十四、猪传染性萎缩性鼻炎乳胶凝集试验(LAT)操作方法
猪传染性萎缩性鼻炎乳胶凝集试验是用支气管败血波氏杆菌,致敏乳胶抗原来检测动物血清中的抗体。具有简便、快速、特异、敏感之优点。
(一)
试验材料
猪传染性萎缩性鼻炎乳胶凝集试验抗体检测试剂盒:包括猪传染性萎缩性鼻炎致敏乳胶抗原、阳性血清、阴性血清、稀释液、玻片、吸头及使用说明书。由华中农业大学畜牧兽医学院研制。
(二)操作方法
1.定性试验:取检测样品(血清)、阳性血清、阴性血清、稀释液各一滴,分置于玻片上,各加乳胶抗原一滴,用牙签混匀,搅拌并摇动1~2分钟,于3~5分钟内观察结果。
2.定量试验:先将血清作连续稀释,各取1滴依次滴加于乳胶凝集反应板上,另设对照同上,随后再各加乳胶抗原一滴,如上搅拌并摇动,判定。
(三)结果判定
1.判定标准:
“++++”全部乳胶凝集,颗粒聚于液滴边缘,液体完全透明;
“+++”大部分乳胶凝集,颗粒明显,液体稍混浊;
“++”约50%乳胶凝集,但颗粒较细,液体较混浊;
“+”有少许凝集,液体呈混浊:
“—”液滴呈原有的均匀乳状。
2.对照试验出现如下结果试验方可成立,否则应重试:阳性血清加抗原呈“++++”;阴性血清加抗原呈“—” ;抗原加稀释液呈“—”。
以出现“++”以上凝集者判为阳性凝集。
(四)注意事项
1.试剂应在2~8℃冷暗处保存,暂定1年。
2.乳胶抗原在使用前应轻轻摇匀。
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