饲料中多氯联苯的测定 气相色谱法

　　1  范围

　　本标准规定了以配有电子捕获检测器的气相色谱仪测定饲料中多氯联苯(PCBs)的方法。

　　本标准适用于配合饲料、添加剂预混合饲料及鱼粉中多氯联苯的测定。方法的最小检出浓度为O．01μg／g。

　　2  规范性引用文件

　　下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误内容)或修订版均不适用本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。

　　GB／T 6682  分析实验室用水规格和试验方法

　　GB／T 14699．1  饲料采样

　　3  原理

　　试样用正己烷提取，提取液经浓硫酸磺化，硅胶柱净化，以配有电子捕获检测器的气相色谱仪测定。

　　4  试剂和材料

　　所用水符合GB／T 6682中三级水。

　　4．1  正己烷：分析纯，于全玻璃器中重蒸。

　　4．2  异辛烷：优级纯。

　　4．3  浓硫酸：优级纯。

　　4．4  无水硫酸钠：优级纯，550℃高温灼烧4 h，冷却后干燥器中保存。

　　4．5  硅胶：分析纯，粒度0．075 mm～0．150 mm(100目～200目)，130℃烘16 h，取出后于干燥器中保存。

　　4．6  多氯联苯标准溶液：取浓度为187．7μg／mL。的多氯联苯．Aroclorl 242母液2．0 mL。用异辛烷定容至50 mL，配成7．5μg／mL。的工作液，再取该工作液1 mL，2．5 mL，5 mL。，分别稀释至25 mL，配成0．3Oμg／mL，0．75μg／mL。，1．50μg／mL。的标准系列溶液备用。置于4℃冰箱，闭光保存。有效期6个月。

　　4．7  20 g／L硫酸钠溶液：称取20 g硫酸钠，用水溶解后定容到1 L。容量瓶。

　　5  仪器

　　5．1  气相色谱仪：配有电子捕获检测器。

　　5．2全玻璃重蒸馏装置。

　　5．3索式提取器。

　　5．4  分液漏斗：500 mL。

　　5．5  旋转蒸发器。

　　5．6  层析柱：内径1 cm，高10 cm，上部有桶形漏斗，下部有活塞控制流速。

　　层析柱A：装入10 g无水硫酸钠轻轻敲实。

　　层析柱B：先装入1 cm高的无水硫酸钠，再将3 g硅胶放人小烧杯中，加入20 mL正己烷，边用玻璃棒搅拌边倒人层析柱中，装实后，上层装入1 cm高的无水硫酸钠。

　　6  试样制备

　　按GB／T 14699·1规定的方法采样，选取有代表性的饲料样品至少5 00 g，四分法缩减至100 g，磨碎，通过0．45 mm孔筛，混匀，装入密闭容器中，避光低温保存备用。

　　7  分析步骤

　　7．1  提取

　　称取试样约5 g，精确至0．001 g，加入无水硫酸钠(4．4)10 g，用滤纸包好置于索式提取器中，加入正乙烷(4·1)100 mL，提取10 h(回流速度10次／h～12次／h)，冷却后，提取液转入分液漏斗中。

　　7．2  净化

　　7．2．1  磺化

　　于提取液中加入浓硫酸(4．3)(提取液和浓硫酸的比例是10：1，以体积计)，在分液漏斗中轻轻振摇，静置分层，弃去酸层。再按上述操作重复1次～2次，至酸液呈无色或淡黄色，然后加入硫酸钠溶液(4·7)100 mL，振摇，静置分层，弃去水层。重复上述操作一次。将正己烷液缓慢通过层析柱A(5．6)，再用正己烷洗涤分液漏斗和层析柱A。

　　7.2．2硅胶柱净化

　　收集上述正己烷液于旋转蒸发器浓缩近干，用5 mL正己烷(4．1)溶解，置于层析柱B，用40 mL正己烷(4·1)洗脱，控制流速为30滴／min，收集正己烷于旋转蒸发器，浓缩近干，用正己烷(4．1)定容至2．0 mL，待气相色谱测定。

　　注：装柱、上样及洗脱过程中，始终保持液面不低于硅胶层上平面。

　　7．3  测定

　　7．3．1  色谱条件

　　色谱柱：DB-1，柱长30cm，内径0．25 mm，膜厚0．25μm，或同等极性同等规格柱；

　　柱温：100℃(2min)

　　进样口温度：280℃

　　检测器温度：300℃；

　　进样方式：不分流进样；

　　载气：氮气(纯度≥99．99％)，1 mL／min。

　　补充气：氮气(纯度≥99．99％)，50 mL／min。

　　7．3．2  定性定量方法

　　定性：被测样品色谱图与标准品Aroclorl242色谱图进行峰形拟合，保留时间法或相对保留时间法(相对其中一个特定氯联苯)定性。

　　定量：分别计算标准溶液及样品的特征识别峰峰面积之和，外标法计算样品多氯联苯的残留量。

　　注：特征识别峰的选择，选取5个～10个分离较好，容易识别，且避开DDE等杂质干扰的色谱峰。

　　7．4  空白试验

　　除不加试样外，按上述条件及步骤进行空白实验。

　　7．5  结果的计算和表述

　　试样中多氯联苯残留量按式(1)计算：

　　式中：

　　X——试样中多氯联苯残留量，单位为毫克每千克(mg／kg)；

　　A——试样中特征识别峰的峰面积之和；

　　A标——标准溶液特征识别峰的峰面积之和；

　　c——多氯联苯标准溶液的浓度，单位为微克每毫升(μg／mL)；

　　V——试样溶液定容体积，单位为毫升(mL)；

　　m——试样称样量，单位为克(g)。

　　注：空白如有干扰，计算需扣除空白值。

　　多氯联苯的残留量以特征识别峰的含量(mg／kg)表示；表示到小数点后3位。

　　8  重复性

　　在同一实验室，由同一操作人员使用同一仪器完成的两个平行测定结果的相对偏差不大于1 5％。

　　注：方法干扰可能由溶剂、试剂、玻璃器皿以及其他样品处理用具的沾污引起。为减少干扰，使用高纯试剂或重蒸溶剂，仔细清洗玻璃器皿，洗涤剂洗涤后，用自来水和蒸馏水冲洗，再用丙酮或正己烷冲洗。不使用塑料制品以减少酞酸酯对电子捕获检测器的干扰。农药DDE与PCBs性质相近，也可能会产生干扰，避开其出峰位置选择特征识别峰。