油脂TBA测定

xinjing · 发表于 2007-12-11 10:11:34

油脂TBA值的测定方法
1.
原理
油脂受到光、热、空气中氧的作用，发生酸败反应，分解出醛、酮之类的化合物。丙二醛就是分解产物的一种，它能与TBA（硫代巴比妥酸）作用生成粉红色化合物，在532nm波长处有吸收高峰，利用此性质即能测出丙二醛含量，从而推导出油脂酸败的程度。

2.
试剂
(1) TBA水溶液：准确称取TBA0.288g溶于水中，并稀释至100ml（如TBA不易溶解，可加热至全溶澄清，然后稀释至100ml），相当于0.02M；
(2)
三氯乙酸混合液：准确称取三氯乙酸（分析纯）7.5g及0.1gEDTA，用水溶解，稀释至100ml；
(3)
氯仿（分析纯）；
(4)
丙二醛标准溶液：称取0.315g1，1，3，3-四乙氧基丙烷，溶解后稀释至1000ml，此溶液每ml相当于丙二醛100μg，置于冰箱内保存。准确吸取10ml，稀释至100ml，此溶液每ml相当于丙二醛10μg，备用。
3.
操作步骤
（1）标准曲线的绘制
准确吸取每ml相当于丙二醛10μg的标准溶液0.0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6ml置于纳氏比色管中，加水至总体积为5ml，加入5mlTBA溶液，然后按样品测定步骤进行，测得光密度绘制标准曲线。
（2）样品制备与检测
准确称取均匀的豆油15g，置于100ml有盖三角瓶内，加入25ml三氯乙酸混合液，振摇半小时（保持油脂融溶状态，如冷结即在70℃水浴上略微加热使之融化后继续振摇）用双层滤纸过滤，除去油脂。滤液重复用双层滤纸过滤一次。
准确移取上述滤液10ml置于25ml比色管内，加入10mlTBA溶液，混匀，加塞，置于90℃水浴内保温40min，取出，冷却1h，移入小试管内，离心5min，上清液倾入25ml纳氏比色管中，加入5ml氯仿，摇匀，静置，分层，吸出上清液于532nm波长处，用2cm比色皿比色（同时作空白试验）。
4.
计算
      光密度 (A532/kg)=
      丙二醛含量（mg/Kg）=
   式中C—从标准曲线查得丙二醛的相应浓度(ug/ml)

m ─油脂质量（g）

V1—滤液体积（ml）

V2—TBA（硫代巴比妥酸水溶液体积（ml）

V—三氯乙酸混合液体积（ml）
5.
备注
根据不同种类的油脂检测稍有不同：
膨化大豆、鱼粉、虾料类称取10克、全价料、豆粕称取15克，然后提取的粗脂肪按上述步骤用适当宽度的比色皿检测；
猪油、鱼油称取10克, 豆油称取15克, 用2cm比色皿检测
样品浓度过高时，可以用水稀释后测定，测定值再乘以相应的稀释倍数