求助猪自家抗体血清的制备和使用方法

草哥

本人前阵子场内猪发生了蓝耳病,有些猪耐受过了就成了僵猪,继续饲养那些僵猪,已经没什么价值了,想将那些僵猪杀了,来制备猪自家抗体血清,然后再用来治疗病猪,可是自已不知道该怎么做,所以想请教在场的高手指点,谢谢

lionpig

我讲讲，参考一下 首先你确证是prrs么？？prrs来说血清当然是会有效的，如果不是或者有其他病的继发感染，这样做的风险很高。 1.取血，将猪冲洗干净固定于“X”型的保定架上，仰卧保定，将猪尾一头垫高，用碘酒清洗左侧胸前口，用酒精脱碘，待酒精挥发后，用准备好（指消毒、烘干）的约30cm长，直径约1cm的空心铜管（一端为尖，一端平，平的一端套硅橡胶管），经消毒的胸前口捅入猪的心脏（不要刺太深防止完全穿透心脏），放血。 2.接血，消毒烘干好的容器（如果是离心法收集就用大的离心瓶，如果是自然析出可以用500ml的注射用生理盐水瓶），将胶管的一头贴住瓶壁，血顺瓶壁留下，装约400-500ml（离心瓶依照仪器要求）。 3.取血清，离心法：400×4离心机按一般血液离心要求进行即可，自然析出的封好瓶口，冷却到室温，放入4度冰箱过夜，异日取出，取血清，另外装瓶、封口。 4.灭活，56度温箱中1.5小时（保证全瓶血清维持在56度时间至少1小时），自然冷却，加入抗生素（一般是双抗，具体剂量还要看各厂的实际情况），将血清冷冻保存（随解冻随用，大约可以保存12周）。 5.血清的无菌检查，血清通过接种琼脂平板，温箱培养看是否有菌落生长，另外（双抗的量加多少可以通过培养情况来确定） 6.安全性实验，通过培养无细菌生长的血清注射小猪约10头（5日龄-10日龄）（腹腔注射），观察一周（每日量体温，观察是否发病）如发病务必确诊发病原因。

草哥

谢谢楼上的朋友, 你讲得很详细,能否再说明一下,制备后,应该怎样注射在猪身上呢,是不是肌肉注射还是腹腔注射,而且是连续每天注射还是只注射一次呢?先谢了

吠声天外

PRRS的血液带毒期大约30－45天，而正常血清特异性抗体大约是在40-50天时最高。 如果没有持续感染，两个月以后，效价就会降低。那时的使用价值就会大打折扣。除了二楼老师的方法，建议对血清进行钴－60辐照消毒。 使用时，每只猪肌肉注射就可以。一般注射一次就有延缓发病的效果，间隔5天再注射一次，效果更好一些。 另外，按照我的经验，在4摄氏度的条件下，出的血清量会相对少些，但效价一般不会因冷冻而减少。 以上仅供参考

lionpig

关于什么时候取血的问题，我个人认为在发病后3-6个月比较合适，虽然这个时候抗体水平不一定最高，但是IgG、IgM之类的中和抗体水平是不低的（prrs有3-6个月的排毒期，这个也是通过部分空群来实现净化的一个理论基础），关于到使用方面我的看法和经验是哺乳、保育猪在满足操作条件的基础上还是腹腔注射比较好，至于中猪可以肌肉注射，大猪基本上没有必要使用，母猪如果已经是阳性场的，还是用弱毒苗吧。 至于钴-60辐照灭菌、应用范围受到很多条件上的限制，在基层很难开展。 个人浅见大家赐教

ren1001

:)3:学习了