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[技术研发] 全球基因工程实验室都在使用耐热达93℃的DNA聚合酶……

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发表于 2010-12-7 12:47:30 | 显示全部楼层 |阅读模式
本帖最后由 saturnbio 于 2010-12-7 12:52 编辑

    当饲料行业还在质疑酶制剂是否可能做到天然耐热的时候,天然耐热93℃以上的DNA聚合酶早已在基因工程的PCR技术中普遍应用。
    PCR技术是指聚合酶链式反应,其英文Polymease Chain Reaction(PCR)是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法,由高温变性、低温退火及适温延伸等几步反应组成一个周期,循环进行,使目的DNA得以迅速扩增,具有特异性强、灵敏度高、操作简便、省时等特点。它不仅可用于基因分离、克隆和核酸序列分析等基础研究,还可用于疾病病的诊断或任何有DNA,RNA的地方.聚合酶链式反应又称无细胞分子克隆或特异性DNA序列体外引物定向酶促扩增技术。 由美国科学家PE(Perkin Elmer珀金-埃尔默)公司遗传部的Dr. Mullis发明,由于PCR技术在理论和应用上的跨时代意义,因此Mullis获得了1993年诺贝尔化学奖。

技术原理  
    DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链,在DNA聚合酶与启动子的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。在
聚合酶链式反应
实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。因此,通过温度变化控制DNA的变性和复性,并设计引物做启动子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。

  但是,DNA聚合酶在高温时会失活,因此,每次循环都得加入新的DNA聚合酶,不仅操作烦琐,而且价格昂贵,制约了PCR技术的应用和发展。发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义,该酶可以耐受93℃以上的高温而不失活,不需要每个循环加酶,使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本,PCR技术得以大量应用,并逐步应用于临床。

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发表于 2010-12-7 20:48:16 | 显示全部楼层
Taq酶虽然耐热,但是他的最适温度是75度左右,在动物体内环境下无法发挥作用。


sailingbbs于2010-12-8 15:46补充以下内容:
不给动物用,你耐1000度也没用啊。也没必要放在这个版块来讨论了吧。

点评

我觉得该文的意思好像不是要说Taq酶可用于动物,而是在说酶是完全可能做到天然耐热的,对吗?  发表于 2010-12-8 14:15

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发表于 2010-12-11 11:12:17 | 显示全部楼层
其实饲用酶方面,也有达到天然耐热94℃的产品,例如云师大酶工程所开发的3位植酸酶。具体产品就是诺伟司的诺伟磷。
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发表于 2011-8-11 07:13:56 | 显示全部楼层
希望早点让三正使这种耐更高温的酶应用于工业生产,期待云师大酶工所的精英们智慧
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