测真蛋白注意事项

晨忆 · 发表于 2010-1-14 17:33:42

　　在试样的前处理过程中，“煮沸”要求是加热至沸并保持30分钟，目的是使试样中的非蛋白氮类物质充分溶解于水中。加10％硫酸铜溶液和25％氢氧化钠溶液时最好采用移液管移取，然后沿着烧杯内壁缓慢滴加，一方面防止局部氢氧化钠太浓将溶解部分蛋白质，这样会导致最终结果偏低；另一方面是为了使试样中的真蛋白质充分盐析：放置2小时或静置过夜也是这个道理。沉淀物宜以双层中速定量滤纸过滤，双层滤纸可以加快过滤速度，同时又不致于将沉淀物过滤掉。滤液无SO+2表明了已充分洗涤沉淀物，因为如果滤液中仍有SO+2 。则表明沉淀物中间仍可能夹杂有部分可溶性非蛋白氮类物质(如NH )，若不继续洗涤则将导致最终结果偏高。将滤纸和残渣(沉淀物)包好放入烘箱中于65～70cc下干燥2小时是为了使沉淀物充分干燥。一方面是为了避免沉淀物中仍夹杂有一些氨类物质(尽管这种情况一般不会发生。因为滤液已经过了氯化钡试液的检验，但仍不能排除因人眼观察的局限性使其中间仍夹杂有部分热烘干的过程中挥发掉)；另一方面也是为了下一步试样消化的顺利进行。因为如果试样潮湿，炭化升温过快，气体骤然膨胀不易从凯氏烧瓶中散发出去，很容易使试样与气体一同冲出凯氏烧瓶从而导致消化失败