鱼病手册4

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第十章
鱼病治疗

10.1药物导论

相对于水箱里的少部分水，对于鱼病的健康来说是缺点，对于鱼病的治疗来说，是它的优点。首先，水质可以精确的测量，所以能给出反应所需剂量的正常范围。其次，可用少量昂贵的药品。

许多药和化学试剂用于控制鱼病是有毒的，必须远离小孩。治疗用的化学试剂和颜料的效果，是根据它们对寄生虫的毒性要大于对于宿主的毒性。毒性不同，药的安全性也不同。但是，鱼的极限耐药性和寄生虫的耐药性常是相似的，所以说明书的剂量必须严格遵守。另外，药的效果和鱼的耐药性都依靠数量和水温。耐药性各不相同。低剂量一般应尽量避免，因为那样没有寄生虫被杀死。预防治疗用常量或额定量，都是不合理的，甚至是危险的。这些将会导致寄生虫耐药性的产生，不能控制它们，甚至高浓度也不能控制它们。

由于一些寄生虫在最适温度，能繁殖的更好，也可用调节温度来支持药物治疗。离开了它们的最适温度，寄生虫对药物更加敏感。温度是上升还是下降依药物而定。药物的温度说明要严格采纳。

总的来说，当你用一种药物治疗某一鱼病后，如没有任何经验，不能预测它的耐受性。单独地进行药物治疗实验，看一下对鱼的影响。挑选最虚弱的一个，如果忍耐这个治疗，那么别的同种鱼类也能治疗。特别注意，鲶鱼和脂鲤在同一缸里，它们对许多药的副作用敏感。

有些治疗应用于整个水族箱，是为了杀死病原体，而不是鱼自身。另一些治疗是在单独的容器里，否则这个过滤细菌群被杀死，因此导致在水中形成毒素。许多药物有赋形剂能引起大量细菌的繁殖，消耗氧，且不能给予鱼帮助。

每种药的使用方法和时间都在说明书上，但是，有可能体弱的鱼或敏感的鱼也不能忍受这个剂量。甚至抗生素治疗也不能立即停止鱼的死亡，特别是破坏内部器官的细菌感染。由于内部器官功能的损伤，即使治疗成功，鱼也会死亡。

一般说来，鱼的治疗需1到几天的浸洗。你也容易理解，药物起的作用，既能杀死鱼体上的细菌，也能杀死水箱别的细菌和微生物，这些死亡易污染水质。

鉴于滤网也包含细菌，所以，首先应清洗滤网，在治疗前活性炭应该去掉。治疗后，换水几次。再用活性炭去掉水中的药物。药物用过后，过滤器需要几周才能重建活的细菌群。过滤物质的处理是首要的，当适合时，分别用于治疗。紫外线能分解许多溶于水的药物，因此UV灯在治疗时应关掉。

在精确体积的水中进行浸浴几分钟到几小时。高剂量的药浸浴是需要的。温度和水中化学物质必须适合正常的水族箱。在短时浸浴时，观察要仔细。如果发现它们翻身，立即拿开它们。不要让浸洗在水族箱里进行，那样会让水中所有植物和细菌都杀死，且不可能尽快的去掉药。药剂师或兽医能帮助你获得一定的药物，但是在宠物店有方便的家庭水族爱好者提供的特别配药。

水族养殖者应该熟悉体重，测量用药的溶解量和别的化学物质。在公有制系统，体重是以克或千克计量，1kg=1000g。对于液体计量，养鱼者通过烧杯就知道体积，有刻度的圆柱体或有刻度试管。液体计量用升或毫升，或cm3，1L=100m3（或1000cc）。

准确的天平称量范围是从0.5g到50g是必要的。另外，药剂师可能给你非常少的剂量用于治疗。但是，在宠物店，通常的剂量恰好是鱼的用量。有时，买的大量昂贵的药的开消证明几个养殖者池塘的资源。

许多治疗用的浸器液储备是必要的，通过溶解一定量的药在1升水中。1ml这种混合物包括1/1000总量。一般来说，1g药溶解在1升水中，制成储备液，每毫升包括1mg药。

10.2治疗建议

下面的治疗建议与前面描述的疾病是相配的。规定的数量是许多鱼类的耐药量，（鲶鱼，脂鲤和鳗鲡的治疗，在治疗前应先试验一下）。

这里介绍的一些用于人类的药，它们可能产生比宠物店的药更多的副作用。应该用于疾病精确的诊断之后。它们仅用3天宠物店的药不起作用时才用。宠物店的药应该列有成分和使用目的。没有真正的特效药，因此应注意所谓的全治药。

两种分别安全的药，如果用在一起可能是危险的。不同疾病的成功治疗，首先应先治严重的病，需要的恢复期至少3天，治疗和清洗水中所有的药，通过换水，象前面描述的一样，甚至重复同样的治疗。

乱用抗生素会导致抗体的产生；可怕的是这些抗体会转移到人的细菌的病原体上。专家认为药物广泛，但是抗生素应该仅在紧急情况时才用在水族箱里。礤胺类药和nitrofurans应该先试用。抗生素治疗应该在全玻璃缸中；抗生素的洗液不准流入下水管系统。它们应该放在治疗箱里，加热到50-60℃；除了氯霉素其它药物会在2天内分解，通过加入碱液或碱性Na2CO3升高PH值超过10，在两小时内破坏药。

常建议在食物里混入药，这个药直接进肠道，治疗针对整个水族箱。放药在食物里，必须是习惯了的食物，且鱼还能采食。

下面的列出的药没注明的是用于鱼内服的。

下面的治疗建议已经经过完全的测试，但是不能保证药在不同的水中有反应效果。一些物在水中分解而增加毒性，而另一些有杀菌作用，且能杀死重要的细菌，导致水箱中鱼中毒而引起死亡。另一些药能导致细菌的过渡增长，会引起水的污浊和鱼缺氧症状的出现。这些问题常可通过换水和定时过滤而避免。

避免在晚上给鱼用药，因为在用药后应该观察几个小时，如果鱼表现任何中毒症状，立即换水或把鱼移到淡水中。如果氧下降，要安装别的增氧机。

因为上面的原因，所以我们不能保证我们的治疗建议是成功和安全的。

10.3方法A—D

方法A1：氯霉素

用途：腹部水肿病，疖疮病，细菌性鳍烂掉，弧菌病，细菌性鳃病

作用范围：G+，球菌，杆状细菌芽，G-和球菌；放线菌类，屈挠杆菌，螺旋体，立克次氏体和大的病毒。此药在低温、干燥的环境下能储存几年，可用于浸洗使用。

剂量：40mg/L的作用10-20h。此药在加入水箱之前，需溶解在乙醇里，在治疗期间，用开动过滤器，清洗吸收剂或废棉药或泡沫过滤物质。常检查鱼和水环境。如果水变污浊，马上把鱼转移，如果需要，把它们转到新鲜的混合洗液中。

氯霉素可通过方法B5混在鱼的食物中，由于可耐温度得到100℃，能在温度为80℃水中使用。

服用剂量：500mg/100g食物，每天给药2-3次。

方法A2：用氯霉素+吖啶类溶解于1升水中，再加40mg/L氯霉素。治疗程为12h。

方法A3：硫酸新霉素

用途：多数细菌性疾病，鳍烂掉，皮肤肿胀和新的discus sisease。

作用范围：G-和球菌，可用于长时的浸洗生棉花或泡沫器过滤材料。

剂量：2g/100L水中，作用3d。有些敏感鱼会中毒。

服用剂量：250mg/100g食物，通过方法B5使用。每天3次，用3d后间隔24h。混合使用的最大温度是40℃。此方法不用于内部器官的感染，仅用于肠道的感染。

和呋喃妥因混合，用上面的剂量可用于治盘丽的新病。先决条件是寄生虫的二次感染必须先控制。在治疗前，把鱼转到干净新鲜的水中。鱼仍然要浸洗3-5d，然后把它们转到新鲜的水中。接下来的治疗是用呋喃妥因进行6-10d治疗，但通常不需要这么长。

方法A4：Combisonum eye Ointment containing neomycin

Combisonum是当鱼自身感染后选择的药。它能抵抗细菌感染和加速治愈。用湿毛巾包着鱼，让这个鱼每天离开检疫箱。用吸墨纸擦干伤口，并去掉一些死了的组织。然后用Combisonum，当伤口边缘开始愈合时，每隔2-3d治疗一次。作为预防，杀真菌的软膏每隔3d用一次或mycostatie agent加在水中。

方法A5：四环素

用途：腹部水肿病，弧菌病

作用范围：G+球菌和细菌，G-球菌，细菌，放线菌类，螺旋体，和大的病毒病。

此药能作为长久的浸洗，在剂量为A的水箱中，也可用于清洗生棉药和过滤泡沫材料。水变颜色，几种植物将会破坏，因此应单独的水箱使用。

A剂量：1g/100L升中每4d

B剂量：100mg/L水中，每24h

以方法B5的描述用于口服，750mg四环素混在100g食物中，然后，每天两次，间隔6小时，用7d，引起兴奋的温度是40℃。

方法A6：金霉素，土霉素

用途、用法、效果和剂量与四环素相似。因为别的成分存在，土霉素仅用于饲料中。

Doxycycline100同样是土霉素，常叫Vibvamycin。

剂量：一个胶囊的剂量加到20L水中，用2-4天。

方法B1：热治疗

升温治疗也有很长的历史了。慢慢升温，幅度不要超过1℃/h。升温疗法是为了创造一个环境，使病原不能生活或不能繁殖。并不是所有物种都能耐高温。化学治疗有时更适合鱼。热治疗可用于下面的病原体。

口丝虫属：33℃用4d

小瓜虫属：33℃作用10d

卵旋虫属：33℃-34℃作用24-36h

绝对要水质新鲜清洁且增氧是必要的。

如果看上去有不良表现，这不是由于污染的水或化学因素，2-3d增加温度3℃，有直接的作用。因为抗体的形成，抵抗的感染力增加了。因为盘丽鱼的温度能增加到35℃。但是，温度的增加，能加强鱼新陈代谢的负担，因此增加压力和抵抗。

方法B2：转移方法

用这种方法，小瓜虫生命循环中断，因此能防止此病的传播。此种方法费时费力，需要5个水箱。每隔12小时，把鱼转到新的水箱里。包囊脱落减少游走纤毛幼虫，当鱼被转移到下一个水箱时，当这个鱼第六天回到第一个水箱时，这些游走芽胞的细胞时已经死亡。所有的水缸温度应在25℃，如果治疗持续23天，你一定会看到鱼没有小瓜虫了。但是，每天的转移，对鱼的应激较大。

方法B3：Screening method

此种方法适合所有不能发育为游走细胞的寄生虫或幼虫。过去主要是用于哺育鱼群。在饲养箱里，一屏或一格子安装2-5cm高在底部。网眼对于鱼来说太小，但是能让寄生虫的虫卵通过并流入粪便里，因而使它们与鱼体分开。这些幼虫从而死亡。但是，排出的mulm被收集在屏封以下。

方法B4：维生素

你很容易提供你自己的终生食物，包括所有的重要维生素和微量元素。刮一些牛心在盘子里，加一些深冻的菠菜碎片。铺成了一5mm厚，然后洒足够的维生素粉末在上面，直到表面是白的为止。

用液体维生素是没有效果的，因为它不能与食物相粘连。铺同样数量的酵母粉在食物上面，直到牛心和菠菜融化（大约需15分钟）。然后，混合在一起，揉好，饲喂正常的鱼。好的胡萝卜能代替菠菜。

当用Osspulvit——N，Neooalcit tablets和Calcipot D3维生素缺乏，从这些产品能提供VMP tablebs，通过捣碎这些药片，就象上面描述的一样。

方法B5：调制药物饲料

准备2/3牛心或瘦牛肉的饲料和1/3菠菜，所有的成分必须剁碎的足够小，以致于小鱼能消化。混和后，分成50g一份在小塑料袋里或包里，冷冻，以后需要时用。

现在，对于小的锡罐，加50ml冷水和1g能产生动力的琼脂。拿一部染色，以使食物更适口，再加一些maggi，不要超过一杯汤的需要。加热时，用一个小叉子混合直到琼脂溶解。大约80℃，搅拌50g牛肉磨成小块，不要让温度下降。当所有的牛肉磨细后，从水里去掉锡罐，让它慢慢冷却。依靠热的稳定性，药搅拌加热，在大约40-50℃时在凝固以前加入。许多抗生素不耐热，因此药物混合物，必须迅速冷却，在活性成分挥发之前。不要让它凝固，或琼脂呈流体。做完后的药物呈固体，有弹性，鱼习惯吃的饲料，在2-5℃的冰箱中能保藏3d。

作为饲料，在达到28℃时，切成鱼嘴大小的小块，仍然保持固体。至少12h以后，所有没有吃的食物必须从缸里拿走，否则会发霉。任何抗生素混合在饲料里，不久就会失去它的药效，因此不要给太多的药物饲料，以防它超过1h还在吃。

方法C1：吖啶黄素(吖啶黄)

用途：体皮污染或有云状物，嘴烂掉，鳍烂掉，伤口消毒

适用范围：口丝虫属，斜管虫属，车轮虫，小车轮虫，屈挠杆菌，鳍和皮肤的污染。

所有的名字指的是同一种药。颜色浓，Acriflavin能用于水族箱的完全消毒，但是，能破坏植物。在加药之前，过滤物质应该被清洗。治疗后，过滤器加活性炭除去残药。

贮液：1g/1L水

剂量A：1ml贮液加在每升水中预防感染

剂量B：3ml贮液加在每升水中用4d，预防早期感染

剂量C：5ml贮液加在每升水中用2-4d，防止柱状菌，口丝虫属，车轮虫和小车轮虫。

剂量D：10ml贮液加在每升水中用10天或20天，注意：许多鱼不能忍受此剂量。

方法C2：酒精

水蛭附在鱼体上，可用棉花占酒精涂在水蛭上。此种治疗，鱼需离开水面。

方法C1：碱性亮绿（Basic brilliant green）

这种染料在各种宠物店为鱼准备的通用的药。它们比纯的煌绿方便。

用途：皮肤污浊，烂鳍，烂鳃，皮肤真菌，和原生动物。

作用范围：G+，皮肤真菌；和原生动物病。

在单独的一个水箱治疗。用水清洗过滤的生棉花和泡沫材料，这个治疗对许多鱼是有毒的。

储备液：1g/L，放在棕色瓶中。

剂量A：2ml储备液加到12.5L水中，作用24h，然后全部换水，或者把鱼称到另一个水箱中，在第三天重复治疗。作用于细菌皮肤感染。

剂量B：2ml储备液加到15L水中，把鱼在此液中浸洗4h一次，作用3d。治疗的洗液必须是新鲜的水，此法用于治疗寄生虫和真菌。

方法C4：硫酸奎宁，盐酸奎宁

用途：淡水卵旋虫

剂量：1g奎宁加入到100L水中，作为3d连续浸洗的洗液。

奎宁的毒性对鱼敏感，低等动物不能忍受此药。盐酸奎宁是好于硫酸奎宁。虽然奎宁溶于水后一段时间会分解，但是治疗后，奎宁易被活性C吸收。在治疗前清洗过滤物质。先让鱼在一个小的水缸里治疗，然后再在水族箱自己治疗。此种方法当再灌入水后，一般没有鱼死亡。以后，换了所有的水。如果水箱中的水变得污浊，把鱼移到单独的水箱里治疗。

方法C5：Concurat L10%

这是一种广谱驱虫剂，牛、羊、猪和禽常用。因为有甜味，必须远离小孩。

用途：肠道线虫

剂量A：2g/L，先浸洗鱼体，血红色虫，直到幼虫死亡，然后立即饲喂鱼。

剂量B：混合1gConcurat在100g食物里，通过方法B5在50℃下混合。5d给一次。

方法C6：二甲基亚矾

DMSO是一个用于鳃，皮肤和肠道蠕虫的溶剂，由于它的活性成分在水中是不溶解的，因此第一次要溶解在有机溶剂里。DMSO是近来开始用的，有非常强的毒性，不要与人的皮肤相接触，不要让孩子抓它。当没有别的化学物质或药在水里时，鱼对此药的耐受力是非常强的。甚至水中的预备物质也能变成有毒，在目前的DMSO下，水箱和饲养设施必须绝对的要清洗。在DMSO下，高浓度的亚硝酸或氨能使鱼昏睡。

预先冲洗过滤材料，换掉大部分水，有很好的效果。DMSO也能引起水箱不好闻的气味达一周。由于此治疗也能杀死虫卵，所以没有必要重复治疗。因为所有上面的危险都与DMSO有关，所以水族养殖者不应重复使用。

自从1988年丙酮溶解在氟茉达唑里有很好的耐药性，使用非常成功。所有鳃和肠道蠕虫和它们的卵都被破坏了。仅在100倍正常剂量时，才对鱼有毒。不会留下任何不正常的气味在水缸周围。饲喂flubenol5%，再加B5能破坏肠道蠕虫，但是当鱼吃了底部的虫卵后，会再感染。

剂量A：200mgflubenol5%在100L水中，然后加5ml丙酮或DMSO，摇动几分钟后，分布在易感水的表面。5-8天后，通过换水去掉药，水变得轻微浑浊。在治疗后，注意增氧，细菌过渡繁殖，引起污染和缺氧症状。换水是必要的。

剂量B：加100mgflubenol5%到100g饲料中混合B5，每两天给5次。在这些天，仅一次用于正常食物中。

显微镜检测治疗在10d内不会发现任何结果，但是这段时间蠕虫开始死亡。那是可以预计的，因为flubenol5%阻断了从肠道来的营养。鳃片蠕虫需8d，Oxyurida大约10d，Capillaria需15d。但是，雌虫破坏了虫卵壁，在治疗的第二天。它们看上去呈畸形和破裂驱除时。在第三天时，因此没粪便在虫卵里看见，或在鳃部，

方法C7：福尔马林

福尔马林是高毒和致癌的。

用途：皮肤和鳃的外寄生虫感染。如果鱼有大面积的伤口不要用此药。

作用范围：鳃、皮肤蠕虫，斜管虫属，车轮虫

剂量：短地浸洗用2-4ml/10L水中作用30分钟。

对鱼观察仔细，如果鱼失去平衡后，要停止治疗。许多鱼对福尔马林敏感。此药作用于卵需3d内重复。治疗后，把鱼放到没有寄生虫的水箱里。对于Brollklynella hostilis，Blasiola建议用2.6ml福尔马林在单独的缸里使用。

方法C8：Gabbrocol

用途：白色和灰色粪便

作用范围：遥道鞭毛虫和纤毛虫

Gabbrocol能抵抗鞭毛虫和纤毛虫，可通过B5用来浸洗和饲喂。

因为运载有效成分的赋形剂是葡萄糖，Gabbrocol洗液有点问题。治疗需在空的水箱里，增氧要足，要清洗生棉花或泡沫材料。因为细菌的繁殖，所以葡萄糖会引起水浑浊。在18h后，O2缺乏常出现，引起鱼呼吸困难，然后窒息。鉴于健康的鱼不会出现，一般说来仍然在洗液里超过18h。

当洗液变浑浊时，把鱼转移到清洁的水中。这个时间足够治疗。如果你想用别的治疗，那么在12h后，把鱼转到另一个水族箱中，并加点Gabbrocol。细菌的增殖和水浑，通过用蒸馏水或开水。治疗箱必须完全用势水清洗。

剂量：溶解5gGabbrocol在30L水中，让鱼浸洗18h。在有些病例，在另一缸加洗液再浸洗。

饲料剂量：调制2gGabbrocol到100g饲料中，在40℃，饲喂3d。在严重的病例，饲喂这个饲料，直到白色粪便消失，再继续治疗3d。

方法C9：Griseofulvin，Fulvicin tablets

用途：嘴部真菌，皮肤具菌，鳃腐烂和别的mycoses。

作用范围：几乎所有的鱼病真菌。由于常几个鱼感染，可准备一个长浴缸。

剂量：10mg/L或500mg药片到50L水中。

把药片捣碎为粉末，溶解在热水中。3d后菌丝消失，可停止治疗。如果水箱已经有真菌，这个治疗可能会损害植物。治疗后，换一半的水，通过活性C，去掉余下的药。

方法C10：碘化钾和碘

用途：甲状腺肿大

良性甲状腺肿瘤能用这些药治疗。仅2-4周后，就会恢复。在这段时间肿胀或肿瘤慢慢会消退。在水缸里进行治疗，不要用活性C过滤。

储备液：0.5g碘和5gKI溶解在100ml水中。

剂量：用试管，加1滴储备液在5L水中。更精确的是1ml储备液加到50L水中。正常的剂量是每换一次水重加一次储备液。

方法C11：高锰酸钾

用途：非常严重的下列寄生虫感染

范围：车轮虫，鲺属，鳃寄生虫，水霉

治疗可用在单独的一个水缸里短时浸洗30-45秒。这个引起鱼中毒的剂量接近杀死寄生虫的剂量，所以此种方法治疗仅适用于紧急情况。治疗可用方法C18对鱼是容易治疗的。药效在脏水中比在干净的水中低。

剂量：短时浸洗100mg/10L水，在浸洗鱼时，要观察鱼的状况。鳃片蠕虫治疗，重复3d。在没消毒前，不要把鱼放回同一水缸中。

注意：因为KmnO4在水不稳定，用小剂量浸洗几小时或几天是不合理的。

方法C12：NaCl

NaCl是古老的治疗鱼病的药

用途：早期皮肤、鳍阴暗和不严重的寄生虫感染

范围：口丝虫属，斜管虫，车轮虫，真菌。

对于轻的病例，盐可用于长时和短时的浸泡。

剂量A：（短时浸洗）15-20g/L水中。浸洗10-45分钟

剂量B：（长时浸洗）19g/12.5L水中，为软水鱼；3g/10L水中，为硬水鱼。

中间的不得不估计。5天过后，通过换水而减少量。盐浓度达到2g/10L，水中植物会破坏。我们可以准备我们自己的生理盐水，通过溶解6.4g/L水中。

方法C13：CuSO4，CuSO4•5H2O

用途：卵甲藻，藻类，真菌和以下引起的混和感染

作用范围：口丝虫，水霉属，鳃霉，卵甲藻，藻，三代虫属

储备液：1gCuSO4和0.25柠檬酸加到1L蒸馏水中。

剂量：12.5ml/10L水中，作用10天，在3d，5d和7d时，剂量减半。

测试反应中的Cu的浓度，现在用于诊断水中化学物质是有价值的。在治疗期间，水中的Cu不应该低于0.12mg/L，也不要超过0.18mg/L。每隔一天测试，并加入失去的Cu。低等动物不能忍受此种治疗。直到Cu的浓度降到0.3mg/L，它们才被去掉。或别的鱼转到宽的玻璃缸中，并在这里治疗。清洗过滤棉和泡沫材料。感染了真菌和藻类的鱼的治疗，可用1g CuSO4加到10L水中，作用10-20分钟，植物可能会破坏。在治疗前淡水的硬度必须在10ºDH。

方法C14：隐核虫的混合治疗

储备液：1gCuSO4+2g甲基兰+0.25g柠檬酸加在1L蒸馏水中。

在单独的一个容器中治疗，低等动物不能忍受这个治疗。

剂量：12.5ml储备液加到10L水中，剂量在第4d和第8d时减半。最好控制Cu的浓度在0.15-0.2mg/L之间。在治疗期间，清洗过滤棉或泡沫材料。

方法C15：混合治疗隐核虫

治疗包括两条。第一，鱼短时浸洗可用4mgCuSO4+2.2ml福尔马林到10L海水中。然后把它们转到长时浸洗用20mgCu加到100L海水中，治疗必须持续10d。短时浸洗必须在每隔48小时重复。

方法C16：草酸盐孔雀石绿

用途：皮肤寄生虫，皮肤污染，皮肤真菌

范围：小瓜虫，车轮虫，斜管虫，水霉

保存在低温，远离阳光的条件下，这个洗液是稳定的。不要把孔雀石绿和食物一起放在冰箱里因为孔雀石绿具有高毒和致癌性。宠物店里的孔雀石绿准备液，仅当这些不反应时，应该用纯物质，即使是用过的。

剂量A：6ml储备液加到100L水中，在第3d，6d，9d天时，经一半的剂量，12d后，换1/3的水。任何换水必须重新加剂量。

在治疗期间，注意通氧，孔雀石绿是一种强烈的染料，染色被去掉非常困难。一般说来，即使敏感鱼也能忍受它的剂量。在水里有大量微生物，或有活生物滤器，这个剂量不得不增加。但是，不要超过15ml加到100L水中的剂量。敏感鱼类不能忍受剂量A，在一般情况下。在这些水箱里，用4ml储备液加到100L水里，然后在第4d，8d，12d时加2ml。

剂量B：通过G.blasiola，13-15mg/100L海水对Brooklynella spp.是有效的。治疗可用单独的一个水箱，并清洁过滤装置，并有良好的充氧3-4d。有可能上面的剂量在准备的海水鱼可能不能忍受。

方法C17：甲基兰

用途：皮肤污染和真菌感染，预防真菌的感染和post-travel stress，血液疾病。

范围：口丝虫，斜管虫，车轮虫，水霉，隐鞭虫属，锥体虫属

甲基兰长时浸洗做为预防和治疗疾病效果都较好。处理水族箱，虽然不需要活性碳，但是，需清洗过滤棉或泡沫材料。

储备液：1g甲基兰加到1L水中。

剂量A：1g储备液加到1L水中。这个剂量可用来净化处理水族箱。5d过后，用活性C去掉剩余的残渣。

剂量B：3ml储备液加到1L水中（加强剂量），在单独的一个水缸里，以此浓度作用5d。

剂量C：200ml储备液加到10L水中作用30分钟治疗外寄生虫。

注意：敏感鱼类不会耐此药。

剂量D：作为感染后预防感染，可用50ml储备液加到100L水中。

剂量E：作为预防真菌感染鱼卵，可用30ml储备液加到100L水中放在哺育箱中。

方法C18：Metriforate,Masoten,Neguvon 100%,trichlorphon

用途：皮肤和鳃外寄生虫感染

作用范围：车轮虫，鲺属，鳋属，锚头蚤，指环虫，三代虫属

Masoten对甲壳类寄生虫和皮肤、鳃寄生虫具有强毒。长时浸洗比短时浸洗富有成效。在高浓度28℃以上对许多鱼类是有毒的。大的鱼类比小的于类对此药有耐受力。脂鲤和鲶鱼对此药特别敏感。此药重复使用会使鱼丧失生殖能力。用过此药后的鱼的后代感染此病，治疗需用更大的剂量。

治疗可在水族箱里进行。仅是非常干的粉末才能用；如果成团了，是不能用的。Masoten储存应用螺旋的密封盖密闭，超过几个月后会失效，并变得更有毒性。测试表明失效是由于吸收了空气的湿气。更多水分的吸收，对鳃寄生虫的作用越小，而对鱼的毒性越大。新买的Masoten的耐受性比储存的Masoten好。这个程序被耽搁，通过立即包装，买Masoten放进密闭的玻璃瓶里，然后储存它们，如一些干燥剂，大的玻璃容器里，例如坛子，或玻璃瓶，在塑料袋里密闭。蓝色矽土胶是一个理想的干燥剂，这个蓝色的小颗粒失去了它们的颜色，当吸收了大量的水分后。这个胶能增加，通过展开锡罐在105℃-110℃加热15分钟左右。当这个水分驱散后，又变成蓝色。这个罐头能保持几年。

这里的质量是指新近买的Masoten，作为Neguvon，增加数量通过a factor of 0.8。

储备液：1gMasoten加到1L水中，这种洗液必须立即用，因为它不稳定。残渣在通过加NaOH作用2h，使PH达到12以上后，才能排到下水道中。

剂量A：100ml储备液加到100L水缸水中。如果温度在25℃，PH值在6-7之间，几乎所有的鱼都能耐受此药。治疗持续3d，以后至少更换50%的水。残药可用活性C过滤。

剂量B：1gMasoten加到10L水中，在25℃下，PH为6-7，浸洗1h，剂量A可控制鳃和皮肤寄生虫。产卵的指环虫治疗不容易，因为虫卵能耐Masoten的高浓度，具有治疗建议的描述在下：整个鱼群感染鳃寄生虫，方法特别是适应饲养的箱里，底部环境会变质。

剂量C：在水族缸里，这个鱼可通过剂量A作用3d治疗。然后把它们转到没有寄生虫的缸里。起先的缸子洗干净，用福尔马林消毒或高温消毒。然后让缸子晒干。在第8天时开始治疗，开始在第二个缸里用剂量A，作用3d。同时，第一个缸子重新装满水，过滤系统重新开始。接下来这个鱼在第二个缸里浸洗，在第11d时，返回到它们自己的缸里。此过滤需要至少3-6周。整个治疗过程温度不能超过25℃。仅在这个温度，才能保证在第一次孵化的幼虫不会在第二阶段治疗时发育为性成熟的寄生虫。

此种方法不能保证全部治愈，因为一些指环虫虫卵能在水箱底部存活几周，甚至几个月。在此病，方法C6是有效且容易，能保证在经过一次治疗后，不会出现鳃部寄生虫。

一般说来，Masoten在没有仔细考虑前，不应该用此药；此药对各种鱼类都有毒性，对水质也有破坏，长时间治疗会增加毒性。高剂量，通常在第一个24h内有很好的耐受性。把鱼放进用过的储备液或几小时前的储备液是没有用的。Masoten必须每次要用淡水清洗。残余的储备液必须立即用NaOH中和而去掉。

方法C19：甲哨达唑(250mg)

用途：肠道和组织鞭毛虫感染

范围：六鞭毛虫，Spironucleus spp. Trichomonas.SPP. Protoopalina spp.此药不会帮助对抗蠕虫。Flagyl是用来作为已安装好的水族箱长时浸洗。首先药片压碎溶解在温热的水里，然后，把它们分散在水族箱里的水面。此温度升到30-33℃时能增加疗效。

剂量：250mg加到50L水中。3d后，换1/3的水，且缓慢降低温度。可用活性C去掉水里的残药。对此药敏感的植物当时可能有影响。

饲喂剂量：压碎250mg药片成粉末，在50℃，混在食物里，早晨和晚上饲喂6d。

方法C20：MS-222（Tricaine）,amino-benzoic acid ethyl ester methanswlfonate。

MS-222是鱼最好的麻醉药品。也能作用于许多低等动物，常用作镜检时，微生物的固定剂。此药可用来当鱼虚弱时，增加水的硬度。

剂量A：10mg/L用于游动时平衡鱼

剂量B：用于麻醉鱼：从50-130mg/L水中，依鱼的大小。作用鱼15分钟后，把鱼转到淡水中15分钟，让它恢复。

剂量C：1g/1L水中，作用10分钟，杀死鱼。

方法C21：硝基呋喃托英

用途：烂鳍，大多数细菌感染；预防肠道肿胀。细菌性感染，弧菌病。

范围：一些G+，假单胞菌，气单胞菌，弧菌

如果有细菌感染的鱼，把它取出水箱，放进检疫箱，然后用硝基呋喃托英预防治疗。此病能作用于水族箱，如果过滤材料是第一次清洗，且吸出底部的mulm。活性C必须过滤去掉。

剂量：加硝基呋喃托英的一个胶囊到30-40L水中。这个胶囊的一半能容易成为有效成分，溶解在一杯温水里，把没有溶解的剩余部分倒入水族箱里治疗。浸洗15d。以后，换大部分水和用过多的C滤过水。

食物剂量：加300mg粉碎的硝基呋喃托英到200g食物里，通过方法B5，早上和晚上饲喂9天。

方法C22：Furazolidone

此药便宜，但是仅能用在饲料中。它有价值的活性成分仅在500g的包装里，因此，相对较昂贵。纯的furazolidone能单独给药，不加别的物质，作为短时浸洗。

用途：假单胞菌，气单胞菌，弧菌，Triohomonas SPP.和许多coccidia。

饲料剂量：在50-55℃，加300mgfurazolidone到100g食物中，通过B5制成，早晚喂两次，连用6d。

浸洗剂量：500mg纯的Furazolidone加到100L水中，在单独的检疫箱。不要用过多的C过滤。换40%到50%的水，在3d后。剩余的药可用活性C去掉。

方法C23：制霉菌素软膏

此软膏的主要成分是液态聚乙烯和液态parafm，颗粒能很好地连在皮肤和粘膜上。

用途：皮肤真菌感染，伤口预防感染。

范围：真菌

把鱼脱离水面，仔细看污浊部分或用过滤纸浸干感染部位，然后用制霉素软膏。

持续治疗：每治疗1-2次，直到菌丝消失，皮肤伤口愈合，或新的皮肤形成。

方法C24：piperazine citrate

用途：肠道寄生虫

作用范围：棘头虫，绦虫，吸虫

此药必须加在食物里，那样才能直接作用于肠道。鉴于它的热稳定性，在80℃时，用方法B5混入食物里。

剂量：600mg药加到100g食物里。早晚一次用8d。

方法C25：磺胺，磺胺噻唑

用途：内部器官细菌感染

范围：Actinomycetes，球虫和许多G+和少量G-，假单胞菌，屈挠杆菌，corynebacteria。

由于此药能从肠道很好地到达血液，因此混合在食物里有很好的效果。此药可作为上面所提到细菌的特别选择。

剂量：把300mg磺胺噻唑加到100g食物里，用方法B5准备。温度应在60℃。早晚饲喂一次用3d。

此药有很低的溶解度，所以用于长时浸洗比较困难，应用在一个单独的水缸里，首先溶解称重后的药在温水里，密闭，加热几分钟。注意：由于密闭的空气剧烈的膨胀，有可能爆炸。在第一次震动后，留出出口让空气跑掉。摇匀后，把药品分布在检疫箱的水表面，此缸无过滤器。否则，悬浮于表面的磺胺类药物过滤掉。为了预防，水不得不保存新鲜的循环水。用强力的水源。

方法C26：Trimethoprim

用途：内部器官和血液的细菌和球菌感染

范围：Staphylococci，hemolytic streptococci，pneumococci Escherichia coli，enterococci，proteus，Hemaphihls influenzae，Salmonella，Shigella。

混合trimethoprim和磺胺类药能增加它们的疗效。有此两药最佳组合的制成品。由于病原体对此药产生抗体比较快，此药应该每6周用一次。此药的商业名字有：Drylin，Eusaprim，Borgal Sohotion(75%) Cotrimstada-forte. Drylin和Eusaprim是老药，低浓度就有效。现在欧洲最常用的是Borgal和Cotrimstada-forte。

剂量：1片Cotrimstada-forte加到80L水族箱中，作用3-5d。过渡不能包含有C；过滤丝线必须在服用药前完全清洗。

15ml Borgal储备液加到100L水中。

作为注射，用2mlBorgal solution(7.5%)/200g体重。如果48h后需要的话，可再注射一次。注射在腹腔内。

仅兽医和专家才能对鱼免疫或接种疫苗。

方法C27：维生素制剂

商业生产的维生素制剂有溶解的粉末或阻止它们挥发的油，帮助它们粘在食物里，直到鱼消化它们。这些很重要，它们包括治疗头孔病的Ca，P，一旦病因去掉。许多别的物质和微量元素对于鱼的健康和皮肤颜色有明显影响。此制剂溶解在水里，没有什么效果，因为它们迅速分解到水里了。

混合500mg维生素粉末到100g食物里，饲喂健康的鱼一周不应该超过两次。但是，喂病鱼应该一周4-5次。一旦病鱼恢复，剂量应减少到正常剂量。

大量的饲喂维生素，也会引起鱼的疾病

当通过方法B4和B5把Osspulvit-N或Calcipot饲喂鱼时，任何不够的维生素矿物质都应通过别的制剂补上。用Pulverized VMP药片是可能的。

方法C28：Volon-A adhesive ointment

此软膏非常易粘在皮肤和粘膜上。因此必须预先干燥。用于皮肤和伤口的感染，涂在伤口部位。它的活性成分是抗炎，这就意味着敏感皮肤也能涂上它。如果有必要，抗生素粉末，磺胺类药物或抗真菌药一起混合成软膏。

剂量：活性成分体积占5%，软膏占95%。

方法C29：H2O2（3%）

除了消毒，H2O2也能用于迅速增加水中的O2。它通过分解纯氧到水里。

加25ml3%的H2O2到100L水族箱水里。这个剂量决不能用第二次，过多的O2会导致鱼的鳃和皮肤恶化，从而导致鱼的死亡。如果鱼在接下来的剂量，几分钟内呼吸困难，然后考虑缺O2有另一个原因。（例如，鳃部寄生虫）。

方法D1：KMnO4

KMnO4常用于小缸消毒和不能煮沸的器皿的消毒。水缸加满水，把所有的工具发进缸里消毒。然后加入KMnO4，浓度直到通过水缸不能看到任何东西为止。让外面的过滤器过滤，没有任何过滤工具因此紫色洗液清洗了所有的工具。3d后，清洗所有的工具，直到颜色褪掉。

方法D2：食用盐

盐能用于消毒。溶解350g盐到1L水里。用这种方法消毒比较昂贵，且不方便，但是，此种方法对于网和别的小器缸是理想的消毒药。

在此浓度准备一个桶，让网浸在里面。浸洗24h。因为盐液不会变质或变少，所以一桶盐水能长时间用。当水蒸发时，加点自来水。如果你觉得水的颜色太浓易与别的水混合，你可以加点甲基兰在里面。

空的水缸可以涂上盐浆和盐液。让盐浆在水缸里干燥，然后在接下来的几天里让它重复几次。

方法D3：H2O2（30%）

注意：30%的H2O2是高腐蚀性物质。不要让它粘在皮肤和衣服上。

通过光，H2O2能分解为O2和H2O，因此储存H2O2应用棕色瓶和琥珀色瓶子。30%的H2O250ml加到100L水中，用于消毒水缸。环境和器皿消毒也可用此洗液。砾石最好的消毒方法是通过在150℃烘烤两小时，否则，H2O2迅速挥发掉。让过滤系统运作，但是没有任何东西（看D1）。让洗液浸在缸里3d，在这段时间，把灯泡打开。然后排空水缸，用自来水清洗。此法要求清洗仔细，不要留下任何残余物质。

方法D4：明矾

水缸植物消毒常用明矾。在宠物店，水中植物不是在单独的一个植物水缸里，而是和鱼在一起，因此有可能把病原体带进你的家里。因此这些植物不能在检疫箱生活得好，所以你不得把在它们移进你的水缸里时消毒。溶解一些明矾在1L水里，浸洗植物5分钟。然后用新鲜水清洗它们，再把它们移到水缸里。

方法D5：异丙醇

许多养殖者可能感到需要消毒它们的手，另外清洗它们解剖了的鱼。一般说来，是没必要的，因为鱼病一般不传染给人。但是，结核病是个例外。

商业用的是100%的异丙醇稀释为70%的。对于稀释，量70ml100%的异内醇在量筒里，然后，加水到刻度为100ml。然后，在用肥皂和水清洗手后，用这个酒精打湿你的手，让它们在空气中干燥。此70%的洗溶液也能用于浸洗小器皿和试管消毒。

如果你把此液装在喷雾器里，你能用此液消毒空缸和别的大物体。喷所有的表面，特别是角落，完全而均匀，然后，让它们干。在几小时内，重复喷几次。然后，酒精挥发没有留下任何残留的物质，因此，在酒精干了以后，水缸又能充满水用了。

方法D6：福尔马林

加30ml浓度为35-40%的福尔马林到10L的桶里。然后充满水。为了避免混合，加一些甲基兰。网和别的小物件能浸泡在此液里。两小时的消毒是绝对需要的。此法可能在密闭的地方有点冒险，因为福尔马林在空气里能刺激呼吸。福尔马林也能刺激皮肤。另外，记住，福尔马林是致癌的。

第十一章
鱼病的显微镜诊断

11.1显微镜

对于鱼病诊断来说，最重要的就是显微镜。它可以单独用于检查涂片，寄生虫，和器官标本。小孩玩耍用的显微镜是不贵的，但是，对于鱼病来说是没有用的。因为它们没有标准部分，且光学系统也不够。孩子和年轻学生很快就推动它们兴趣，或者，如果让上面的不发生，它们最终应拥有一流的显微镜。一个好的显微镜可能会吓着你，但是，决定买一个像它那样的仪器，用正确的管理，不会使你筋疲力尽，因此这个投资是不高的。一个好的显微镜是生命的探索工具。

所有好的显微镜的供应商提供了基本的装备，随着时间的过去，扩大和提高了显微镜的功能。此章没有篇幅来介绍显微镜技术。初学者可以仔细阅读说明书和别的刚买来的显微镜的文字说明。为初学者的文字技术和为高级显微镜的大量知识。

当买一个显微镜时，确保所有的部件是标准的。如果镜筒是160mm，许多制造商的产品是结合在一起的。好的镜头具有长的配套的观察镜。

在开始，物镜有10倍，20倍和40倍就足够了。对于相匹配的有3个目镜或接目镜，有5倍，10倍和15倍。这些镜头最大的放大倍数是40×15=60倍，对于研究鱼的寄生虫足够了。当你想更大的显微镜时，你能用放大倍数为100倍。

显微镜的位置有两种不同的制造方式。一种是，用镜筒的上升或下降来调焦；另一种是，载物台上升或下降。这个镜筒和支架混合在一起是坚固的。

除了正常的亮视野照明外，别的照明方法也是可利用的。最好的是暗视野和对比方法。仅当一个有经验的，从有仪器知识的从事者在家里能对比安装，为400倍安装的暗视野也是容易安装的。那样做，从黑的箱子里取出各种放大倍数。镜头中内的镜径放大倍率大的比放大倍率小的镜径大。这个孔径是由一个中央连续的玻璃盘或清晰薄片，用来滤光。这个圆形的视野有各种大小是制造好的，依靠电容器径孔开着。你调试各种镜孔为每个镜头，直到产生一个黑区域呈现明亮的物体。甚至较小的细菌也能在400倍下看得非常清楚。当这些圆形的光线从聚光器形成一个凹形的球体，这个结果印象是深刻的，在位于物体的区域的反射，通过到上面。上面散射，以致这个直接的光是直接通过物体。视野变暗，当这个物体的光突然进入镜头，因此看上去明亮了。所以本书的暗视野照片是用自己制的孔位照的。

11.2测试显微镜的水平

好的镜头常用来描述，素描和照片。这些没有考虑显微镜的放大，当标本的大小用微米，因此，排除了一些图片中的错误和且在放大以能逼真。观察者能计算这个它自己的放大倍数，通过测量这个像的大小，来区分出物体固定的大小。测试物体的大小，一是用一个目镜的测微计或目镜的校准刻度用10mm刻度分成100份。配这个镜头和这个刻度，标本的测微计是需要的，但仅一次，因此，可从别的朋友借。这个标本测微计是1mm一个刻度是刻好的。为每个镜头，给予目镜测微计的一个部分是必须计算的。放这个测微计在台上，看两个刻度对齐。然后寻找一点，两条线完全重合的。更进一步刻度末对齐，这是更精确的结果。例如，如果测微计的93和目镜测微计的59重合，那么计算是0.93mm∶59份=0.01576mm=15.76微米/每分。

从现在开始，反目镜是需要的，你现在知道1份是15.76微米。因此例如，一个寄生虫长86份，就是1355微米或1.35mm。

作为读者，不需要目镜的测微计，这儿有一般常用镜头每份的大约长度，用10倍测微计刻10mm分成100份：

Lens
Micron

2.5×
83.2

4×
23.8

5×
20

6.3×
15.8

10×
9.8

16×
6.3

20×

5.1

25×
3.8

40×
2.44

63×
1.68

100×
1

这些数据有轻微改变，通过制造商的镜头，这个镜筒放大是1倍为这个操作。

11.3玻璃器皿

除了显微镜和3.1章提到的仪器外，还有一些是需要的。

1．载玻片和盖玻片，是首先要提及的。载玻片是76×26mm玻璃条。盖玻片是0.17mm厚，通常18×22mm平方，功圆形的。

2．玻璃吸管

3．有刻度的小吸管

4．100ml有刻度的量筒

5．2-3个观察皿

6．5个汪玻璃皿

11.4新鲜标本

最昂贵的仪器如果你不正确用它是没有价值的。操作显微镜或自己熟练应用它，必须首先准备简单标本。那样做，放一滴水在显微镜载玻片上，再加一些藻类放在上面。然后盖上盖玻片，要求中间不留任何空气泡。拿这个盖玻片在拇指和食指或用镊子从45°角，压在标本上，然后慢慢地放下去，直到完全接触水滴。这个水沿着盖片边缘联在一起。现在慢慢均匀地降低这个边缘，以致让水滴强迫空气排出。在制得好的盖片上，两层的空间不会超过盖片的厚度。

如果一个厚的标本制片，盖片下面的空间必须充满水。制片太厚的话，在高倍镜时，不会让光通过得太多，仅能最上面的能聚焦。那是因为当放大倍数增加时，聚焦的厚度变浅。视野的厚度或sharpness plane能表示或多或少的薄层，平行通过盖片和标本，正好观察者能在这个平面看到。首先，练习用水滴浸整个标本。

藻丝能制成好的标本，因为你能把它们制成非常薄的切片。通过滤纸，或吸墨纸在盖玻片边缘吸水。小心，不要让非常小的标本通过排出的水而被吸了出来。当做别的制片和涂片时也用同样的程序。

现在这个玻片能放在显微镜载物台上。制造商的说明书里有如何获得最佳光线的说明。注意，不要让任何相关的如手或玻片接触镜头，因为那样镜头可能变花或含有油脂。那样，粗焦距不能聚焦载玻片，而总是离开它。当转动目镜时，眼睛通过水平线看载物台，让目物几乎接触到载玻片。然后通过目镜看，转动粗焦距旋纽，直到物体清晰出现为止。现在调动微调，以使最佳呈像。

当检查死鱼时，预先准备几个载玻片，取下的标本滴几滴水。盖片要清洗，干燥，没有油或脂类污点。

拿载玻片和盖片时，只拿它的边缘，不要拿中间，避免指头上的油。许多玻片和盖片在包装之间也已清洗过。但是，对于制片来说，还是不干净，在使用之前，把盖片和载片用酒精浸泡，然后镊子取出玻片，用吸水的布擦干玻片。如果这样太不方便，可用另一个表面皿充满氯仿，然后从酒精中捞出玻片浸在氯仿里，用镊子取它们在空气里几秒，不仅玻片而且盖片没有油且干净，将迅速干燥。

玻片和盖片仅当它们不是太脏时才能清洗再用。做标本的固定和染色，初学者会用很多的时间来尽量清洗盖片，在清洗时，可能会打碎许多玻片。

无论是谁想研究鱼病工作，一定不要满意仅仅不时地检查鱼病。一系例的微生物和水生生物的研究通常需要能区别无害的寄生虫生物和辨别出病因。这个学习注定不会枯燥的，无论是谁，通过好的显微镜一旦观察到一滴水里的微生物，那它一定会喜欢上显微镜。一旦在底部物质里和过滤物质里辨认出无害的原生动物，蠕虫和节肢动物藏在哪里是真正的财富的发现。这些微生物的区别，你可查各种向导和图书馆里有用的书店里的书。

11.5取材和压片

准备镜检的器官，剪成针头大小的碎块，能在薄的载片上清晰地聚焦。滴一些生理盐水，用解剖针剥成最小的颗粒或你能做的最小碎片。如果标本仍然太厚，那钝的物体能使盖片高于最大的碎片。现在，把片子放在载物台上，先用最低倍的镜看标本。第3章描述了当标本应该撕成碎片且应都压片盖片下。

压片需要一些力气。器官组织放在两片玻片之间，没有任何水，直到组织扩张得极薄。然后加一些水到这个薄的标本上，放一个盖片在上面。

11.6病原分离

如果一个或更多的寄生虫在一个新鲜的标本上发现，转到一个新的载片上。这点有几个原因，观察者想看到更好看寄生虫，或能单独清晰地照相。如果制成保存的载片，这个寄生虫必须取离新制的载片，作进一步的处理。这样做，放这个玻片在一个玻璃盘子里上，能从下面透光。作为光源，你可以用灯泡和用镜子反射光通过玻璃和平躺的标本。此光可通过在镜子前面用复写纸作为散射而减弱光。现在可以用strong hand lens或放大镜看标本的寄生虫。放大镜立着是熟悉的方法，两手都空着。用镊子仔细升高盖玻片。如果标本粘着，用解剖针把它弄松。但是，这比较简单，把标本从滑片转进小圆盘里，充满3ml生盐水（看10章，方法C12）。

现在用两个解剖针从周围组织取寄生虫。撕碎肠道碎片，或切成纵长的。许多寄生虫能在这个溶液里生活几小时，做完这个程序没什么困难。用一个好的吸管，吸一个单独的寄生虫并把它们转到干净的玻片上，并加上生理盐水。覆盖盖片后，在100倍和300倍下检查。大的寄生虫容易被盖片压碎，因此可用一个隔离物以防压得太紧，如附一些小的粘土或蜡球到盖玻片的角落，为了形成基肢，当在载玻片上滑动时，能向里和向外，然后用解剖针轻轻地夹紧标本。如果需要水，滴点水在边缘。现这个生物标本就能观察了。极小的寄生虫如鞭毛虫在血里和肠道里是不能用放大镜或handlens看见的。因为这些，能在低倍镜下看到包含有许多鞭毛虫的点。然后用吸管吸一些液体。移它们到玻片上，滴一滴生理盐水。这个新的载片将非常薄，因此可以在高倍镜下观察。

为了能观察它的病原发育，有时我们需要保存新制载片几天。保持到湿润的空间里，避免水分蒸发。在一个紧口玻璃瓶里或盘里，装2cm高的水，放这个载片的底部，升高水面。在镜检之前仅载片的下侧擦去。

11.7标本的总制作

在许多病例，有必要保存寄生虫很长一段时间，也许新制的载片可以与此对比，或辨别。这就需要保存这些微生物很长时间。一种是在溶剂里保存它们或制成长期保存的切片。在操作时它们也需染色。

制切片，几个步骤是必须的。第一步是固定。把标本放进固定液里，杀死细胞，但要留下象活组织的环境。它们不会分解，且保持微生物原来的形态。固定是为了标本更一步的准备。让蛋白质凝结，以使细胞膜变得透明，染色能进入细胞里。

好的固定需要固定液迅速渗透进去。因为这个原因，标本在任何位置不能超过1cm厚。流体的质量要超过标本50-100倍。这个固定剂不得不作用一定的数量，作用一次，且仅能用一次。有时，这个固定液必须从标本上洗去，在固定后，通过把标本放在蒸馏水中或酒精中一段时间。在接下来的指导为准备切片，浸洗的步骤和时间是给出了的。用这些指导，初学者能准备方便的切片，给它们最好的专家诊断。

由于固定必须快，大的标本总是浸在准备的固定液里。它们然后用镊子取出或用吸管吸进吸管里。冲洗掉固定液。线虫易用解剖针抓住和转移。

被固定的标本含有大量的水，因为它们不和埋入的物质混合，必须去掉。各种浓度的酒精需要让标本脱水。用过固定剂后的标本，放在20-40%的酒精里，逐步增加浓度，每次增加10-15%直到标本放到纯的酒精里。你可根据下面的说明，自己准备不同的浓度；保持溶液瓶口封闭，因为酒精吸收空气水分，而分解。

当一个浓度的酒精固定的混合物时，能把标本直接转到同一浓度的酒精里。所有的步骤应该在体积为标本体积的50-100液体里。个别步骤可在观察瓶里或浅盘里，盖一层玻璃盘。

标本是逐步的转移或别的固定的吸管和然后移到下一个浓度，必须做完全。禁止吸管吸取任何标本，可用放大镜在吸管尖部看。

标本通过此种方式，通过一系的酒精浓度，直到酒精浓度为70%，可浸1～2天。当然，必须是密闭的。标本不能染色，继续直到到达浓度为100%的酒精。浓度超过60%，异丙醇酒精是最好的，因为药房有这种浓度。稀释为需要浓度，纯的乙醇是无水的，但仅专业地应用或用于开药；即使你从批发商买，也是太贵了。

从这个纯的异丙醇里，把标本转移到混合二甲苯里，必须换一次。浸洗后，准备三个干净的载片，中间滴上几滴树脂。现在鱼的标本取离混合二甲苯，移到三个滴有树脂的载片上，用解剖针排列它们，然后用一个干净的盖片封闭它们，注意，避免气泡。让这个切片烘干，安静，无尘作用几小时到几天。

厚的载片，里面的树脂可能起皱，可能弄破。那样的话，加更多的中间材料在盖片边缘，在以后的几天加几次。然后，如果皱纹停止，在载片和盖片边缘用浸有二甲苯的布擦去过量的树脂。

现在这个载片用两个不干胶标签贴在切片左边和右边。必须给出的下面的信息：

一端：固定剂，染色，染色物质，拉丁名

另一端：来源（如是寄生虫，给出寄生部位），制作日期。

这个干的玻片现在能编号和水平储存在载片盒里。这个描述解剖的卡片给出相应的编号然后列档。因此这个载片和卡片是相交索引，总是有用的。

有许多染色理论。最简单的理论就是让标本容易在显微镜下看到。两次染色显示内部器官一种颜色，周围组织为另一种颜色。染色程序依靠固定剂的使用和染色。如果固定剂含有酒精，然后，标本能直接进入染色会溶解在酒精里。

但是，如果，染色溶解在水里，那么标本不得不返回，通过一系列酒精浓度，直到用纯蒸馏水的冲洗。染色后，标本必须通过酒精系列，在通过二甲苯之前，然后包埋，用盖玻片密封。

如果这个标本仍然太长在染色液里，过渡染色的点会变得透明，然后，过量的染色通过溶液溶解，这个程序叫分化。然后，这个标本能connterstained或在一系列酒精里失水，浸泡在二甲苯里，然后包埋在塑料里。

这次给以后留下标用于染色有多久和一系列的酒精的一般价值，可以通过你的经验和标本的大小确定。

如果切片保存超过几周，那么盖片和载片必须密封。搪瓷或虫胶可用于密闭。用小刷子，刷这个盖片的边缘，重复这种方法，看上去盖片好象嵌在载片上，没有留下裂口。这个切片然后可以长久保存。

微生物的制片对于显微镜学家来说是一个令人有趣的活动，随着时间的延长，收集的有价值的切片可以和新制作的切片相比较。你将练习此技术，用容易的标本，因此当有稀有寄生虫出现时，你不会姑息它。

11.8标本细节准备（E1-E10）

无论是谁想收集鱼和别的生物的寄生虫必须有基本的化学剂和染色材料。这些必须品包括：

1L家用酒精
100ml甘油酸

1L蒸馏水
100ml100%的醋酸

1L100异丙醇
100ml25%HCl

250 ml35-40%福尔马林
100 ml甲基兰

250 ml二甲苯
100 ml alcoholic borax carmine

250 ml乳酸
5-10g甲基绿

各种包埋物质

紫胶或搪瓷用于封闭盖片边缘

细菌染色剂：如碳酸品红；碳酸龙胆紫1∶2∶300和品红液。100ml量筒，1ml量筒。

首先，准备酒精。开始用94%的乙醇，制30%酒精，加30ml原酒精到量筒里，弃蒸馏水到94ml。制60%酒精，加60ml原酒精和34ml蒸馏水，制成94ml液体。用此程序，我们准备30%，40%，50%和60%的酒精浓度，用原酒精。保存这些酒精，每个贴上标签。

高浓度的酒精制备用100%乙醇。加70ml乙醇，充满小到100ml。用这个程序，我们制成70%，80%，90%，95%和100%的浓度酒精。

下一步，是准备固定液（E1），以使寄生虫能保存几年，加100ml原酒精（94%乙醇），加30ml福尔马林，5ml醋酸，和200ml蒸馏水，然后充分混合，再密闭保存。

节肢动物，如甲壳类动物，小虫，昆虫和昆虫蚴虫固定可用90%酒精和10%乳酸（E2），它们能贮存几周。标本被送进有这些液体的旋口瓶，隔绝空气，让专家作诊断。

11.8.1Permanent Mounrs in Polyvinyllactophenol(PVL)(E3)

这个标本固定必须首先移到纯的醋酸里，然后在放入PVL里，接下来让标本通过4个浓度的醋酸和酒精混合物

第一步+25%醋酸+75%酒精

第二步+50%醋酸+50%酒精

第三步=80%醋酸+20%酒精

第四步=100%醋酸

因为醋酸能脱标本的色，这个标本直到半透明时，然后转到PVL，节肢动物仍然需要第一和第二步几个小时。但是，第三和第四，不应该超过3h。要不时地用放大镜检查脱色程序，通过加标本在PVL里打断。这个标本不要太透明，因为，它们减弱光，即使过多的时，甚至在完成的长久切片里。图NO.104就是用此种方法制成的。

另一种可能，从固定剂里把微生物转到醋酸里更适合非柔软的标本。用一些醋酸装满一个量筒，再加一些标本固定液。这个固定液不应该超过醋酸的1/4。这个微生物会慢慢地沉入醋酸里，能把它直接转到PVL里。

准备一大滴PVL在干净的载玻片上。用解剖针把微生物从醋酸里转到PVL上。盖上盖片，当制作大的标本时，用隔离物以防盖片压碎标本。水平放置载片，如果需要，每天多加一些PVL在盖片边缘。到第三天，直到最后加的PVL干了以后，用小夹刀，刮去嵌入的物质，密封盖片。如果你变得太久，可能会出现皱纹。水蚤和小昆虫能制成很好的切片。

11.8.2用加拿大香脂或Entellom制切片（E4）

此方法适合于绦虫和节肢动物。绦虫有时易破和起皱折，因此用此种方法，必须非常小心的处理。

用方法E1，把寄生虫从鱼体移去固定，至少24h，虽然它们能保存几个月。如果标本要染色，需要酒精+HCl，简单制备如下：70%酒精（纯的乙醇或异丙醇，不是甲醇），加2mlHCl。

制作程序如下：

1．用方法E1至少固定24h

2．移到40%酒精中浸泡2h

3．移到50%酒精中浸泡10分钟

4．移到硼砂洋红色浸2-5d，通过厚的部分

5．移到50%酒精中，浸泡30分钟

6．移到60%酒精中，浸泡10分钟

7．通过厚的部分，用酒精和HCl脱色1-10h

8．移到70%酒精中作用20分钟

9．移到80%酒精中作用10分钟

10．移到90%酒精中作用10分钟

11．移到95%酒精中作用15分钟

12．移到100%酒精中作用15分钟和机会一次。

如果当标本在100%酒精转到混合二甲苯时出现皱纹，接着做下面的步骤：

13．转到75%酒精+25%混合二甲苯，浸泡15分钟

14．转到50%酒精+50%混合二甲苯，浸泡15分钟

15．转到25%酒精+75%混合二甲苯，浸泡15分钟

16．转到100%混合二甲苯中浸泡25分钟

17．在树脂里封埋。

厚的蠕虫和大的节肢动物在二甲苯里浸的时间要长，厚达2h。如果标本里转移到光下时突然变黑或白色反射光，包含在树脂里时，应必须更仔细，准备混合物10%树脂和90%混合二甲苯在小盘子里。放标本在盘子里面，直到二甲苯蒸发，留下的是糖浆介质。现在可以封埋了。另一种方法是，刺穿这个标本，浸在二甲苯里，3到4次；用一个好的针。现在树脂能浸透到标本里，且标本仍然清晰，如果这些建议没有产生清澈的或透明的标本，然后用方法E3或E5，实习时可用小的蠕虫、水蚤和别的容易获得的微生物。

11.8.3甘油明胶制片(E5)

这是一个非常精致的制标本的方法。适合于所有用E3和E4起皱纹的标本或脱色太多的标本。用方法E1固定24h，然后用50%酒精冲洗2h。转到60%的酒精中浸15分钟。然后用硼砂洋红染色1-3d。以后，回到60%酒精里。如果染色太敏感或太深，然后能被区分或用酒精+HCl清洗，然后用70%的异丙醇酒精冲洗1h。然后，仍然每个步骤作用15分钟（80%，90%，95%和100%异丙醇酒精）。为了更进出口步的准备，你需要95ml异丙醇酒精（100%）加5mg 甘油，储存在密闭瓶里。倒大约5ml地混合物到浅皿里，放这个标本在里面，放在暖和的地方，无尘。异丙醇酒精将挥发，在几小时到几天内，这个标本在纯的glycerin里。这个时间可以通过表面部分的蒸发或部分的覆盖而调整。器皿是凹底是非常好的，因为标本都聚集在最升的点。

现在这个标本能直接从无酒精的甘油转到有动物胶的载片上封埋。用小刀或刮刀，挑一滴动物胶到载片上。加热载片。当这个甘油明胶溶化后，不要立刻包埋这个蠕虫，直到明胶冷却下来时。然后用解剖针从明胶转到载片上，且放它们在甘油明胶里。如果当你取盖片时，动物胶粘性太强，你可先加热载片。让这个载片水平放置，直到动物胶凝固。刮去多的材料，封闭盖片边缘。此封闭工作在接下来的几天必须重复。作为练习，可用来至土壤里的小线虫，蠕虫或来至动物食物里的微蠕虫。

11.8.4鞭毛虫和纤毛虫的染色固定

在鞭毛虫和纤毛虫能辨别区分之前，它们必须被固定，那样细胞形状，细胞核；和鞭毛就能辨认。甲基绿福尔马林液适合于此染色。制工作液，加0.1g甲基绿和80ml蒸饬水到棕色或琥珀瓶里，密闭。轻轻摇动，分解染料，然后加20ml福尔马林（30%到40%）。当所有的成分都混合后，此溶液就准备好了，可以用了。

作为细胞核染色，洋红酸是适合于许多鞭毛虫，虽然它们破坏这个鞭毛虫。

我们通常采用新鲜样品制备，包括肠道内容物，胆汁或皮肤涂片。首先我们举着载片，去掉所有的固体，厚的组织残余。然后加一些生理盐水，盖上盖片。如果制片太厚，仍然直到水蒸发，减少内部的空间或间隔。然后加一些甲基绿福尔马林在盖片边缘，然后在200到300倍下观察，鞭毛的死亡。当液体在载片上停止旋动以后，搜寻单独的标本在高倍下观察。

作为均匀分布的染色液，一滴滴液体包含了鞭毛虫，或者别的皮肤涂片有非常少的水，在载片上。下一步，滴一滴甲基绿福尔马林液或洋红酸大约鞭毛虫滴大小1/4的一半。用解剖针迅速混合两滴液体，然后盖上盖片。然后在中等镜下观察，可看到鞭毛虫，然后在高倍下观察。由于此种方法固定原生动物将会不能保存，最好作个图或至少有一个标本的略图。

甲基绿福尔马林液染血液细胞和皮肤细胞成蓝绿色，而细胞质出现暗绿色。如果细胞染成深绿色，需要用太多的染色液。

洋红酸染细胞核是红色和细胞质品红色。

11.8.5细菌染色

细菌染色需要酒精喷嘴，一个Bunsen喷嘴，或丙烷手电筒，和染色架或建线的支架。这个支架高应足够下面的火焰加热，上面的支架应足够3或4个载片挨着放着。这个支架应比上面的载台宽；那样具有稳定性。可看图117。

染色不易从常用的器具上洗掉，不应把它倒在水沟里或厕所里。用过的染色剂放在密闭瓶里，放它们在特别的垃圾收集箱里。

外行人不能完全辨认细菌，需要在特别培养基里培养。这个菌落的大小，颜色和别的特征需要专家才能认识。但是，留心的显微镜观察者能辨别出细菌，且能决定用何种抗生素治疗它们。鉴于此，你必须注意大小和细菌的活动。细菌的大小决定了以后的固定和染色。

现在从含有细菌的液体里制涂片。对于准备的器官，取一小点组织，用两个干净的载片压碎。然后，带一个干净的载片，压它在前面的载片上；再用另一个载片压同上压到载片上。你现在有4个非常薄的压片。（结核孢囊也能用此种方法），这4个载片放在空气中约2h，让它干燥。然后，它们必须加热固定。

加热固定载片时，拿着载片，标本在一旁，在拇指和食指之间，通过火焰3次。这个载片必须感觉到热，但是不要靠得太近，烧着了你的手。这个载片现在准备好了。

11.8.6革兰氏染色（E7）

取一个或更多的固定载片，把它们放在染色台上，进行革兰氏染色程序。这个载片必须水平放置以使染色剂不会跑掉。这个时期给出图表说明，可以通过你的自己经验。当你倒染色剂时，用这个镊子，不要用手（因为染色剂会深深地染了你的皮肤）。拿着这个载片直到龙胆汁液完全覆盖切片。3分钟后，让染色剂去掉。

要尽可能的迅速，滴一些KI液，让染色去掉，可多加一些。让它作用80秒。去掉后，冲洗载片60秒在装有94%酒精的容器里。用过滤纸或吸水纸吸去载片上的水滴。然后让它水平放置几分钟。

现在品红液作用80秒。用水完全清洗后，空气晾干涂片，加一滴树脂，然后，盖上盖片。涂片和盖片之间的空间要小，那样你能用油镜。如果你lyquify the balsam用1/3二甲苯，那盖片和载片之间的空间就非常小了。

G+细菌出现蓝染色而G-菌出现红色。这种染色是因为G+菌保持了紫色在酒精里，而G-菌失去了紫色，而有品红变成了红色。但是，如果这个辨别进行得太长，甚至G+菌也会失去它们的颜色。

11.8.7Zieht-Neelsen Stain(E8)

此种染色需用于区别结核菌。如果你不能确定组织里的胞囊是结核菌还是鱼醉菌。你可以用此种染色，可使你看到结核杆菌。

成熟的孢囊常不会包含有任何细菌，因此几个孢囊必须一起压片。

放自然干燥的载片和加热固定的标本在染色台上，用品红液完全掩没染色。现在加热载片直到有烟气从染色剂里升直。在任何情况下，溶液必须沸腾。酚的气味是有毒的，因此操作时，必须打开窗子。通过加热，保持烟气3分钟。再装满一些蒸发的染液干燥。然后让载片冷却1分钟，再洗掉染液。用酒精和HCl完全清洗（看11.8.2）。然后再用水冲洗。用甲基兰液与蒸馏水配1：5的比例，染色3分钟。冲洗掉染液用蒸馏水，在空气中晾干。加一滴稀释的树脂再盖上盖片。

结核细菌会呈现红色，而别的细菌和组织碎片会显示兰色。为了制长久的切片，可以在干燥后清洗载片，并用盖片密封。

11.8.8单独细菌的染色（E9）

细菌可以用品红液和用甲基兰迅速和深度染色。这些程序都相同的。不幸的是，这个组织碎片也会染色，因此一些细菌出现模糊。这个程序如下：

1．空气晒干涂片1-2h

2．加热固定

3．滴一滴品红液或甲基兰作用5分钟

4．冲洗

5．空气晒干

6．用稀释的树脂包埋

在300到600倍下镜检。

11.8.9粘膜和皮肤染色（E10）

皮肤、血液和许多压片不是非常明暗差别强烈的标本。任何寄生虫在里面是容易辨认的，虽然组织结构，细胞壁和细胞不会非常明显。如果你想看更多的细节，你必须染色标本。甲基兰是适合的，以1：5稀释，保存在密闭的瓶里。

加一些染液到载片上的水里或血液里，然后等一分钟再盖片。去掉盖片边缘多出的污点。细胞核染色比细胞质深，染色少的颜色浅。为了染色深，再一些染色剂在标本上，而不加水，血液涂片用此种方法显示如图NO.40。纤毛虫染色也用此种方法。

11.9作为存档的照相

任何一个显微镜学家在显微镜下让他感兴趣的东西，他都会想将它们保存下来。因此才产生显微照相。另一个原因是你还不能肯定，一旦你对一个好标本进行隔离和制作你正在观察的发标本不会被新载玻片损坏。然而正是那些稀有标本最容易丢失。另一方面，典型的照片对诊断也很有帮助。许多标本制作和贴片都很困难，所以照相就成了鉴定病变的唯一途径。

照出一张好的显微照相并不需要一种特殊的照相机。任何一个具可变镜头的单镜头照相面都可以。其光源非常重要。要照出好的照片需要较强的光源和Koehler光照系统，在序言中你可看到关于如何打开显微镜Koehler光。制片做的不好不可能照出好的照片来。电力越高，标本切片越薄因为在放大率增加时，焦距准确度下降。

照相机机身和机壳经显微转接器（各种类型在市场上都有售）与视觉窗口相联接。例如，一种类型是可滑向显微管的上面部分。

用照相机操作有几个值得考虑。一般说来，任何单镜反射都是适合照相的，但是，实际上今天通常仅用建的模型来曝光。这个“内部测量仪”模型自动决定快门的速度，在一些照相机，甚至会为你设制；而在另一些照相机，你需从刻度发现和人工调制曝光。在整个操作系统，因为要根据物体的光线和黑暗位置是平均值，所以有时要自动的正确调制。这个内部的计量系统是用许多现代的照相机制造的。有一些非新的工具提供了点的计量，根据曝光场景中的小点曝光。

有非常好的快门，检查这个标本和照片的比较，是否有一些严重的模糊。如果，在明视野区域，这个标本比背景黑，然后必须有正确的位置排列。因为这个测量系统是场景光线和暗度的平均值，这个曝光时间长或短需要正确的调试。这个依据因素有两个：标本的大小，标本和背景的不同亮度。在亮点曝光时间长点，在间区域时间短点。

和电影的质量仅有很小的不同。今天许多照片被制成电影，产生有颜色的幼灯片。The higher the ASA number或估计这些小颗粒放大。影片是在50-200ASA是很普通的。非常好的影片有很长的曝光时间。许多专业黑白影片是因为在higher ASA缺少沙粒相比于彩色影片。

绿色过滤常用于增加这个对照在黑白照片里。

彩色的照片很少依靠这个影片比依靠彩色过滤用于显微镜。颜色依靠光的温度。用没调试显微镜灯泡，用一个蓝色过滤。

一个强的光源，对于短时曝光照相或高的放大是必须的，在大的显微镜上安装一个低压灯是足够低倍镜观察的。

在高的放大标本，不应该移动，因此滴一些福尔马林或固定染色（E6）在盖片的边缘，并通过拿一片吸水纸吸去多余的液体。

在非常高的镜下，这个曝光时间应比照相机自动调制的时间长，因此你不得不测试一下快门，调制一下曝光时间，直到发现适合的曝光时间。好的照片需要放大的倍数，光度，和过滤和别的因素。

显微镜提供一个镜子作为图像，能用幻灯片放出来，然后放一片玻璃在幻灯机和显微镜镜子之间。印迹纸也适合于分解这些光。

几乎任何人都能记得电影曝光的这个细节，一旦电影准备好后，和这个图片准备好后，因此必须注明这个重要的每个曝光。以后这些数据能被转换成这个框架。但是，最好，注明这些信息在卡片上，为了配合每个成功的卡分，这个彩色的幻灯片和卡分的数字相同，和任何保存的切片标本。片片系统有以下信息：

1．档案号

2．标本名称

3．照片日期

4．胶卷号数

5．照片号数

6．胶卷商标

7．胶卷速度（ASA或DIW）

8．Correction factor

9．显微放大倍数

10．灯的设置

11．过滤器

12．新华通讯社颖器孔径设置

13．图解的说明

14．图镜倍数

15．物镜倍数

16．彩色幻灯片放大倍数

17．标本大小

18．别的幻灯片注明

同样的卡片号指出所有的信息在特别标本上，使收回容易。

当送任何彩色的幻灯片或彩色或黑白照片，给出标本确切的大小，而不是显微镜放大倍数。

lzm_001

那么多，辛苦了，不容易啊。

huangjiey_2000

辛苦辛苦！支持支持