请教各位老师关于饲料中钙，磷，盐分的测定方法(j具体点)

yuanmeng · 发表于 2008-1-1 15:56:21

我是个初学饲料化验员，希望各位老师多加指点，谢谢！~```

激光打印机 · 发表于 2008-1-1 19:43:38

在这里问你只能问关键点

真正学还是你们化验室的人带你比较好

yxy0725 · 发表于 2008-1-2 15:56:25

饲料中粗蛋白质、总磷、钙连续测定方法
1　原理
　　H2SO4和H2O2都是强氧化剂，在高温下放出新生态氧［O］，使饲料中的有机物破坏分解释放出CO2、SO2、NH3及各种无机元素，其中CO2、SO2释放到空气中，NH3与H2SO4结合生成(NH4)2SO4，P、Ca等各种无机离子均能分别留在消化液中。反应简式如下：
　　
1.1　粗蛋白质测定　硫酸铵在强碱条件下，蒸馏使氨逸出，用硼酸吸收后，用标准酸滴定，测定氮的含量，乘以6.25为粗蛋白质含量。
1.2　磷的测定　磷在酸性条件下，与钒钼酸铵作用，形成黄色钒钼酸铵(NH4)3PO4NH4VO3*16MoO3络合物，在420 nm波长下比色，其磷含量与吸光度成正比。
1.3　钙的测定　EDTA络合滴定法，在待测液中加入钙黄绿素指示剂，用EDTA标准溶液络合滴定钙进行测定。
2　测定方法
2.1　样品消化
2.1.1　试剂配制　双氧水：分析纯，含量30 %(市售原装为30 %～34 %，不用配制，直接使用)。硫酸：化学纯，含量为98 %，无氮。
2.1.2　消化步骤
　　称取粉碎过40目筛的饲料样品0.5～1 g，精确到0.0001 g，全部放入150～250 mL凯氏烧瓶中，加浓硫酸10 mL，摇匀，瓶口放一只小漏斗，在消化过程中起回流作用以减少硫酸的损失，放在500 W电炉上消煮20 min，使硫酸大量冒烟，消化液呈酱油色，此时将凯氏瓶取下稍冷却(手摸不烫手)，逐滴向瓶内加H2O2 10～15滴，加热消化，如此反复2～3次，直至瓶内溶液清彻透明为止。消化完毕后，待凯氏瓶冷却，将瓶内消化液小心地转移到100 mL容量瓶中，待溶液冷却至室温后，用蒸馏水定容至刻度，摇匀，该消化液可作粗蛋白质、总磷、钙的测定。同时做空白试验，以校正试剂的误差。
2.2　粗蛋白质测定
2.2.1　试剂配制　氢氧化钠：化学纯，含量40 %，40 g溶解在100 mL蒸馏水中。硼酸：分析纯，含量2 %，2 g溶解在100 mL蒸馏水中。混合指示剂：甲基红0.1 %乙醇溶液，溴甲酚绿0.5 %乙醇溶液，两溶液等体积混合，用棕色瓶贮于阴凉处。0.05 mol/L盐酸标准液：4.2 mL分析纯浓盐酸溶成1000 mL水溶液，用邻苯二甲酸氢钾法标定。
2.2.2　氨的蒸馏与滴定　用半微量水蒸汽蒸馏法，取20 mL 2 %硼酸吸收液，加混合指示剂两滴使冷凝管末端浸入。吸取10 mL样品消化液于反应室中，再加5 mL 40 %氢氧化钠溶液，用少量水冲洗进样口，塞好进样口玻璃塞，防止漏气，蒸馏4 min，冷凝管尖端稍高于吸收液面再蒸馏1 min，用蒸馏水冲洗冷凝管尖端，冲洗液与吸收液合并，立即用0.05 mol/L盐酸溶液滴定，溶液由蓝绿色突变为灰红色为终点，同时进行空白测定。
2.2.3　计算
　　
　　式中：V2—滴定试样时所需标准酸溶液体积，mL；V1—滴定空白时所需标准酸溶液体积，mL；N—盐酸标准溶液当量浓度；W—样品重量，g；0.0140—与1.00 mL盐酸标准液(1.000 mol/L)相当的氮的克数；6.25—氮换算成蛋白质的系数。
2.3　总磷的测定
2.3.1　试剂配制　钒钼酸铵显色剂：称取偏钒酸铵1.25 g，加硝酸250 mL，另取钼酸铵25 g，加蒸馏水400 mL溶解，冷却后将此溶液倒入上述溶液，加水定容至1000 mL贮于棕色瓶中，若生成沉淀，则不能继续使用。磷标准溶液：称取KH2PO4(105 ℃烘干2 h，干燥器中冷却)0.2195 g，溶于水，定量转入1000 mL容量瓶中，加硝酸3 mL，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，配成50 μg/mL的磷标准溶液。
2.3.2　测定步骤
2.3.2.1　标准曲线绘制或求回归方程式：准确吸取0、1.0、2.0、5.0、10.0、15.0 mL磷标准溶液于50 mL容量瓶中，各加钒钼酸铵显色剂10 mL，用水稀释至刻度，摇匀，常温下放置10 min以上，以0溶液为参比，用10 mm比色池在420 nm波长下，使用分光光度计测定各溶液的吸光度。以磷含量为横坐标、吸光度为纵坐标绘制标准曲线或求出回归方程式。
2.3.2.2　试样的测定：准确吸取2～10 mL样品消化液(含磷量50～750 μg)于50 mL容量瓶中，加入钒钼酸铵显色剂10 mL，以空白消化液作参比，按2.3.2.1的方法显色和比色测定，测得试样分解液的吸光度，用标准曲线查得或用回归方程式求得试样分解液的含磷量。
2.3.3　计算
　　
　　式中：m—试样的质量，g；X—由标准曲线查得或用回归方程式求得试样分解液的磷含量，μg；V—移取试样分解液体积，mL。
2.4　钙的测定
2.4.1　试剂配制　盐酸羟胺：分析纯。盐酸：分析纯，1+3(V1+V2)。氢氧化钾溶液：分析纯，200 g/L。三乙醇胺水溶液：分析纯，1+1(V1+V2)。乙二胺水溶液：分析纯，1+1(V1+V2)。
　　淀粉溶液(10 g/L)：称取1 g可溶性淀粉于200 mL烧杯中，加5 mL水润湿，加95 mL沸水搅匀，煮沸，冷却备用(现配现用)。孔雀石绿水溶液1 g/L。钙黄绿素—甲基百里香酚蓝指示剂：0.1 g钙黄绿素与0.13 g甲基百里香酚蓝、5 g氯化钾研细混匀，贮存于磨口瓶中备用。钙标准溶液(0.0010 g/mL)：称取于105～110 ℃干燥至恒重的基准碳酸钙2.497 g，溶于40 mL盐酸中，加热赶除CO2，冷却，用水转移至1000 mL容量瓶中，稀释至刻度。
　　EDTA标准滴定溶液：称取3.8 g EDTA于200 mL烧杯中，加200 mL水，加热溶解冷却后转至1000 mL容量瓶中，用水稀释至刻度。EDTA标准滴定溶液的标定：准确吸取钙标准溶液10.0 mL，按试样测定法进行滴定。EDTA标准滴定溶液对钙的滴定度按下式计算：
　　
　　式中：T—EDTA标准滴定溶液对钙的滴定度，g/mL；C—钙标准溶液的浓度，g/mL；V—所取钙标准溶液体积，mL；V0—EDTA标准滴定溶液用量，mL。
2.4.2　测定步骤　准确移取样品消化液5～25 mL(含钙量2～25 mg)，加水50 mL、淀粉溶液10 mL、三乙醇胺2 mL、乙二胺1 mL、1滴孔雀石绿，滴加氢氧化钾溶液至无色，再过量10 mL，加0.1 g盐酸羟胺(每加一种试剂都须摇匀)、加钙黄绿素少许，在黑色背景下立即用EDTA标准滴定溶液滴定至绿色荧光消失呈紫红色为滴定终点。
2.4.3　计算
　　
　　式中：T-EDTA标准滴定液对钙的滴定度，g/mL；V1—分取试样分解液的体积，mL；V2—实际消耗EDTA标准滴定溶液体积，mL；m—试样质量，g。
3.3　本方法操作与国标法相比，只是样品预处理与国标法不同，其他与国标法相同。