植酸酶检测酶活为什么很低，请高手赐教

wy0351 · 发表于 2011-1-27 11:29:04

我按照国标做的植酸酶测定，但是酶活总是很低，5000U的测出来2000多一点，而且结果数据很不稳定，反应过程中标准空白和样品空白的操作是一样的吗？都是先加终止液再加底物的吗？加入底物后的样品空白是浑浊的，离心后测出的吸光值是负数，请问这个现象是正常的吗？拜托高手赐教，感激之至！

lhx · 发表于 2011-1-27 12:31:14

期待检测过的回答

马前卒 · 发表于 2011-1-27 14:46:19

植酸酶含量的检测平行性不好！反应条件很难控制。

saturnbio · 发表于 2011-1-27 17:56:26

没亲手做过，改天问一下检测人员。

极限天空 · 发表于 2011-1-28 08:17:38

本帖最后由极限天空于 2011-1-28 08:19 编辑

1.样品先加底物,空白先加终止液.
2.控制好PH值和温度.时间.
3.国标的检测方法不是很好用.
4.有的厂家的植酸酶测定结果不大稳定.
5.对检测人员的要求比较高,

wy0351 · 发表于 2011-1-28 12:30:46

您好，我想请问一下有什么方法测植酸酶比较好一点呢。我刚接手这个实验，以前的人也是按国标做的，我做了几天发现国标里好多说的很含糊，而且有的感觉不是很对，例如偏钒酸铵溶液配制那就有误导的感觉，硝酸不能提前加入的，还有，做标准曲线，前面说的按无机磷的量，而后面给出的公式好像是按浓度来算的。我现在很迷茫，我的样品空白老是测出负值，不知道原因是什么。我的回归方程系数也很低

liyunhuddt · 发表于 2011-2-11 14:16:03

你如果用标准空白调零的话，样品空白是负值是正常的，用样品的OD减去空白算木什么影响。我们做的时候一般用蒸馏水调零，这样比较稳定。

fm001982 · 发表于 2011-2-17 16:32:33

注意底物，有些植酸钠配置出来有可能使PH发生变化，需要调整。

夜饮_客天下 · 发表于 2011-7-30 15:02:19

这个问题解决没有？

361759357 · 发表于 2011-8-24 18:26:37

也许不一定是检测的问题，可能是植酸酶自身存在问题也不一定，本来植酸酶就及其不稳定。

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