溶菌酶产品对某水产养殖厂水样抑菌效果分析

wangxulai

溶菌酶产品对某水产养殖厂水样抑菌效果分析

试验材料
分析水样：采集于杭州市余杭区某中华鳖养殖基地，共采集8个养殖池塘混合后为一个样品。
溶菌酶产品：杭州公司生产提供
培养基：LB液体与LB固体培养基 pH 7.0
试验方法
1 配制溶菌酶试验液 精确称量溶菌酶4mg溶解于1ml pH 6.2的磷酸盐缓冲液中，得4mg/ml的溶菌酶试验液；
2 将灭菌后的LB液体培养基分装至4只150ml锥形瓶中，每瓶25ml培养基，分别加入1.25ml，0.625ml，0.3125ml和0ml的4mg/ml的溶菌酶溶液，标注A，B，C和D。
3 将采集到的水样经滤纸过滤出去残留的泥沙和其他固体物质，滤液收集于50ml灭菌过的离心管中，按1%的比例分别接种至以上4只锥形瓶中，置37℃，200rpm恒温摇床中过夜培养16~18h；
4 从摇床中将以上各组培养液取出，各取3ml在紫外可见分光光度计下测定OD600。
5 将以上各组培养液取50ul涂布LB固体培养基平板（96mm）统计菌落数量。
试验结果
1各组吸光度如下：
A（0.2mg/ml）组：OD600=0.000          B（0.1mg/ml）组：OD600=0.002
C（0.05mg/ml）组：OD600=0.002         D（0mg/ml）组：OD600=0.617
2 平板菌落统计
A（0.2mg/ml）组：0                     B（0.1mg/ml）组：0
C（0.05mg/ml）组：0                    D（0mg/ml）组：不计其数
附图如下：
   

为进一步了解合适的使用浓度，采用降低的溶菌酶试验浓度再次进行试验研究，浓度分别为A组0.01mg/ml，B组0.05mg/ml，C组0.0025mg/ml，D组0 mg/ml。试验方法同上。
试验结果
1各组吸光度如下：
A（0.01mg/ml）组：OD600=0.105         B（0.005mg/ml）组：OD600=0.107
C（0.0025mg/ml）组：OD600=0.546       D（0mg/ml）组：OD600=1.775
若以D组（空白对照组）为参照标准（100%），各试验组菌体残留比例分别为：A组 5.9%；B组 6.03%；C组 30.76%，D组 100%。因此在0.005mg/ml的使用浓度时可实现90%以上的抑菌效果，使用为0.0025mg/ml时可以实现70%以上的抑菌效果。由此建议使用剂量约为5ppm。
注：以上试验结果是在实验室控制条件下得到的，现实使用时条件变化可能会一定程度的影响试验结果。