多福人工授精技术手册（1）

dofu · 发表于 2008-12-3 14:52:40

精子警示录精子细胞很敏感，很容易损害，它需要你的特别细心的呵护。对精子细胞会产生不良影响的因素有：

温差休克（特别是冷休克）温度波动（如：气流）尿液或包皮液紫外线（如：阳光）水（各种水）肥皂、洗涤剂消毒剂（如：酒精）震荡乳胶及部分聚乙烯产品

在采集精液时，只能使用对精子无害的PVC手套。使用新采购手套前，一定要检测手套是否含有对精子有害的物质。方法如下：采集精液，按常规操作加稀释粉稀释精液，分装在两个杯子里，一个杯子作为对照，把手套剪成碎片放入第二杯精液中，放置到第二天，用显微镜观测两个杯子里的精液样本。如果样本没有差别，则这批手套是安全的，可以使用，如果第二个瓶子精液质量明显差了，停用这批手套，并联系供货商告知手套存在问题。一定不要将新鲜精液或稀释精液直接倒入冷的烧杯内。当你在另一个容器内混合精液和稀释液时，首先要将稀释液倒入这个容器内，并检测温度是否在允许范围内。因为很可能冷容器会导致稀释液温度下降到允许温度之下，造成精液品质下降。细节决定水平，细心创造价值，人工授精需要您特别关注细节！

aikaxumu · 发表于 2008-12-4 20:45:29

调教公猪需要极大的耐心，循序善诱！

dofu-jessica · 发表于 2008-12-5 09:45:15

稀释剂的制备

按照正确的操作步骤将稀释粉添加精液里，不会对精液质量产生不良影响，它能够延长精细胞的存活时间并且稀释精液，因此同一头公猪的精液能够几天内对多头母猪进行配种。

注意事项

1. 必须用去离子水或蒸馏水来配稀释液，自来水可能含有化学物质、矿物质和细菌，会对精子造成损害。
2. 要先将前一次配置的稀释液用完，不同批次的稀释液不能混合使用。
3. 稀释剂应当在采集精液前混合和预热好。
4. 如果稀释液当天没有用完，您可以

a) 储存在冰箱里面，第二天使用；

b) 如果要3-4天才要用到，则要冰冻储存。稀释剂冰冻储存期可达3个月。

稀释粉的配制（以中效稀释粉“银多福”为例：

A 将980g的去离子水倒入消毒好的烧杯内。
B把一包52g “银多福”稀释粉加入水中。
C将水和稀释粉充分搅匀，静置30分钟后稀释液的PH值达到最稳定状态。
D将烧杯放入水浴锅预热备用。

不同的稀释粉被稀释的浓度不同，在使用之前，请仔细阅读说明。

dofu-jessica · 发表于 2008-12-8 17:59:40

采精杯的准备

1.取一个300ml-450ml的一次性泡沫塑料杯，它的作用是保温，在采集精液过程中能够减少精液温度的流失。

2．在杯子顶部放置2至4层的过滤纸，作用是隔离精液中的凝胶。

3. 用橡皮筋将过滤纸固定在泡沫塑料杯，防止移动。

4.在过滤纸中间用手指压下得凹下去一点，避免采精时精液溢出杯外。

5.在泡沫杯外面再套一个塑料袋。

6.将套有塑料袋的杯子放入采精保温杯中，将塑料袋沿着保温杯边沿翻下来，这样保温杯在采精过程中能保持干净。

7.将保温杯放在恒温箱内备用。注意：保温杯敞开，不要盖盖子。

dofu-jessica · 发表于 2008-12-9 16:32:50

实验设备的准备

A 将上次剩余稀释液放入水浴锅，预热到人体温度。

B 将瓶子和瓶盖放入恒温箱

C为了满足一天的需要，你可能需要再配制一些新的稀释液

D查看档案，确定今天采精的公猪，这些公猪是否有某些问题以及行为怪癖需要告知采精人员。

F 确保预热板中能提供足够的盖玻片和载玻片来满足当天工作需要。

dofu-jessica · 发表于 2008-12-10 14:44:19

精液采集方法

A 从恒温箱里拿出准备好的采精杯

B用盖子将保温瓶盖上，直到公猪射出精液才打开。

C将公猪带入采精间，让公猪爬跨假母台或发情母猪。

D 当公猪开始冲插时，轻柔将阴茎鞘里包皮液和尿液挤出(挤牛奶程序)，用干燥的纸巾将阴茎鞘擦拭干净。一些公猪（特别是年老的公猪）的阴茎鞘有很长的毛发，小心修剪掉毛发，以方便采精。

E 戴上一只无菌、无尘、抗静电的手套，戴手套的手握空拳。

F 当公猪的阴茎进入你的空拳中，握住阴茎。当公猪认为阴茎是被子宫颈锁住，就会伸长阴茎，停止冲插。

G 不要强拉阴茎，温柔地顺着它伸长，开始收集精液。

H要保持阴茎在包皮之外，防止尿液或包皮液沿着阴茎流入样本，对精子产生伤害。

射精包括四个阶段：初期精液期；富含精子期；后期精液期；啫喱部分。初期和后期的精液不要采集，这两个阶段主要成分为精液血浆，外观呈透明到半透明状；富含精子期的成份外观为白色或米白色，是应该采集的精液；啫喱部分自始自终存在于整个射精过程。通过采精杯上的过滤纸可以将精液与啫喱分离。

第一阶段与第二节段变化明显，而第二与第三阶段是逐渐变化的，当射出的精液变成较白的米白色，就可以开始收集了。相反的，当精液开始出现水样时，停止收集将采精杯拿走。但一定要让公猪做完整个射精过程。

在采精完成后，要立即在采精杯上的写上公猪的编号，将样本拿回实验室做质量评估，将公猪赶回自己的猪窝。

dofu-jessica · 发表于 2008-12-16 14:56:14

精液评估

检测新鲜精液，以DVM精子浓度测试仪为例：

按ON/OFF打开DVM浓度测试仪，会出现VALUE DIAGNOSTIC SYSTEM （有价值的诊断系统），接着出现MODEL 942 %T （942模型）。显示INSERT BLACK （插入空白对照）

用移液器从稀释剂里取1ml加入到试管中，将只装有稀释剂的试管放入DVM中，当出现REMOVE BLACK取走试管，DVM上面显示INSERT SAMPLE 。

用移液器向试管里添加25ul精液，混匀。注意：添加时要清除枪头外壁所粘精液。

然后将装有测试精液样本的稀释剂试管放入，会显示READING SAMPLEM PLEASE WAIT ：即正在读取，请等候，最后出现 15-90%T的数字。

记录百分数，对照所给表格得出所测精液浓度。

如果数据结果出现大于90%时，从新检测，1ml稀释剂加入50ul的精液样本，测得结果对照表格的浓度数除以2 即为所测精液浓度。

如果数据结果出现小于15%时，从新检测，2ml稀释剂加入25ul的精液样本，测得结果对照表格的浓度数乘2 即为所测精液浓度。

测量精液温度。
向精液中加入等量的稀释液。确保稀释液的温度比精液的温度低，但温差小于一度。将稀释液沿精液杯边沿倒入，注意在任何环境下稀释液的烧杯与精液杯都不能接触，防止沾染到稀释液和其他精液样本。
缓慢搅匀上述1：1液体，吸取一滴稀释精液放在载玻片上，盖上盖玻片。
样本评估：用1-10分评判a精子活性、b尾巴畸形率，c尾巴上的小点。