真蛋白的测定

ljs3611 · 发表于 2009-7-22 09:11:47

方法一，盐析法
①试剂
1．硫酸铜溶液：10%，称取50.00g硫酸铜加水溶解，并稀释至500ml
2．氢氧化钠溶液：2.5%，称取12.50g氢氧化钠，加水溶解，并稀释至500ml
3．盐酸标准溶液：0.05mol/L
②真蛋白测定
精确称取样品1g左右，置于250ml烧杯中，加50ml蒸馏水，于电炉上加热煮沸，加入20ml10%硫酸铜溶液，再在搅拌下缓缓加入20ml2.5%氢氧化钠溶液，摇匀。从电炉取下，室温放置2小时。沉淀物用中速定性滤纸倾泻法过滤。并用少量70℃以上热水多次洗涤烧杯和沉淀物，直至滤液无so2+4离子（用5%BaCl2溶液检验无沉淀），连沉淀物一起放入80℃干燥箱中烘至略潮，和入凯氏定氮烧瓶中，消化，测定其中的蛋白质含量（同粗蛋白的测定），同时进行空白测定。另取样品0.5g进行粗蛋白的测定。
方法二：测非蛋白氮（NP）法
①NP的测定
称取15g左右样品（精确到0.1mg）,准确加入100ml5% 三氯乙酸溶液，浸泡振荡2h ,静置过滤，精确量取10－20ml滤液定氮（消化时可加2－3滴正辛醇作消泡剂），同时做空白实验。
②NP的计算
同粗蛋白质（CP）的计算
③真蛋白质（TP）的计算
TP%＝CP%－NP%
真蛋白质的比率＝TP%/CP%*100%
一般来讲，真蛋白质的比率应符合下列数值：
进口鱼粉应≥80%，国产鱼粉≥75%。