人工授精室操作标准

田永胜

　　1.采精：
　　1-1.采精前的准备：准备好消毒过的集精瓶、过滤纱布、假台畜等所需物品
　　1-2.采精公猪的调教：
　　1-2-1公猪的采精调教，公猪采精调教人员要有足够的耐性并掌握一定的技巧，先调教性欲旺盛的公猪采精，利用涂上其它公猪精液或尿液的采精架或发情母猪，逐步训练公猪骑在它们的背上。
　　1-2-2对性欲较弱的公猪， 可将发情旺盛的母猪赶到假母猪旁边，让被训练的公猪爬跨，待公猪性欲旺盛时把母猪赶走，再引诱公猪爬跨假母猪，或直接将公猪由母猪身上搬到假母猪台上采精。
　　1-2-3调教时，尽量模仿发情母猪的叫声，可提高公猪的性欲。一旦爬跨成功，要连续几天对该公猪进行采精，以巩固刚建立起来的条件反射。
　　1`-3
　　采精方法： 1-3-1 当公猪性欲达到旺盛时，它将爬上母猪台，并伸出阴茎龟头来回抽动。右手抓住公猪阴茎的螺旋头处，并顺势拉出阴茎，稍微回缩，直至和公猪阴茎同时运动，左手拿采精杯;若用左手采精时，则要蹲在公猪的右侧，左手抓住阴茎，右手拿采精杯。
　　1-3-2无论用左手或右手，当握住公猪的阴茎时，都要注意要用拇指和食指抓住阴茎的螺旋体部分，其余三个手指予以配合，象挤牛奶一样随着阴茎的勃动而有节律地捏动，给予公猪刺激。1-3-3采精时，握阴茎的那只手一般要戴双层手套，最好是聚乙烯制品，用这种手套对精子杀伤力较小，当将公猪包皮内的尿液挤出后，应将外层手套去掉，以免污染精液或感染公猪的阴茎。
　　1-3-4手握阴茎的力度，太大或太小都不行，应以不让其滑落并能抓住为准。用力太小，阴茎容易脱掉，采不到精;用力太大，一是容易损伤阴茎，二是公猪很难射出精液。公猪一旦开始射精，手应立即停止捏动，而只是握住阴茎，射精完后，应马上捏动，以刺激其再次射精。
　　1-3-5当公猪射精时，一般射出的前面较稀的精清部分应弃去不要，当射出乳白色的液体时，即为浓精液，就要用采精杯收集起来，
　　1-3-6射精的过程中，公猪都会再次或多次射出较稀的精清，和最后射出的较为稀薄的部分、胶体都应弃去不要。
　　1-3-7精液品质的好坏，量的多少只是其中的一个衡量指标，在相同的取舍方法下，关键要看精子的密度和活力的高低。 ，在相同的采精方法下，应以精子密度、活力为主进行评价，而精液量只是其中一个标准。
　　1-3-8采精杯上套的四层过滤用纱布，使用前不能用水洗，若用水洗则要烘干，因水冼后，相当于采得的精液进行了部分稀释，既使水分含量较少，也将会影响精液的浓度。
　　2精液的处理
　　2-1.精液品质的检查:由采精室递过来的精液，要马上进行鉴定，以便决定可否留用，从而保证母猪的受胎率和产仔数的提高。检查精液的主要指标有如下几个：精液量、颜色、气味、精子密度、精子活力、酸碱度、粘稠度、畸形精子率等。每一份经过检查的公猪精液，都要有一份详细的检查记录，以备对比及总结.检查前，将精液转移到在37℃水浴锅内预热的烧杯中，或直接将精液袋放入37℃水浴锅内保温，以免因温度降低而影响精子活力。整个检查活动要迅速、准确，一般在5～10分钟内完成。
　　2-1 -1精液量：后备公猪的射精量一般为150～200毫升，成年公猪的为200～300毫升，有的高达700～800毫升。精液量的多少因品种、品系、年龄、采精间隔、气候和饲养管理水平等不同而不同。
　　2-1 -2、颜色：正常精液的颜色为乳白色或灰白色，精子的密度愈大，颜色愈白;越小，则越淡。如果精液颜色有异常，则说明精液不纯或公猪有生殖道病变，如呈绿色或黄绿色时则可能混有化脓性的物质;呈红色时则有新鲜血液;呈褐色或暗褐色时则有陈旧血液及组织细胞;呈淡黄色时则可能混有尿液等。凡发现颜色有异常的精液，均应弃去不用，同时，对公猪进行对症处理、治疗。
　　2-1 -3、气味：正常的公猪精液含有公猪精液特有的微腥味，这种腥味不同于鱼类的腥味，没有腐败恶臭的气味。有特殊臭味的精液一般混有尿液或其它异物，一旦发现，不应留用，并检查采精时是否有失误，以便下次纠正做法。
　　2-1 -4、酸碱度：可用PH试纸进行测定。公猪精液的酸碱度一般呈弱碱性或中性，其酸碱度与精子密度呈负相关的关系，PH值越接近中性或弱酸性，则精子密度越大，但过酸过碱都会影响精子的活力。
　　2-1-5精子活力：精子活力的高低关系到配母猪受胎率和产仔数的高低，因此，每次采精后及使用精液前，都要进行活力的检查，以便确定精液能否使用及如何正确使用。精子活率的检查必须用37℃左右的保温板，以维持精子的温度需要。一般先将载玻片和盖玻片放在保温板上预热至37℃左右后，再滴上精液，在显微镜下进行观察。检查前应先将精液瓶上下轻轻翻转使精液混匀，然后制作涂片，用显微镜100倍观察精子活力，计算活精子和死精子的百分比。随后再在400倍下观察精子尾部摆动情况并记录其活动情况。每次检查精子活力，要进行人工授精的精子活力质量要求必须不低于70+++，异常精子不超过20%。
　　2-1-6精子密度：指每毫升精液中含有的精子量，它是用来确定精液稀释倍数的重要依据。
　　2-1-6-1用精子密度仪计算精子密度：美国和欧洲等养猪业发达的国家多采用这种方法，它极为方便，检查时间短，准确率高，使用寿命长，但价格较贵，一般国外进口都在一万元人民币以上，但若用国产分光光度计改装，也较为适用。它有两种类型：一是德国的精子密度仪，它是将原精液滴一滴在一个一次性的特制塑料板上，然后通过仪器直接测量精子的密度，这种方法一般要先进密度仪的校正;另一种是利用光电比色法，以精子对光通透性差为依据，用分光光度计读出一个数字，然后再根据事先准备好的标准曲线确定精子的密度。这两种类型都 有一个缺点，就是会将精液中的异物按精子来计算。用精子密度仪检查精子密度，将是国内外猪人工授精人员较好的选择。
　　2-1-6-2若达不到以上的设备要求，可用以下方法粗略测定精子密度：
　　2-1-6-2-1、白细胞稀释吸管计数法：这种方法是用手动计数器和血细胞计数板来统计精子密度的。目前，在国内应用较多，成本低，计算较准确，但所用时间多，使用效率低。
　　主要做法是先用红血球稀释吸管取精液到球下的0.5(稀释200倍)或1.0刻度处(稀释100倍)，然后再吸取注射用生理盐水到膨大部上方的101刻度处，用两指(拇指和食指或中指)紧紧压住吸管的两端进行摇动混合均匀，吸取的过程中，不允许有空气混入吸管，以免影响准确度。摇均后，将吸管未端的液体擦干，并去掉前几滴混合液，然后顺着盖有盖玻片的血细球计数板的边缘，让混合液渗入到计数板内，再通过显微镜观察，用计数器点数，这种检查一般为总精子数。然后利用公式计算每毫升精子的密度。精子密度的计算公式为：
　　全方格内的精子数×10(厚度的倍数)×稀释倍数(100或200)×1000=精子数/毫升
　　2-1-6-2-2简单检查密度法：这种方法不用计数，用眼观察显微镜下精子的分布，精子所覆盖的面积大过空间面积的为“密”，小于空间面积的为“稀”，介于二者之间的为中等。一般只用密和中等的精液，稀的应弃去。这种方法简单，但对于不同检查人员而言，主观性强，误差较大，只能对公猪进行粗略的评价，故大型养猪场一般不采用这种方法，只适应个体户或人工授精数量少的猪场。
　　2-1-7畸形精子率：畸形精子指断尾、断头、有原生质、头大的、双头的、双尾的、折尾等精子，一般不能直线运动，虽受精能力较差，但影响精子的密度。若通过摄像显示仪观察，则很容易区分。若用普通显微镜观察，则需染色;若用位相差显微镜，则可直接观察。公猪的畸形精子率一般不能超过20%，否则应弃去。
　　2-2.实验设备的消毒处理：精液稀释的成败，与所用仪器的清洁卫生有很大关系。所有使用过的烧杯、玻璃棒及温度计，都要及时用蒸馏水洗涤，并进行高温消毒，是稀释后的精液能保证适期保存、利用的重要条件。
　　2-3.稀释液
　　2-3-1稀释液的成分:
　　一般精液稀释液包括有一种或多种保护剂。尽管目前采用的公猪精液稀释液有多种多样，但就其化学组成上来看主要有以下一些成分。
　　2-3-1-1.
　　代谢或营养物质，以减少精子自身能量消耗，以便延长精子寿命，一般为单糖，如葡萄糖。
　　2-3-1-2.
　　适宜的缓冲体系，以保持精液的PH值及渗透压的基本稳定。
　　2-3-1-3.
　　大分子物质，以保护精子免受降温的不利影响，如牛血清白蛋白。
　　2-3-1-4. 抗生素，以阻止细菌的生长
　　2-3-2稀释液的配制：稀释液的配制种类很多，正在试验尚未定型的更多，采用何种稀释倍数应根据其效果，保存方法和成分是否容易得到而定，配制时要注意下列事项：
　　2-3-2-1.
　　配制稀释液所用的一切用具，必须彻底洗涤干净，消毒后用前并经稀释液冲洗才能使用。
　　2-3-2-2.
　　稀释液必须保持新鲜，要现配现用。
　　2-3-2-3.
　　所用的蒸馏水要求新鲜，PH值呈中性。
　　2-3-2-4.
　　配置稀释液所用的药品成分要纯净，称量要准确，充分溶解。
　　2-3-2-5.
　　抗生素必须在稀释液冷却至室温时按用量准确加入。
　　2-4精液的稀释
　　2-4-1、精液稀释头份的确定
　　稀释前，应对自己所需稀释的精液头份进行确定。稀释头份可按如下方法进行计算：人工授精的正常剂量一般为30～50亿个精子/1个剂量，体积为80～100ML，美国一般采用30亿/80ML.头份，我国一般采用40亿左右/100ML.头份，不过，这主要是根据实际情况而定。正常的公猪精液，假如密度为2亿/ML，采精量为150ML，并计划稀释后密度为40亿/100ML.头份。则此公猪精液可稀释150×2/40=7.5头份，即需加(750150)ML=600ML稀释液。不过，同一种稀释液，精子密度越大，因所消耗能量多，保存时间也就越短。
　　2-4-2、精液的稀释
　　2-4-2-1.采精后精液应尽早稀释，原精液放置的时间过长会影响其活力，一般最好在30分钟以内完成稀释。
　　2-4-2-2.先进行一倍稀释(稀释液温度等同鲜精温度)稀释时将稀释液缓慢注入，轻柔转动混和均匀。放置30分钟，按其质量根据配种需求，再进一步稀释分装，(每头份100ml)
　　2-4-2-3.稀释时使稀释液沿精液瓶壁缓缓加入，防止将精液迅速倒入稀释液内，造成局部稀释打击。
　　2-4-2-4稀释液的温度与精液的温度必须调整一致，温差不超过1℃。
　　2-4-2-5稀释后将精液瓶轻轻转动使精液与稀释液混合均匀，切忌剧烈震荡。
　　2-4-2-6精液稀释后即进行镜检，如果活率下降，说明稀释或操作不当。
　　2-5、稀释后精液的分装
　　精液的分装，有瓶装和袋装两种，装精液用的瓶子和袋子均为对精子无毒害作用的塑料制品。瓶装的精液分装时简单方便，易于操作，但输精时需人为挤、压或瓶底开口，因瓶子有一定的固体形态;袋装的精液分装一般需要专门的精液分装机，用机械分装、封口，但输精时因其较软，一般不需人为挤压。瓶子一般上面均有刻度，最高一刻度为100ML，袋子一般为80ML。
　　分装后的精液，要逐个粘贴标签，一般一个品种一个颜色，便于区分。注意要在上面标明公猪耳号、采精处理时间、稀释后密度、经手人等，并将以上各项登记到记录本上，以备查验。
　　2-6、稀释后精液的保存
　　2-5-1分装后的精液，不能立即放入17℃左右的恒温冰箱内，应先留在冰箱外1小时左右，让其温度下降，以免因温度下降过快而刺激精子，造成死精子等增多。
　　2-5-2放入冰箱时，不同品种的公猪精液应分开放置，否则匆忙中容易拿错精液。不论是瓶装的或是袋装的，均应平放，并可叠放。
　　2-5-3从放入冰箱开始，每隔12小时，要摇匀一次精液，因精子放置时间一长，会大部分沉淀。对于一般猪场来说，可在早上上班，下午下班时各摇匀一次。为了便于监督，每次摇动的人都应有摇动时间和人员的记录。
　　2-5-4保存过程中，一定要时时注意冰箱内温度计的变化，以免因意想不到的原因而造成电压不稳而导致温度升高或降低。
　　2-6、精液的运输
　　2-6-1对于远距离购精液的猪场，运输的过程是一个关键的环节。
　　2-6-2保温或防暑条件做得好的，运到几千公里之外，精子活力等还较强，使用效果还是很好，母猪受胎率和产仔数也仍很高;做得不好的，就是同一场内不同时间、地点使用，死精率也是很高，使用效果很差。高温的夏天，一定要在双层泡沫保温箱中放入水袋(17℃恒温)，再放精液进行运输，以防止天气过热，死精太多，严寒的季节，要用保温用的恒温乳胶或棉花等在保温箱内保温。

松林秋泉

很好很详细

无知青年

程序都是那个程序 就看做的好坏 是否认真！

lengyifu

细节决定成败

aikaxumu

规章制度再好，就看执行到位情况了