生化黄腐酸对奶牛体细胞数及生产性能影响的研究
锡效旺1 孙少华1 韩立霞1
1.河北农业大学动物科技学院 保定 071001
摘要：通过对奶牛饲喂生化黄腐酸试验，研究其对奶牛生产性能、血液生化指标及体细胞计数的影响，进一步研究奶牛乳房炎的抗病力。选择50头泌乳奶牛，进行分组试验。结果表明，添加生化黄腐酸的试验组奶牛的产奶量较对照组提高了5.99%,乳脂率提高8.50%,体细胞数下降了40.09%，蛋白率变化不明显；奶牛血清中SOD含量提高了3.6%，GSH-PX含量提高了7.72%，LDH含量降低9.3%，MDA变化不明显，奶牛白细胞维持正常，两组各项指标差异均不显著（p＞0.05）。综合指标分析表明：饲喂生化黄腐酸具有提高奶牛泌乳性能，减少奶牛体细胞计数，增强机体抗病力的效果。
关键词：生化黄腐酸；奶牛；体细胞数；生产性能；生化指标
Study on the Effect of Biochemical Fulvic Acid on Somatic cell count
and Milk Performance of Dairy Cow
Xi xiao-wang Sun shao-hua Han li-xia
(College of Animal Science and Technology, Agricultural University of Hebei, Baoding, 071001.)
Abstract: Study to feed biochemical fulvic acid(BFA) influence milk performance,blood biochemical indicators , somatic ceel count and mastitis resistibility of dairy cows .Selectting 50 lactation cows were divided into test group and control group. Research results showed that milk yield , milk fat percentage and SOD ,GSH-PX content in serum for dairy cow of BFA test group were increased 5.99% , 8.50% 3.6% and 7.72% respectively than the control group.Somatic cell count, LDH content in serum for dairy cow of BFA test group dropped 40.09% and 9.3% respectively than control group. Milk protein percentage , MDA content in serum and WBC of blood for dairy cow of BFA test group did not change significantly. The all test index are not significantly different (p> 0.05). The experiment of feeding BFA for dairy cows showed that BFA enhance the body resistance and milk performance.
Key words: Biochemical fulvic acid; Dairy cows; Somatic cell count; Performance; Biochemical indicators
前言
乳房炎是危害奶牛业健康发展的重要疾病，每年临床性乳房炎发病率为15%~20%，隐性乳房炎发病率为46%~85.7%，不仅造成产奶量降低4%~20%，而且鲜乳品质大大下降，美国每年每头乳房炎损失225美元，中国约为1200~3600元。由于隐性乳房炎难以发现，使牛场造成的经济损失更难以估计[1]【2】。因此，预防和治疗乳房炎就成为当前奶牛场的重要工作。乳中体细胞计数（Somatic cell count，SCC）是反映乳房是否炎症（包括隐性乳房炎）的一个重要指标，乳房感染程度越高，乳中体细胞数越多。据研究，临床性乳房炎与SCC呈高度相关性（r=0.5~0.7） [3] [4]。因此各国把测定奶牛体细胞数作为奶牛乳房炎抗性的选择性状和监测指标。国际奶牛联合会规定：SCC在20-40万为隐型乳房炎，50万以上为临床型乳房炎。据报道奶牛日产奶量与隐性乳房炎发病程度呈极显著负相关[4]。乳汁中体细胞数越高,泌乳量减少的越多。
乳房炎传统的治疗方法主要使用抗生素等药物,其结果不仅因药物残留造成鲜乳的废弃，而且长时间使用抗生素类药物会使奶牛产生抗药性，影响药效。因此，一种预防和治疗乳房炎，且无药物残留的生态型制剂，生化黄腐酸也就应运而生了。
生化黄腐酸（Biochemical Fulvic Acid,BFA）是一种有机物经微生物发酵而产生的大分子聚合物，内含多种具有生物活性的抗病因子及氨基酸、维生素等营养物质。其生物活性具有消炎、止血、收敛、抗过敏、调整胃肠机能、增强机体免疫能力的功效，日粮中少量添加有防病保健及增产作用[5]。孙少华等[6]发现利用生化黄腐酸添加剂治疗奶牛乳房炎，治愈率达80%以上；张萤蕾等[7]也报道了日粮中添加生化黄腐酸BFA粉可显著降低临床乳房炎发病率及隐性乳房炎检出率,从而提高奶牛产奶量,可提高牛奶品质,降低治疗费用,增加效益。谷子林等[8]进行的试验表明,生化黄腐酸可提高机体的非特异性免疫力,增加白细胞数量和吞噬细胞活性,同时具有止血和收敛作用。本实验通过给泌乳期奶牛添加生化黄腐酸，研究其对奶牛体细胞数和生产性能以及血液生化指标的影响,进而达到降低体细胞数、预防乳房炎，提高生产性能的目的。
1实验材料和方法
1.1 试验地点和时间
试验地点设在唐山市芦台天成奶牛场，试验时间为2008年3月8日至5月10日，试验期为两个月。
1.2试验牛的选择和分组
唐山芦台天成奶牛场选择50头泌乳前中期的健康荷斯坦牛，根据产奶量，体细胞数，胎次和泌乳天数等相近的原则分为试验组和对照组，每组25头。实验前进行T检验，各项指标差异不显著后进行试验。
1.3 饲养管理
唐山芦台天成奶牛场饲喂全价混合标准日粮，由TMR机械投喂，日投3次、挤奶3次，生化黄腐酸分2次添加到早晚饲喂的奶牛全混合日粮中，每头每天15克。
1.4 血样、乳样的采集与测定
试验奶牛均采用挤奶机挤奶，试验期每月定期采集一次乳样送河北省良种站DHI测定中心进行DHI分析，测定乳脂率，乳蛋白率和乳中的体细胞数。试验期前和试验期后每头奶牛各采集一次血样，分离血清，用于奶牛血液生理生化指标测定。
1.5 试验材料
1.5.1 生化黄腐酸粉剂由深州绿源牧业公司提供。
1.5.2 生化分析试剂盒：超氧化物歧化酶（SOD）测试盒、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）测试盒、乳酸脱氢酶（LDH）测试盒和丙二醛（MDA）测试盒及测定方法均由南京建成生物工程研究所提供。
1.5.2血常规及白细胞数均由河北大学附属医院分析测定
1.6 统计分析
在数据处理过程中采用了通用的产犊季节划分标准和泌乳阶段划分标准[9]。
表1 产犊季节和泌乳阶段划分标准
产犊季节 水平 泌乳阶段 水平
春（3、4、5） 1 前期（0～15） 1
夏（6、7、8） 2 盛期（16～100） 2
秋（9、10、11） 3 中期（101～200） 3
冬（12、1、2） 4 后期（201～305） 4
305天以上—— 5
为了消除胎次、产犊季节、泌乳阶段对产奶量、乳成分及体细胞计数的影响，构建了最小二乘线性模型[10][11]。其线性模型为：
Y =µ + z + t + c + m +e
其中Y-各性状的观察值；µ-各性状最小二乘均值；z-试验分组效应； t-胎次效应； c-产犊季节效应；m-泌乳阶段效应；e－残差效应。
应用Excel对所测数据进行T检验和利用SAS软件对所测数据做最小二乘法分析。
2 结果与分析
2.1 生化黄腐酸对奶牛产奶量、乳成分及体细胞数的影响
表2 天成奶牛场奶牛产奶量及体细胞数最小二乘均值及差异显著性检验
产奶量(kg) 体细胞数(万个/ml)
项目 试验前 试验后 差值 P 试验前 试验后 差值 P
试验组 34.58±2.33 26.89±2.44 -7.69 0．04 43.65±16.9 18.23±9.1 -25.4 0.009
对照组 35.95±2.56 25.37±2.35 -10.58 0．005 39.78±18.5 30.43±8.8 -9.35 0.08
差值 -1.37 1.52 ＋2.89 -3.9 -12.2 －16.05
F 0.28 0.25 0.04 1.16
P 0.60 0.62 0.80 0.29
注：试验组、对照组各25头； 横向为T检验，纵向为最小二乘检验。
从表2可以看出，试验前后的两组奶牛产奶量均下降，且差异均显著（p＜0.05）。其中试验组测定日下降7.69kg/头，对照组下降10.58kg/头，试验组下降较对照组下降缓慢，少下降2.89kg/头日。在试验后比较，试验组平均产奶量比对照组提高1.52kg/头日，提高了5.99%,但差异不显著（p＞0.05）；试验组体细胞数比对照组减少了12.2万个/ml,但差异不显著（p＞0.05）。与试验前比较，试验组和对照组的体细胞数均有所下降，试验组下降25.4万个/ml（p＜0.05）,对照组下降9.35万个/ml（p＞0.05）,但试验组较对照组下降明显，多减少体细胞数为16.05万/ml。
表3 天成奶牛场奶牛乳成分最小二乘均值及差异显著性检验
乳脂率（%） 乳蛋白率（%）
项目 试验前 试验后 差值 P 试验前 试验后 差值 P
试验组 3.15±0.23 3.29±0.23 0.14 0.03 3．10±0.06 3．03±0.06 －0.07 0.21
对照组 3.12±0.25 2.94±0.22 -0.18 0.42 3.04±0.07 2．97±0.07 -0.07 0.26
差值 0.03 0.35 ＋0.32 0.06 0.06 0
F 0.02 3.63 1.19 0.68
P 0.90 0.06 0.28 0.42
注：试验组、对照组各25头。横向为T检验，纵向为最小二乘检验。
从表3中可以看出，在试验后，试验组测定日乳脂率较对照组增加0.35个百分点,提高了 11.9%，差异不显著（p＞0.05）；试验组乳蛋白率较对照组增加0.06个百分点，提高了1.97%，差异不显著（p＞0.05）。与试验前对比，试验组乳脂率升高了0.14个百分点（p＜0.05），而对照组降低了0.18个百分点，即试验组相对提高了0.32个百分点；乳蛋白率试验前后对比，两组均同步有所下降，但差异不显著（p＞0.05）。
2.2生化黄腐酸对奶牛血液生化指标的影响
2.2.1唐山芦台天成奶牛场生化黄腐酸对奶牛血液生化指标的影响
表4 生化黄腐酸对奶牛血液生化指标的影响
项目 试验组（25） 对照组（25） P值（t检验）
白细胞WBA（U/L） 8.8±1.23 12.4±2.65 0．06
超氧化物歧化酶SOD（U/mL） 133.69±19.49 129.1±21.33 0．23
谷胱甘肽过氧化物酶GSH-PX（U/L） 395.23±175.35 366.90±184.56 0．30
乳酸脱氢酶LDH（U/L） 3908.46±1341.94 4306.97±2753.16 0．12
丙二醛MDA (mmol/ml) 4.42±2.18 3.79±1.65 0．14
注：试验组对照组各25头
从表4可以看出，唐山芦台天成奶牛场试验组奶牛血清中SOD含量比对照组提高了3.60%，GSH-PX含量提高了7.72%，奶牛血清中LDH比对照组降低了9.3%，MDA有所提高，但差异均不显著（p＞0.05）；生化黄腐酸并且能使奶牛白细胞维持在正常的范围内。
3 效益分析
表2和表3分析结果表明，添加生化黄腐酸后，试验组比对照组每头奶牛平均每天增产1.52千克，平均乳脂率提高0.35个百分点,平均蛋白率提高0.07个百分点，体细胞数减少12.2万个/ml，达到国家一级鲜奶的要求。若按现在市场鲜奶价格每千克2.8元，生化黄腐酸每头奶牛每天投入0.6元（＝15克/头日×0.04元/克）计算，则每头牛每日净增加收入为3.66元（＝1.52kg×2.8元/kg－0.6元/日），若按泌乳期305天计算，一个泌乳期每头牛仅因产奶量增加就可多增收1116.3元，经济效益十分显著。另外通过添加生化黄腐酸，降低了奶牛因乳房炎的淘汰率，延长了奶牛的利用年限，降低了生产成本。
4 讨论
4.1利用最小二乘线性模型剔除系统环境效应
本试验利用最小二乘分析法，对奶牛的胎次、泌乳阶段和产犊季节进行了校正，剔除了系统环境效应的影响，使奶牛产奶量、乳脂率、乳蛋白率和体细胞数值准确、可靠，达到了最佳线性无偏估计。
4.2生化黄腐酸对奶牛产奶量和乳成分的影响
从表2和表3可以看出，添加生化黄腐酸后试验组奶牛的平均产奶量较对照组每天上升了1.52kg/头，并且乳脂率、乳蛋白率较对照组也有所升高，这与高静、吴子申等[12]报道的奶牛投喂生化黄腐酸后平均产奶量，乳脂率提高变化趋势基本一致。通过试验前后奶牛产奶量的对比分析还可以看出，由于接近夏季且到泌乳后期，虽然试验组和对照组产奶量均有所下降，但试验组奶牛平均产奶量较对照组下降缓慢，少下降2.89千克，证明了生化黄腐酸对于维持奶牛的高产性能也有重要作用。
另外，为了保证试验结果的准确性，我们还对芦台天成奶牛场饲喂生化黄腐酸的大牛群与未饲喂的大牛群共82头（试验群38头，对照群44头）进行了DHI数据资料分析（试验前各项指标检验差异均不显著（p＞0.05））。大群的试验前后对比说明试验结果变化趋势同小组试验结果一致，测定日产奶量试验群比对照群少下降0.78千克（试验群－6.94kg，对照群－7.72kg），试验群的乳脂率和乳蛋白率较试验前分别提高了0.54和0.07个百分点，而对照群乳脂率则下降0.25个百分点，乳蛋白率未变。试验后，试验群乳脂率和乳蛋白率较对照群分别提高0.47（3.26%-2.79%；P﹤0.05）和0.04（3.10%－3.06%；P＞0.05）。进一步证明了生化黄腐酸具有提高奶牛产乳量和乳质量的作用。
4.3生化黄腐酸对奶牛体细胞数及乳房炎的影响
抗病力通过表2可以明显的看到投喂生化黄腐酸后，试验组奶牛的体细胞数明显低于对照组12.2万，并且维持在18.2万的较低水平，达到国家一级奶的要求。在同一牛场的大群82头试验也同样说明了试验群比对照群体细胞数少43.73万/ml（33.26－76.99），且对照群患乳房炎牛头数增多，也进一步证明生化黄腐酸有减少奶牛体细胞数，降低乳房炎发病率的功效。
4．4生化黄腐酸对奶牛免疫力的影响
从表4看出，投喂生化黄腐酸后，奶牛血清中的SOD、GSH-PX有所升高，LDH下降、MDA有升高。另外我们在保定宏康奶牛场对26头奶牛饲喂生化黄腐酸的进一步试验证明，其结果同芦台牛场一致，试验组奶牛血清中SOD、GSH-PX比对照组分别提高1.7％(153.74:151.23)和1.53％(357.28:351.91),MDA下降22.7％（1.50：1.94），但差异不显著（p＞0.05）。说明奶牛主要通过提高SOD、GSH-PX酶的抗氧化活性来及时消除体内过剩自由基对机体组织的危害[13]。并且据生化黄腐酸的体外抗菌实验研究表明生化黄腐酸在体外不能杀菌,但内服却具有抗菌作用,而且无任何副作用[14]。其主要是诱导机体产生干扰素，激活网状内皮系统增强非特异性免疫，对病原微生物产生强大抵抗力。说明生化黄腐酸对奶牛维持正常的生理机能和增强免疫力有重要作用。
致谢：河北省良种工作站倪俊卿副主任和马亚滨提供奶牛DHI数据，芦台天成奶牛场刘焕君场长帮助饲养试验。
参考文献：
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[6] 孙少华，马喜成等.牛宝001添加剂对奶牛乳房炎的疗效观察，辽宁畜牧兽医 1996年（2）12－13
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[14] 韩兆玉,金志红,魏永刚 ，奥奶净对奶牛生产性能和血液生化指标的影响，中国奶牛,2008(3):7-9.
附录
1.供试牛基本情况见表1，2。
表1 唐山芦台天成供试牛基本情况
项目 平均胎次 平均泌乳天数 平均产奶量 平均乳脂率 SCC（万个/ml）
试验组（25） 3.28±1.43 158.2±52.7 34.58±2.33 3.15±0.23 43.65±16.9
对照组（25） 3.04±1.06 165.5±50.6 35.95±2.56 3.12±0.25 39.78±18.5
P值 0．25 0．31 0．60 0．79 0．95
注：括号内为牛头数
表2 保定宏康供试牛基本情况
项目 平均胎次 平均泌乳天数 平均产奶量 平均乳脂率 SCC（万个/ml）
试验组（13） 1.92±0.75 150.7±72.6 14.70±5.42 4.22±0.91 51.4±54.7
对照组（13） 1．92±1.03 150.4±73.3 13.15±5.48 4.25±1.36 50.2±59.0
P值 0．37 0．24 0．21 0．18 0．65
注：括号内为牛头数
2.大群分析比较
表3 天成奶牛场大群牛产奶量及体细胞数LSM值及显著性检验
产奶量(kg) 体细胞数(万个/ml)
项目 试验前 试验后 差值 P 试验前 试验后 差值 P
试验组 29．20±1.67 22.26±1.98 -6.94 0．002 29.71±11.1 33.26±20.3 3.55 0．28
对照组 31．96±1.70 24.24±2.05 -7.72 5．7*10-5 24.12±11.3 76.99±21.0 52.87 0．14
差值 -2.76 -1.98 5.59 -43.73
F 2.24 0.80 0．21 3.73
P 0．14 0．37 0．65 0．06
注：试验组38头，对照组44头横向为T检验，纵向为最小二乘检验，均值为最小二乘均值。
表4 天成奶牛场大群奶牛乳成分LSM值及差异显著性检验
乳脂率 蛋白率
项目 试验前 试验后 差值 P 试验前 试验后 差值 P
试验组 2.72±0.37 3.26±0.16 0.54 0．19 2.96±0.11 3.10±0.06 0.07 0．24
对照组 3.04±0.37 2.79±0.16 -0.25 0．07 3.06±0.11 3.06±0.07 0 0．07
差值 -0.32 0.47 -0.1 0.04
F 0．63 7．61 0．66 0.30
P 0．43 0．007 0．42 0．59
注：试验组38头，对照组44头横向为T检验，纵向为最小二乘检验，均值为最小二乘均值。
3. 保定宏康奶牛场生化黄腐酸对奶牛血液生化指标的影响
表5 生化黄腐酸对奶牛血液生化指标的影响
项目 试验组（13） 对照组（13） P值
白细胞WBA（U/L） 7.28±1.95 6.8±1.50 0．26
超氧化物歧化酶SOD SOD（U/mL） 153.74±16.65 151.23±20.27 0．34
谷胱甘肽过氧化物酶GSH-PX（U/L） 357.28±30.96 351.91±44.50 0．36
MDA (mmol/ml) 1.50±1.11 1.94±1.47 0．20
注：试验组对照组各13头 |
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