【求助】用EDTA法测定饲料中的钙，滴定时颜色没有变化。

MHHY

加了孔雀石绿后没有颜色变化，是不是试剂有问题啊？还有，我测定出的结果偏高，跟试剂过期有关吗，因为三乙醇胺发黄了。

极限天空

加孔雀石绿不变化可能和不同料的溶液有关系。以前做钙的时候，一起加的指示剂，有的变色，有的不变色。但平行样是一致的。KOH还是要加的。对结果没什么影响。

回眸千度

你所说的钙红指示剂已经不用·啦，

443479213

加15MLKOH基本就够了，还有改用钙黄绿好判断重点

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我们用的是这种方法，参考下吧
钙 的 测 定 方 法
(GB/T6436—2002)
一、适用范围
本标准适用于饲料原料和饲料产品。本方法钙的最低检测限为150mg/kg(取试样1g时)。
二、原理
将试样中有机物破坏，钙变成溶于水的离子，用三乙醇胺、乙二胺、盐酸羟胺和淀粉消除干扰离子的影响，在碱性溶液中以钙黄绿素为指示剂，用乙二胺四乙酸二钠标准溶液络合滴定钙，可快速测定钙的含量。
三、试剂和溶液：
1.        盐酸羟胺
2.        三乙醇胺：1+1
3.        乙二胺：1+1
4.        盐酸水溶液：1+3
5.        氢氧化钾（200g/L）：称取20g氢氧化钾溶于100mL水中。
6.        淀粉溶液（10 g/L）：称取1g可溶性淀粉入200mL烧杯中，加5mL水润湿，加95mL沸水搅拌，煮沸，冷却备用（现用现配）
7.        孔雀石绿水溶液（1 g/L）
8.        钙黄绿素—甲基百里香酚蓝指示剂：0.10g钙黄绿素与0.10g甲基麝香草酚蓝与0.03g百里香酚酞、5g氯化钾研细混匀，贮于磨口瓶中备用。
9.        钙标准液（0.0010g/mL）：称取2.497g于105℃～110℃干燥3h的基准碳酸钙,溶于40mL盐酸(4)中,加热赶除二氧化碳，冷却，用水移至1000mL容量瓶中，稀释至刻度。
10.        乙二胺四乙酸二钠（EDTA）标准滴定溶液：称取3.8gEDTA入200mL烧杯中,加200mL水，加热溶解冷却后转至1000mL容量瓶中，用水稀释至刻度。
11.        EDTA标准滴定溶液的标定：准确吸取钙标准溶液（9）10.0mL按试样测定方法进行滴定.
12.        EDTA滴定溶液对钙的滴定度按下式计算：
T＝        ρ×V        ×100%
        V0       
式中：T—EDTA标准滴定溶液对钙的滴定度，g/mL；
     ρ—钙标准溶液的质量浓度，g/mL；
     V—所取钙标准溶液的体积，mL
     V0—EDTA标准滴定溶液的消耗体积，mL
     所得结果应表示至0.0001 g/mL
四、仪器和设备
1．高速粉碎机，粉碎时间1分钟。
2．分析筛  孔径0.25mm（60目）。
3．分析天平  感量0.0001g
4．高温炉：电加热，可控制温度在550±20℃
5．坩埚：瓷质。
6．容量瓶：100mL
7．滴定管：酸式，25 mL或50 mL
8．玻璃漏斗：直径6cm
9．移液管：5，10，15 mL
五、试样的选取和制备
选取具有代表性的试样，其原始样量应在2Kg，用四分法缩减至250g，粉碎过40目筛，混匀，装入样品瓶中，密闭，保存备用。
六、分析步骤
1．试样的分解
称取试样1.7g～2.5g于坩埚中，精确至0.0002g，在电炉上小心炭化，再放入高温炉于550℃下灼烧3h（或测定粗灰分后连续进行），在盛灰坩埚中加入盐酸溶液10mL，和浓硝酸数滴，小心煮沸，将此溶液转入100mL容量瓶中，冷却至室温，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，为试样分解液。
2．        测定
    准确移取试样分解液5mL～10mL（含钙量2mg～25mg）(全价料取5ml，浓缩料、鱼粉、磷酸氢钙、石粉10ml)。加淀粉溶液10mL、三乙醇胺2mL、乙二胺1mL、1滴孔雀石绿，滴加氢氧化钾溶液至无色，再过量10mL，加0.1g盐酸羟胺（每加一种试剂都须摇匀），加钙黄绿素少许，在黑色背景下立即用EDTA标准滴定溶液滴定至绿色荧光消失呈现紫红色为滴定终点。同时做空白实验。      
七、计算：
含钙量（%）按下式计算；
X（%）＝        T×V2×V0        ×100
        m×V1       
式中：X——以质量分数表示的钙含量，%
T——EDTA标准滴定溶液对钙的滴定度，g/mL
V0——试样分解液的总体积，mL
V1——分取试样分解液的体积，mL
V2——试样实际消耗EDTA标准滴定溶液的体积，mL
m——试样的质量
八、重复性
1．每个试样取两个平行样进行测定，以其算术平均值为结果。所得结果应表示至小数点后两位
2．含钙量在10%以上时，允许相对偏差为2%。
3．含钙量在5%～10%时，允许相对偏差为3%。
4．含钙量在1%～5%时，允许相对偏差为5%。
5．含钙量在1%以下时，允许相对偏差为10%。
九、主要分析步骤及注意事项：
称样→灼烧灰化→加酸消煮→转移定容→移样液→加入试剂→滴定
1.        称样准确，根据样品含钙量称取适量样品。
2.        在高温炉中灰化完全。
3.        加盐酸和硝酸时须小心加入，不能溅出，否则结果低。
4.        煮沸时应防止小心煮，防止溢出，溢出结果低。
5.        转移至容量瓶时应无损失转移。否则结果低。
6.        根据样品含钙量移取样品分解液。
7.        加入淀粉、三乙醇胺等试剂时需按标准规定的顺序依次加入，顺序错误滴定终点模糊，或没有终点，且每加一种试剂需摇匀。
8.        钙黄绿素指示剂须适量加入，指示剂太多颜色深，终点不好看，易滴定过量，导致结果高。
9.        加完指示剂后须立即在黑色背景下进行滴定，放置时间长，掩蔽剂的掩蔽作用消失终点模糊不清，难以判断终点。
10.        终点须敏锐判断，否则结果高。
11.        平行样相差在0.1以内.

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钙 的 测 定 方 法
(GB/T6436—2002)
一、适用范围
本标准适用于饲料原料和饲料产品。本方法钙的最低检测限为150mg/kg(取试样1g时)。
二、原理
将试样中有机物破坏，钙变成溶于水的离子，用三乙醇胺、乙二胺、盐酸羟胺和淀粉消除干扰离子的影响，在碱性溶液中以钙黄绿素为指示剂，用乙二胺四乙酸二钠标准溶液络合滴定钙，可快速测定钙的含量。
三、试剂和溶液：
1.        盐酸羟胺
2.        三乙醇胺：1+1
3.        乙二胺：1+1
4.        盐酸水溶液：1+3
5.        氢氧化钾（200g/L）：称取20g氢氧化钾溶于100mL水中。
6.        淀粉溶液（10 g/L）：称取1g可溶性淀粉入200mL烧杯中，加5mL水润湿，加95mL沸水搅拌，煮沸，冷却备用（现用现配）
7.        孔雀石绿水溶液（1 g/L）
8.        钙黄绿素—甲基百里香酚蓝指示剂：0.10g钙黄绿素与0.10g甲基麝香草酚蓝与0.03g百里香酚酞、5g氯化钾研细混匀，贮于磨口瓶中备用。
9.        钙标准液（0.0010g/mL）：称取2.497g于105℃～110℃干燥3h的基准碳酸钙,溶于40mL盐酸(4)中,加热赶除二氧化碳，冷却，用水移至1000mL容量瓶中，稀释至刻度。
10.        乙二胺四乙酸二钠（EDTA）标准滴定溶液：称取3.8gEDTA入200mL烧杯中,加200mL水，加热溶解冷却后转至1000mL容量瓶中，用水稀释至刻度。
11.        EDTA标准滴定溶液的标定：准确吸取钙标准溶液（9）10.0mL按试样测定方法进行滴定.
12.        EDTA滴定溶液对钙的滴定度按下式计算：
T＝        ρ×V        ×100%
        V0       
式中：T—EDTA标准滴定溶液对钙的滴定度，g/mL；
     ρ—钙标准溶液的质量浓度，g/mL；
     V—所取钙标准溶液的体积，mL
     V0—EDTA标准滴定溶液的消耗体积，mL
     所得结果应表示至0.0001 g/mL
四、仪器和设备
1．高速粉碎机，粉碎时间1分钟。
2．分析筛  孔径0.25mm（60目）。
3．分析天平  感量0.0001g
4．高温炉：电加热，可控制温度在550±20℃
5．坩埚：瓷质。
6．容量瓶：100mL
7．滴定管：酸式，25 mL或50 mL
8．玻璃漏斗：直径6cm
9．移液管：5，10，15 mL
五、试样的选取和制备
选取具有代表性的试样，其原始样量应在2Kg，用四分法缩减至250g，粉碎过40目筛，混匀，装入样品瓶中，密闭，保存备用。
六、分析步骤
1．试样的分解
称取试样1.7g～2.5g于坩埚中，精确至0.0002g，在电炉上小心炭化，再放入高温炉于550℃下灼烧3h（或测定粗灰分后连续进行），在盛灰坩埚中加入盐酸溶液10mL，和浓硝酸数滴，小心煮沸，将此溶液转入100mL容量瓶中，冷却至室温，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，为试样分解液。
2．        测定
    准确移取试样分解液5mL～10mL（含钙量2mg～25mg）(全价料取5ml，浓缩料、鱼粉、磷酸氢钙、石粉10ml)。加淀粉溶液10mL、三乙醇胺2mL、乙二胺1mL、1滴孔雀石绿，滴加氢氧化钾溶液至无色，再过量10mL，加0.1g盐酸羟胺（每加一种试剂都须摇匀），加钙黄绿素少许，在黑色背景下立即用EDTA标准滴定溶液滴定至绿色荧光消失呈现紫红色为滴定终点。同时做空白实验。      
七、计算：
含钙量（%）按下式计算；
X（%）＝        T×V2×V0        ×100
        m×V1       
式中：X——以质量分数表示的钙含量，%
T——EDTA标准滴定溶液对钙的滴定度，g/mL
V0——试样分解液的总体积，mL
V1——分取试样分解液的体积，mL
V2——试样实际消耗EDTA标准滴定溶液的体积，mL
m——试样的质量
八、重复性
1．每个试样取两个平行样进行测定，以其算术平均值为结果。所得结果应表示至小数点后两位
2．含钙量在10%以上时，允许相对偏差为2%。
3．含钙量在5%～10%时，允许相对偏差为3%。
4．含钙量在1%～5%时，允许相对偏差为5%。
5．含钙量在1%以下时，允许相对偏差为10%。
九、主要分析步骤及注意事项：
称样→灼烧灰化→加酸消煮→转移定容→移样液→加入试剂→滴定
1.        称样准确，根据样品含钙量称取适量样品。
2.        在高温炉中灰化完全。
3.        加盐酸和硝酸时须小心加入，不能溅出，否则结果低。
4.        煮沸时应防止小心煮，防止溢出，溢出结果低。
5.        转移至容量瓶时应无损失转移。否则结果低。
6.        根据样品含钙量移取样品分解液。
7.        加入淀粉、三乙醇胺等试剂时需按标准规定的顺序依次加入，顺序错误滴定终点模糊，或没有终点，且每加一种试剂需摇匀。
8.        钙黄绿素指示剂须适量加入，指示剂太多颜色深，终点不好看，易滴定过量，导致结果高。
9.        加完指示剂后须立即在黑色背景下进行滴定，放置时间长，掩蔽剂的掩蔽作用消失终点模糊不清，难以判断终点。
10.        终点须敏锐判断，否则结果高。
11.        平行样相差在0.1以内.

梦云凌

xiaozeng987 发表于 2008-8-4 09:17
钙黄绿素——甲基百里香草酚蓝指示剂：
0.1g钙黄绿素与0.13g甲基百里香酚蓝，5gKCl研细混匀，贮存于磨口瓶 ...

你好，请问钙黄绿素配制时所说的研细混匀是用研钵呢还是用粉碎机？

love瑞

梦云凌 发表于 2012-5-29 08:22
你好，请问钙黄绿素配制时所说的研细混匀是用研钵呢还是用粉碎机？

当然是用研钵了

约定姐姐

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