寄生虫虫卵采集及保存方法
虫体大多寄生于消化道内,蠕虫虫卵、球虫卵囊等都是通过粪便排出体外,因此,粪便检查虫卵是个可靠的方法。
虫卵检查法主要有直接涂片法、饱和盐水浮卵法和沉淀法。
1 直接涂片法
2 饱和盐水浮卵法
3 沉淀法
4 虫卵收集与保存
用上述方法检出的阳性粪便,采用沉淀法进一步浓缩收集寄生虫标本。取粪便30~50g,加入生理盐水调成混悬液,经金属筛过滤于1000mL锥形量杯中,静置1h。轻轻倾出上清液,再加等量生理盐水静置。如此反复清洗、沉淀数次,直至上清液清澈为止。轻轻倾出上清液,将沉淀物中加入适量40g/L甲醛保存备用。
5 蠕虫虫卵标本制作
甘油明胶的配制:将明胶10g浸入蒸馏水60ml中过夜,隔水加热,使明胶全部溶解,然后加入甘油70ml,石炭酸1.5ml,搅拌,调和成具有粘度的明胶液体,用湿棉花将明胶液体过滤去渣。甘油明胶遇冷后容易凝固,使用时应将甘油明胶置于水浴锅中加热,使其充分溶化。
甘油虫卵混合液的制备:取已固定的蠕虫卵加适量甘油(1∶1),置35℃-40℃温箱内,待虫卵甘油沉淀后,用吸管吸去上清液放置2-3天,加甘油保存。
玻片标本制作:用孔径0.15mm毛细吸管取甘油虫卵混合液一滴,置于载玻片中央,然后用细玻棒挑取甘油明胶一滴,放在载玻片的虫卵上,迅速混匀,用18mm×18mm盖玻片覆盖,再滴加加拿大树胶用22mm×22mm盖玻片作完整封片。 |