简介:

为研制安全有效的PRRSV、PCV2基因工程疫苗，本研究采用RT-PCR方 法扩增了PRRSV主要免疫原性基因ORF3、ORF5。在此基础上构建了四个含 有PRRSV主要结构蛋白基因ORF5、ORF3和猪IL18基因的重组核酸疫苗质粒 pVAX1-ORF5、pVIR-IL18-ORF5、pVAX1-ORF5-ORF3、pVIR-IL18-ORF5 -ORF3和一个重组鸡痘病毒rFPV-IL18-ORF5-ORF3。并构建了两个共表达 PRRSV和PCV2免疫原性基因的二联核酸疫苗pIRES-ORF2-ORF5、pIRES- ORF2-ORF5-ORF3和两个二联重组鸡痘病毒rFPV-ORF2-ORF5、rFPV-ORF2- ORF5-ORF3。Western-blotting、IFA、RT-PCR等检测结果表明，核酸疫苗和重 组鸡痘病毒中的目的基因在真核细胞中得到正确表达。小鼠免疫试验结果表明， 所构建的核酸疫苗和重组鸡痘病毒均能有效刺小鼠产生抗PRRSV和PCV2特 异性体液免疫和细胞免疫反应。用PRRSV核酸疫苗pVIR-IL18-ORF5-ORF3和 重组鸡痘病毒rFPV-IL18-ORF5-ORF3以及PRRSV-PCV2二联核酸疫苗 pIRES-ORF2-ORF5-ORF3和重组鸡痘病毒rFPV-ORF2-ORF5-ORF3联合免疫 猪，结果表明，核酸疫苗和重组鸡痘病毒均能诱导猪产生特异性的体液免疫和 细胞免疫反应，其中以核酸疫苗首免，重组鸡痘病毒追加免疫效果最佳。