌、巴氏杆菌和魏氏梭菌的抑菌率分别为89%，94%和94%
　　2.3 巴尔吡尔药液存放时间的不同，其对各种菌的杀菌效果也各不同。除对葡萄球菌的抑菌率降低外，对另3种菌的杀菌效果变化不大。以1:5稀释的药液为例，当药液放置1年时，对葡萄球菌的抑菌率可达99%，对沙门氏菌为89%，对巴氏杆菌为94%，魏氏梭菌则为94%；当药液放置2年时，对葡萄球菌的抑菌率只有93%，对沙门氏菌为88%，对巴氏杆菌仍为93%，对魏氏梭菌为94%。
　　3 结论
　　鉴于以上结果，为了有效地利用巴尔吡尔药液杀灭畜禽常见的病原菌，推荐将原液做2- 5倍稀释，不要超过5倍。为了保证对葡萄球菌的杀菌效果，巴尔吡尔药液放置不要超过1年。
　　附录  巴尔吡尔药液抑菌试验个孔OD600

		OD空白对照	OD细菌对照	消毒液梯度
	菌   名	TSB	TSB+菌液	原液	1/2	1/5	1/10
放置1年的消毒液	葡萄球菌	0.075	0.962	0.068	0.075	1/5	0.114
	沙门氏菌		0.617	0.063	0.072	0.082	0.224
	巴氏杆菌		1.073	0.060	0.082	0.068	0.066
	魏氏梭菌		1.177	00.063	0.080	0.068	0.076
放置2年消毒液	葡萄球菌		0.902	0.064	0.077	0.069	1.590
	沙门氏菌		0.589	0.058	0.078	0.067	1.409
	巴氏杆菌		1.034	0.067	0.093	0.069	0.068
	魏氏梭菌		1.164	0.065	0.083	0.068	0.068