如何检测饲料原料中的非蛋白氮

xinhongsi · 发表于 2008-6-19 09:32:50

现在原料中搀假严重,给饲料厂家带来很大损失和麻烦.谁有好办法,用饲料厂常用化验设备很好地检测非蛋白氮

dongnongzz · 发表于 2008-6-19 10:10:36

给你提供一点鱼粉掺非蛋白氮的检验方法
8．鱼粉中掺尿素的检验
   方法1
称取10克样品于烧杯中，加入100ml蒸馏水中搅拌，取滤液1ml于点滴板上，加2-3滴甲基红指示剂，再滴加2-3滴尿素酶溶液（或用生黄豆粉水溶液代替尿素酶溶液，生黄豆粉中含有尿素酶），约经5分钟，如点滴板上呈深红色。则说明样品中掺有尿素。
尿素酶溶液的配制：称取0.2g尿素酶，溶解于100ml 95%的乙醇中。
  甲基红指示剂的配制：称取甲基红0.1g，溶解于95%的乙醇中。
方法2
无尿素酶药品时，则可用此方法检验。取两份105g鱼粉于两支试管中，其中一支加入少许黄豆粉，两管各加蒸馏水5ml，震荡，置60-70℃恒温水浴中3分钟，滴6-7滴甲基红指示剂，若加黄豆粉的试管中出现较深紫红色，则说明鱼粉中有尿素。
方法3
称取10g鱼粉样品,置于150ml三角瓶中,加入50ml的蒸馏水,加塞用力振荡2-3分钟,静置,过滤,取滤液5ml,于20ml的试管中，将试管放酒精灯灼烧，当溶液蒸干时,可嗅到强烈的氨臭味.同时把湿润的PH试纸放在管口处,试剂立即变成红色，此时PH植高达近14。如果纯鱼粉则无强烈的氨气味，置于管口处的PH试纸稍有碱性反应，微显蓝色，离开管口处则慢慢退去。
   9．鱼粉中掺入双缩脲的检验
称取鱼粉试样2g，加20ml蒸馏水，充分搅拌，静止10分钟，干燥滤纸过滤，取滤液4ml于试管中，加6moL/L氢氧化钠溶液1ml，再加入1.5%CaSO4溶液1ml，摇匀，立即观察，溶液呈蓝色则鱼粉没有掺入双缩脲，若呈紫红色，则鱼粉中掺有双缩脲，红色越深，掺入双缩脲的比例越大。

秋叶 · 发表于 2008-6-19 10:25:19

测真蛋白就可以了
真蛋白测定方法
1、原理
   硫酸铜在碱性溶液中，可将蛋白质沉淀，且不溶于热水过滤和洗涤后，可将纯蛋白质和非蛋白质含蛋物分离，再用凯氏定蛋法测定沉淀中的蛋白质含量。
2、仪器设备
   （1）烧杯：200ml。
   （2）定性滤纸。
   （3）其他设备与粗蛋白质测定法的相同。
3、试剂及配制
   （1）100g/L硫酸铜溶液：分析纯硫酸铜（CuSO4·5H2O）10g溶于100mL蒸馏水中。
   （2）25g/L氢氧化钠溶液：将2.5g分析纯氢氧化钠溶于100mL蒸馏水中。
   （3）10g/L氯化钡溶液：1g氯化钡（BaCl·H2O）溶于100mL蒸馏水中。
   （4）2moL/盐酸溶液。
   （5）其他试剂预一般粗蛋白测定法的相同。
4、测定步骤
            准确称取试样1g左右（精确到0.0001g），置于200mL烧杯中，加50mL蒸馏水，加热至沸，加入20mL硫酸铜溶液，20mL氢氧化钠溶液（加入以上两种溶液多要缓慢，且要边加入边搅拌），用玻璃棒充分搅拌，放置1h以上，用倾斜过滤（用定型滤纸），然活后用60~80℃热蒸馏水洗涤沉淀5~6次，用氯化钡溶液5滴和盐酸溶液1滴检查滤液，直至不生成白色沉淀为止。将沉淀和滤纸放在65℃烘箱干燥2h，然后全部转移到凯氏烧瓶中，消化后进行定蛋测定。
5、结果计算
   同粗蛋白测定。

haochunqing · 发表于 2008-6-19 11:16:57

现在测真蛋白没作用了，好多非蛋白氮是不溶于水的。

尚天有道 · 发表于 2008-6-19 11:32:15

非蛋白氮的检验：水解蒸馏法        原理非蛋白氮主要包括以下五类：尿素及其衍生物类、氨态氮类、铵类、肽类及其衍生物、动物粪便及其它废弃物类。如果在原料中掺有氨态氮类、铵类和粪便比较容易判断（可采用硫酸铜沉淀法加镜检），一般很少将肽类及其衍生物掺入其中，剩下比较难鉴别的就是尿素及其衍生物。
尿素和尿素衍生物经过强酸或强碱水解为氨盐或氨和其它的物质，在强碱的条件下可以蒸馏出氨气，原料中的蛋白质经过水解成氨基酸盐，氨基酸盐在强碱条件下稳定，从而可将非蛋白氮和真蛋白氮进行分离。仪器和设备：酒精喷灯，试管和其它常用的仪器。试剂与溶液：6mol／1的盐酸溶液和其它常用的试剂。
测定方法：酸水解法。 
1、采样品约100g，混匀后用四分法缩分出20g左右，将其粉碎，使其全部通过60目样品筛。
2、精确称取0.3000g的样品，置于容积为 60ml的试管底部（注意样品勿沾在管壁上），加入30ml  6mol／l的盐酸溶液，将试管在距试管口 l～2cm处用喷灯加热并封口。
3、将封好的试管置于干燥箱内，于110℃下水解24h。
4、冷却后打开试管，将水解液过滤至100ml容量瓶中，用蒸馏水反复多次冲洗试管和滤纸，然后定容至刻度。
5、用10ml移液管移取10ml样液移入半微量式定氮仪的反应室中，加入20ml 1:1的氢氧化钠溶液蒸馏10  min，余下的步骤按照测定粗蛋白的方法进行操作，得出样品所消耗的盐酸的体积为V1（ml）。同时作空白滴定可得消耗的盐酸的体积为V0，设所称样品的质量为M（g）。  
  非蛋白氮的粗蛋白质计算公式:   CP(%)＝(V1-VO)×C×O.14×6.25/ M  

尚天有道 · 发表于 2008-6-19 11:33:16

以前看到过，自己没有用过！可以试一试！自我感觉还可以！所以收藏至今！

dongnongzz · 发表于 2008-6-19 14:28:13

定量检测要求设备很高的,不知道大家注意到没有!

nonddy · 发表于 2008-6-19 17:03:03

上边的方法太繁琐，来点简单的！！
3.3 TCA分离可溶蛋白
(1) 称0.5g左右的干燥试样放入125ml的锥形瓶中 (2) 加入50ml蒸馏水，静置30分钟 (3) 加入10ml10%的三氯乙酸，静置20-30分钟 (4) 用54或者541目的滤纸过滤 (5) 用三氯乙酸溶液冲洗锥形瓶两次 (6) 把残渣转移至凯氏管内测定其氮得到NPN

wujianping992 · 发表于 2008-6-20 00:10:18

了解了解啦！！！！！！！！！！！！！

xinhongsi · 发表于 2008-6-21 21:24:38

请教haochunqing老师：您认为有什么好法来测不容于水的非蛋白氮？