DL-蛋氨酸氮含量问题

yangj

今化验室检测一DL-蛋氨酸氮含量仅8.96%（理论含量9.4%），不合格，而用滴定法检测含量为98.83%，合格，鉴别发现：其溶于稀酸，在稀碱中没完全溶有悬浮物，想请各位帮我们分析一下原因，谢谢！（注：各项操作均按要求）

阳光绿茶008

你用什么方法做的呀，居然是8.9而且还说标准是9。4%？

阳光绿茶008

1.4 蛋氨酸含量的测定

1.4.1  间接碘量法（甲硫法）

1.4.1.1  原理 DL-蛋氨酸及其类似物都有CH3-S-CH2-CH2-基团结构，可以与碘反应，被碘氧化，与蛋氨酸反应后剩余的碘用硫代硫酸钠标准溶液滴定，根据消耗碘量的多少可以得到蛋氨酸的含量

1.4.1.2 方法步骤

称取0.3g（0.0002g）干燥的样品，置于250ml碘量瓶中，加入100ml水溶解，加入2g 磷酸二氢钾、5g磷酸氢二钾、2g碘化钾，充分摇匀溶解。准确加入50ml0.05mol/l碘溶液，盖紧瓶塞，避光静置30min，加入1ml淀粉指示剂，用0.1mol/l硫代硫酸钠标准溶液滴定，溶液从蓝色变成绿色再至无色为终点，同时做试剂空白试验。

按下式计算蛋氨酸含量：

    蛋氨酸含量（%）=[C(V0-V1)×74.60]/ W   

式中：V0——滴定空白时所需硫代硫酸钠标准溶液体积（ml）；

         V1——滴定样品时所需硫代硫酸钠标准溶液体积（ml）；

         C——硫代硫酸钠标准溶液的浓度（mol/l）；

         W——样品重量（g）；

74.60——1/2C5H11NO2S的摩尔质量（g/ mol）。

1.4.2 凯氏定氮法

1.4.2.1原理  蛋氨酸在还原性催化剂（如CuSO4,K2SO4或Na2SO4或Se粉）的帮助下用浓硫酸进行消化作用,使蛋氨酸中的氮转变成NH4+并与H2SO4化合成(NH4)2SO4；而非含氮物质，则以CO2↑、H2O↑、SO2↑状态逸出。消化液在浓碱的作用下进行蒸馏，释放出氨态氮,用硼酸溶液吸收之并与之结合成为四硼酸铵,然后以甲基红-溴基酚绿混合溶液作指示剂，用HCl标准溶液（0.05mol/l）滴定,求出氮的含量，进而求出蛋氨酸的含量。

1.4.2.2方法步骤

    称取经105°C干燥4h后试样0.5g（称准至0.0002g）放入100ml凯氏烧瓶中，加入7g硫酸钾、0.5g硫酸铜和15ml浓硫酸。在电炉上慢慢消化至透明，取下冷却，定量转入100ml容量瓶，冷却后定容。移取该试液10.00ml，装上半微量水蒸汽蒸馏装置进行蒸馏，蒸出氨用50毫升2%硼酸溶液吸收，用甲基红-溴基酚绿混合溶液作指示剂，用0.05mol/l HCl标准溶液滴定至暗红色。并用同样方法做空白试验。

    按下式计算蛋氨酸含量：

蛋氨酸含量（%）= [C(V2- V1)×149.21]/ W     

    式中：V2——滴定试样时所需酸标准溶液体积（ml），

         V1——为滴定空白时所需酸标准溶液体积（ml），

         C——盐酸标准溶液的浓度（mol/l），

         W——试样重量（g），

149.21——C5H11NO2S的摩尔质量（g/ mol）。

2 两种含量测定方法的比较

2.1 比较两种方法的测定结果

间接碘量法（甲硫法）与凯氏定氮法测定蛋氨酸含量，其结果常常差别较大。事实上，两种方法测定结果的忽高忽低受到多钟因素的影响。具体情况分析如下：若样品里混入一些还原性杂质（如含硫的物质），会与加入的碘液反应，导致间接碘量法（甲硫法）结果偏高；而样品里掺入一些含氮化合物如尿素、碳铵等时，凯氏定氮法结果将偏高。

蛋氨酸是既含有氨基又含有硫基的有机物，所以必须同时采用间接碘量法（甲硫法）与凯氏定氮法来确定蛋氨酸的含量才是科学的，仅用间接碘量法（甲硫法）或仅用凯氏定氮法来确定蛋氨酸的含量显然是不妥的。

2.2 比较两种方法的准确度

不含干扰杂质时间接碘量法（甲硫法）与凯氏定氮法测定结果均准确、可靠，但如果从更加细致的角度来看，凯氏定氮法的测定结果与标准含量更为接近。在用间接碘量法时，淀粉指示剂容易因保存期较短而失效，碘液中的碘也有部分会被空气氧化，从而导致消耗的硫代硫酸钠标准溶液增多，使测定值偏高；另外，蛋氨酸中的硫也会不同程度的被空气氧化，从而导致消耗的碘液减少，使测定值偏低。因此，今后在使用间接碘量法时，应在避光、密封条件下进行。相比较而言，凯氏定氮法的测定结果受外界一些理化因素的干扰较小一些，测定结果的准确度更高一些。

2.3 比较两种方法的精密度

间接碘量法（甲硫法）与凯氏定氮法都是经典的分析方法，两种方法重现性好，有很高的精密度。单就这两种方法的比较而言，凯氏定氮法比间接碘量法（甲硫法）有更高的精密度。

3 结论

用化学分析法同时测甲硫基和氨基来确定蛋氨酸的含量的方法简便、可靠，结合定性分析判别蛋氨酸质量优劣的方法是完全可行的，也是科学的。本方法也适用于羟基蛋氨酸、羟基蛋氨酸钙、N-羟基蛋氨酸钙等类似产品的检测。

yangj

蛋氨酸氮含量为8.96%（定氮法）即换算成C5H11NO2S的含量为95.49%

杜韶霞

如果做得没问题的话，应该蛋氨酸有问题，我做过好几个厂家的，住友的曹达的迪高沙的，含氮量都和标准值差不多，你做的差的太多了，考虑原因吧

yangj

你们的蛋氨酸水溶性怎样，是否完全溶于稀酸和稀碱？

yangj 于 2010-6-2 13:02 补充以下内容

请教阳光绿茶：蛋氨酸凯氏定氮法是那里的方法，谢谢