抗氧化酶的测定方法

cuiyming

抗氧化酶（SOD、CAT、GXP）能否用放射免疫法测定啊？哪位老师解答一下！！ 谢谢！！

李业明

这个我真不懂！请专业老师指点一下吧！

fansssss

这个用一般的分光光度计比色法就解决了，为啥要用放免呢，我们通常买南京建成的试剂盒来测的。

xmzhao

血清中超氧化物歧化酶（SOD）活性的测定：
通过黄嘌呤及黄嘌呤氧化酶反应系统产生超氧阴离子自由基（O
2.-），后者氧化羟胺形成亚硝酸盐，在显色剂的作用下呈现紫红色，用可见分光
光度计测其吸光度。当被测样品中含SOD时，则对超氧阴离子自由基有专
一性的抑制作用，使形成的亚硝酸盐减少，比色时测定管的吸光度值低于
对照管的吸光度值，通过公式计算可求出被测样品中的SOD活力。高等动
物细胞内只有两种SOD即铜锌－SOD（CuZn-SOD）与锰－SOD（Mn-SOD），
二者相加等于总SOD（T-SOD）。本试验测定的即为血清与乳清中的总SOD
活力。
试剂组成与配制
试剂一：液体10ml×1瓶（天冷时或放冰箱会有部分结晶析出，需热
水浴溶解后再用），用时加热蒸馏水稀释至100ml。
试剂二：液体7ml×1瓶，4－10℃保存。
试剂三：液体7ml×1瓶，4－10℃保存。
试剂四：液体0.5ml×1支，4℃保存，不可冷冻；4号稀释液7ml×1
瓶，4℃保存；用时二者按1：14稀释，可以一次稀释，也可以分次稀释。
配好的4号试剂4℃保存，不可冷冻。配好的可保存2－3个月。注：所
用吸嘴必须为专用且消毒处理过。
试剂五：粉剂×1支，用时加70-80℃蒸馏水75ml溶解后备用，若加
热过程中水分蒸发减少，此时必须用蒸馏水补充至75ml，配好后的试剂
避光4℃冷藏。
试剂六：粉剂1支，用时加双蒸水75ml溶解后备用，配好后的试剂
避光4℃冷藏保存。
显色剂的配制：按照5号试剂：6号试剂：冰醋酸＝3：3：2的体积
比配成显色剂，4℃避光冷藏。
操作步骤
按表1-3-1进行
表1-3-1（Table1-3-1）SOD的测定过程
试剂测定管对照管
试剂一（ml）1.0 1.0
样品（ml）a*
蒸馏水（ml）a*
试剂二（ml）0.1 0.1
试剂三（ml）0.1 0.1
试剂四（ml）0.1 0.1
用旋涡摇匀器充分混匀，置37℃恒温水浴40分钟
显色剂（ml）2 2
匀，室温放置10分钟，于波长550nm处，1cm光径比色杯，蒸馏水调
比色。
注：其中a*为样品的取样量，血清取50μl。
结果计算
SOD活力（U/ml）＝（对照管OD值－测定管OD值）/对照管OD值×
2×反应体系的稀释倍数×样品测定前的稀释倍数



硕士论文中的方法，希望有用！