复方丹参注射液与盐酸甜菜碱抗心肌缺氧的实验研究

wlei908 · 发表于 2010-4-29 21:07:26

【摘要】  目的观察复方丹参注射液与盐酸甜菜碱合用对心肌缺氧小鼠耐缺氧作用的影响，并比较两药单用的效果，为研究新药提供实验依据。方法采用腹腔注射异丙肾上腺素造成心肌耗氧量增加小鼠模型，记录不同时间点的累计耗氧量和小鼠的存活时间。结果复方丹参注射液与盐酸甜菜碱合用组5、10 min小鼠累计耗氧量明显降低，且存活时间延长，与单用药物组相比，差别有统计学意义；丹参注射液组与盐酸甜菜碱组相比，差别无统计学意义。结论复方丹参注射液与盐酸甜菜碱联用对改善心肌缺氧效果显著，疗效优于单用组。

【关键词】  复方丹参注射液盐酸甜菜碱心肌缺氧

　　The antimyocardial hypoxic effects of compound solvia miltiorrhiza injection and betaine hydrochloride

　　CHEN Meihua， WU Yuepeng， CHEN Wei， MENG Qiang， GAO Yunsheng

　　（School of Pharmacy, Taishan Medical College，Taian 271000，China;Affiliated Hospital of Taishan Medical College, Taian 271000，China；Pharmaceutical Undergraduate of 2003 Grade, Taishan Medical College，Taian 271000，China）

　　Abstract： Objective： To study the effect of tolerance hypoxia of hypoxic cardiomyocyte mice by combined application of compound solvia miltiorrhiza injection and betaine hydrochloride, to compare the effect of the two drugs with that used alone, and to establish a laboratory foundation in developing new drugs.  Methods: Mice models of myocardium anoxia increase were induced by injected isoprenaline. Then put mice into the obturated vases and record the accumulative oxygen consumption of different time and the survival time of mice. Rusults：Compared with that in mice received compound solvia miltiorrhiza injection or betaine hydrochloride alone, the accumulative oxygen consumption of 5 and 10 minutes were reduced obviously and the survivial time were prolonged in mice received compound solvia miltiorrhiza injection and betaine hydrochloride. There were no significant difference between compound solvia miltiorrhiza injection group and betaine hydrochloride group. Conclusion：Compound application of compound solvia miltiorrhiza injection and betaine hydrochloride has a notable result in antihypoxic cardiomyocyte, moreover the effects are better than the single drug.

　　Key words: compound solvia miltiorrhiza injection;  betaine hydrochloride; hypoxic cardiomyocyte

　　丹参是一种主治心血管系统疾病的常用中药，中医理论认为丹参具有祛瘀止痛、清心除烦的作用。复方丹参注射液(compound solvia miltiorrhiza injection)是由丹参和降香经过先进的工艺提取制成，主要成分为原儿茶醛及原儿茶酸。复方丹参注射液在治疗冠心病方面有肯定的疗效，通过扩张冠状动脉，增加心肌供血供氧，也通过钙拮抗和抗氧化作用减轻心肌损伤，还用于治疗高血压和其他老年心脑血管疾病［1］。甜菜碱(betaine)化学名为三甲铵乙内酯，属季铵型生物碱，是广泛存在于动植物体内的天然维生素物质，40年代初，研究人员发现甜菜碱对动物体内的甲基代谢有显著的营养调控作用，甜菜碱作为甲基供体，与胆碱、蛋氨酸共同参与生化反应，参与蛋白质的合成。盐酸甜菜碱可用于治疗胃酸缺乏、动脉粥样硬化及肝脏疾病等，并具有扩张血管、降低外周血管阻力、降压、抗脂肪肝和抗肿瘤等多种药理作用［2］。实验证明，盐酸甜菜碱(betaine hydrochloride,BTH)可增强心肌耗氧量增加小鼠的耐缺氧能力。本实验通过腹腔注射异丙肾上腺素造成小鼠心肌耗氧量增加，观察不同时间点的累计耗氧量及小鼠的存活时间，比较复方丹参注射液组、盐酸甜菜碱组和二者联用组耗氧量及存活时间有无差别，为发现甜菜碱的药用价值和研究开发心血管药物提供实验依据。

　　1  材料和方法

　　1.1  实验材料

　　1.1.1  药品及试剂  复方丹参注射液（上海通用药业股份有限公司，批号：041130）；盐酸甜菜碱由泰山医学院药学院合成，配制成2%溶液供实验用；0.05%盐酸异丙肾上腺素注射液（ISO，上海禾丰制药有限公司，批号：030706）；0.9%氯化钠注射液（NS，山东省泰安制药厂，批号：05020202）。

　　1.1.2  实验动物  昆明种小鼠（清洁型），体重18～22 g，由泰山医学院实验动物中心提供。

　　1.1.3  仪器  小鼠耗氧量动态变化测定装置，泰山医学院药学院制备。

　　1.2  实验方法

　　1.2.1  动物分组与给药方法  将实验小鼠按性别和体重随机分为5组：①生理盐水对照组；②模型对照组；③2%盐酸甜菜碱组；④复方丹参注射液组；⑤2%盐酸甜菜碱与复方丹参注射液联用组。其中，①组小鼠腹腔注射（ip）NS 20 ml/kg，其余四组均ip盐酸异丙肾上腺素20 mg/kg。10 min后，③组小鼠ip 2%盐酸甜菜碱20 ml/kg，④组小鼠ip复方丹参注射液20 ml/kg，⑤组小鼠ip 2%盐酸甜菜碱20 ml/kg和复方丹参注射液20 ml/kg，其余两组ip NS 20 ml/kg。

　　1.2.2  实验测定装置  安装小鼠耗氧量动态变化测定装置［3］，调整液面至定量管“0”刻度，备用。

　　1.2.3  实验观察方法  小鼠第二次ip后10 min，将小鼠放入盛有钠石灰的广口瓶内，使装置密闭。立刻记录实验开始时间，密切观察小鼠的反应。小鼠吸入O2，呼出CO2，CO2被钠石灰吸收，装置内气体压力降低，烧杯内的水在定量管内上升。分别观察和记录实验开始后5、10 min时液面上升高度，作为小鼠的累计耗氧量；记录各鼠从装置密闭至呼吸停止的时间，为小鼠缺氧存活时间。

　　1.3  统计学处理

　　实验结果以±s表示，统计学处理采用SPSS统计学软件进行方差分析。

　　2  结果

　　2.1  对心肌耗氧量增加小鼠存活时间的影响

　　复方丹参注射液和盐酸甜菜碱单用组小鼠缺氧存活时间较模型对照组延长，延长率分别为35.54%和27.27%，与模型对照组相比，差异有统计学意义（P<0.05），而单用组二者相比，差别无统计学意义（P>0.05）；联用组缺氧存活时间与盐酸甜菜碱组相比，差别有统计学意义（P< 0.05），与等剂量丹参注射液组相比，差别有高度统计学意义（P<0.01）。结果见表1、图1。
2.2  对心肌耗氧量增加小鼠累计耗氧量的影响

　　小鼠放入密闭装置后5 min、10 min定量管中液面上升的高度为5 min、10 min的累计耗氧量。结果表明，2%盐酸甜菜碱和复方丹参注射液在20 ml/kg时可降低小鼠5 min、10 min的累计耗氧量，两药联用组耗氧量明显降低，疗效优于单用组（P<0.05）。见表2、图2。

　　表1  复方丹参注射液和盐酸甜菜碱对小鼠存活时间的影响（略）

　　注：1. F=7.827  P=0.000；2. a.与NS对照组比较 P<0.05， b.与模型对照组比较 P<0.05，c.与BTH组比较 P<0.05，d.与丹参注射液组比较 P<0.01
　　
　　表2  复方丹参注射液和盐酸甜菜碱对小鼠累计耗氧量的影响（略）

　　注：1. 5min  F=4.639  P=0.003， 10min  F=4.821  P=0.003；2. a.与NS对照组比较 P<0.05，b.与模型对照组比较 P<0.05，c. 与BTH组比较 P<0.05，d.与丹参注射液组比较 P<0.05

　　图1  各组小鼠缺氧时间的比较（略）

　　图2  各组小鼠累计耗氧量的比较（略）

　　3  讨论

　　丹参在临床上主治心血管系统疾病，近年来研究显示，丹参具有清除氧自由基、保护线粒体改善能量代谢、减轻钙超载调节钙稳定作用。实验证明盐酸甜菜碱可增强心肌缺氧小鼠的耐缺氧作用［5］，故本实验观察复方丹参注射液和盐酸甜菜碱对心肌缺氧小鼠的耐缺氧作用。实验结果表明，模型对照组5min、10min累计耗氧量分别较正常对照组升高70.95%和56.51%，二者相比差别有统计学意义，说明异丙肾上腺素引起心肌耗氧量增加小鼠模型制备成功。实验所使用的小鼠耗氧量变化动态测定装置，可同时观察小鼠的存活时间、不同时间的累计耗氧量及不同时间段的耗氧量，能够客观反映小鼠的耐缺氧能力。结果显示：复方丹参注射液单用组，小鼠的存活时间较模型对照组延长，5 min、10 min累计耗氧量也较模型对照组降低，证实了复方丹参注射液在改善心肌缺氧方面的作用。提示丹参可通过抗氧化作用保护线粒体、钙拮抗作用及扩张血管等作用增加心肌供血供氧，也可能通过拮抗儿茶酚胺类递质降低耗氧量，发挥对心脏的保护作用，药理实验和临床结果是一致的。

　　甜菜碱是合成蛋氨酸、肉碱、肌酸、磷脂、肾上腺素等多种具有重要生理功能的物质所必需的，甜菜碱参与甲基化反应，可作为机体内胱氨酸向蛋氨酸转变的甲基供体，替代蛋氨酸的供甲基效能。研究表明，甜菜碱对呼吸酶具有保护作用，Pollard［6］等观察到，甜菜碱对牛肝谷氨酸脱氢酶、猪心MDH、猪心谷—草转氨酶活性有保护作用，推测甜菜碱对缺氧心肌具有保护作用可能是影响三羧酸循环中的某些酶活性实现的，但目前甜菜碱对酶的生理功能保护机制并不清楚，可能是甜菜碱包围酶形成一层外壳，使酶免于其他因素引起其构象、聚合—解聚等变化［7］。

　　本实验中复方丹参注射液和盐酸甜菜碱单用组相比，累计耗氧量和存活时间均无差别，说明二者在改善心肌能量代谢方面没有显著的药效差别。而二者联用组，小鼠缺氧存活时间较单用组延长，5 min、10 min累计耗氧量也较单用组降低，提示两药联用在改善心肌缺氧方面具有协同作用，具体机制尚不清楚。通过我们的实验，可以推测甜菜碱在改善心肌能量代谢方面有作用，有望开发成为治疗心血管疾病的一种新药，但需要做大量的研究，进一步阐述其抗心肌缺氧的作用机制。

牛莫王 · 发表于 2010-4-30 07:30:34

治疗五号病心肌炎怎样？？？

yangxue · 发表于 2010-4-30 13:51:17

甜菜碱的作用还真是广泛，不知效果是否真的这么好。

复方丹参注射液与盐酸甜菜碱抗心肌缺氧的实验研究

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