蛋白消化液测定钙磷

tony2005428

很感兴趣哦
但是还是第一次听说过
有多少家公司用过此方法，能否介绍一下经验？？？
谢谢

粗蛋白你做过比较，也有这方面的资料，能否贴出来供大家参考一下，谢谢！！！！！
:huahua: :xuehu:

粗蛋白

04年取化验上岗证发的"饲料检验化验员"书上有这种检测法, 我对比了一下,只是自己所用的催化剂与书上的不一致,  书上是硫酸钾和硒粉(或双氧水)作的催化剂,而我用的是硫酸铜与硫酸钾(1:15), 因此在检测钙时加入乙二胺色泽就有一点异常,加入KOH时全变成紫红色无法进行下去; 然后我又做,加入乙二胺和孔雀石绿后就未加KOH, 色泽已显荧光,继续加盐酸羟胺和钙指示剂, 用EDTA滴定,耗了50多毫升标液荧光却一直不消失......最终用此法测钙含量以失败宣告结束. 测磷得出了数据但还需继续检测验证.
     如果有朋友是使用硫酸钾和硒粉(或双氧水)作催化剂的,不防做做, 这样可节约很多时间的少很多事情!!  书上已给出此法来"快速检测钙磷", 我想肯定是行的!!

月亮花

原帖由 dy3166 于 2008-1-5 13:30 发表
用蛋白消化液测定钙磷怎么计算？
还有用这种方法测定钙磷应该注意什么？

大家讨论的蛋白消化液是已经蒸馏后的（测完氮）还是刚消化完的。如果是前者就比较有意义，如果是后者蛋白质如何测定。另外，整个体系的体积和浓度如何定，需要准确才能算出准确的浓度或含量。如果测钙用EDTA法不好，能否用沉淀法？但如果使用蒸馏后的，过量碱造成的黑色以及pH偏高对草酸钙的影响会对结果不利。期待大家找出好方法。

any_wyb

没做过,请高手来解决了

粗蛋白

饲料中粗蛋白、钙、总磷的快速测定方法

一，方法原理：在催化剂或氧化剂存在下，用硫酸破坏试样中的有机物，使含氮化合物转变成成硫酸铵，钙、磷以离子形式进入硫酸溶液中，制备成试样溶液。分取部分溶液用凯氏定氮法测定粗蛋白，分取部分溶液用EDTA法测定钙，分取部分溶液用钒钼酸铵法测定磷。
二，试剂与溶液：浓硫酸  硫酸钾   硒粉  催化剂（硫酸钾+硒为 1000+1，磨细混匀压制成3.5克左右的圆饼备用）    过氧化氢(30%)   硼酸溶液(20克/升)    氢氧化钠(400克/升溶液)    混合指示剂(甲基红1克/升乙醇溶液与溴甲酚绿5克/升乙醇溶液等体积混合,在阴凉棕色瓶内保存)  0.02mol/l盐酸标液   蔗糖   硫酸铵  
盐酸羟胺   氢氧化钾(20%)  三乙醇胺溶液(1:1)  乙二胺溶液(1:1)   1%淀粉溶液   1克/升孔雀石绿水溶液   钙黄绿素-甲基百里香酚蓝指示剂   乙二胺四乙酸二钠标准液   钙标准溶液(0.001克/亳升)   
钒钼酸铵显色剂    磷标准溶液   

三，试样消化:
法1  硫酸、硒催化消化法：称取样0.5-1克,无损失的倒入凯氏瓶中,加入3.5克催化剂和12亳升硫酸,在电炉上加热待泡沫消失后升温至360-410度,加热至透明的微黄色,取下冷却，加20亳升水,转入100亳升容量瓶中流水冷却，用蒸馏水稀释至刻度摇匀为试样消化液.
法2  过氧化氢、硫酸、硒消化法：称取样0.5-1克,无损失的倒入凯氏瓶中,加入3.5克催化剂和12亳升硫酸,10亳升过氧化氢，小心混匀待反应泡沫消失后，置360度左右电炉上消化至透明的微黄色,取下冷却,加20亳升水,流水冷却，转入100亳升容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度摇匀为试样消化液.
法3  过氧化氢、硫酸消化法：称取样0.5-1克,无损失的倒入凯氏瓶中,加12亳升硫酸,10亳升过氧化氢，小心混匀待泡沫消失后置于升温至约250度电炉上加热至硫酸冒烟、溶液呈棕黑色，取上冷却，补加过氧化氢至溶液呈白色，再加热，如此反复数次至高温下溶液清亮，冷却,加25亳升水,流水冷却，转入100亳升容量瓶中,用蒸馏水稀释至刻度摇匀为试样消化液.
四，粗蛋白测定：略
五，钙的测定：准确移取试样消化液10-25亳升，加水50亳升，1%淀粉液10亳升，三乙醇胺液2亳升，乙二胺液1亳升，1滴孔雀石绿液，滴加20%氢氧化钾至无色再过量10亳升，加0.1克盐酸羟胺,加钙黄绿素-甲基百里香酚蓝指示剂少许,在黑色背景下立即用EDTA标液滴定至绿色荧光消失呈现紫红色为止,同时作空白.
               计算:Ca%= T*V2*V0*100  /  m*V1
                  T为EDTA标液对钙的滴定度(克/亳升); m为样品重(克)
             V0 V1 V2分别为试样消化液总体积, 分取试样体积,实际消耗EDTA标液体积(亳升)

六, 磷的测定: 准确移取试样消化液1-10亳升于50ml容量瓶中，加入钒钼酸铵显色剂10ml，定容摇匀,放置10分钟以上 .以标准空白液为参比,用1cm比色皿在分光光度计上400nm波长下测定试样液的吸光度.在标准曲线上查得试样消化液的含磷量。
计算          M1
P%=        ---------------------           *100
                M * V1/V *1000000  
M1——由标准曲线上查出的磷的量，ug  M 为试样质量 g  
V和 V1 分别为试样消化液总体积和分取试样体积 ml

dy3166

真的只有换催化剂才行吗？

粗蛋白

我用的硫酸铜作催化剂,  钙含量是无法检测出, 但磷含量能检测出.这几天做了几个对比样, 用蛋白消化液检测的磷比用灰份检测的磷高0.1% (用的是一个肉鸭料和一个蛋鸡料分别作对比试验)

王天西

在测定过程中加入1%淀粉溶液和孔雀石绿起什么作用,还有盐酸羟胺又是干什么用的,钙黄绿素--甲基百里香酚蓝指示剂在EDTA滴定前后是怎么反应,颜色为什么是这样变化的.感激不尽

dy3166

哪天，有位前辈告诉说取样后加10ml20%KOH溶液，然后再加淀粉、乙二胺、三乙醇胺、KOH等。这样的话一共就加了20mlKOH，但我做出来后钙含量还是高。
看来只有在研究了

dy3166

哪天，有位前辈告诉说取样后加10ml20%KOH溶液，然后再加淀粉、乙二胺、三乙醇胺、KOH等。这样的话一共就加了20mlKOH，但我做出来后钙含量还是高。
看来只有在研究了