荷兰赛迪测迪CEDI/瑞士Prionics 牛羊布氏杆菌病毒抗体ELISA检测试剂盒

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布氏杆菌毒病抗体检测ELISA试剂盒

Ceditest Priocheck BRUCELLA AB
布氏杆菌毒病抗体检测ELISA试剂盒

简介

一些年来，荷兰动物科学与健康研究所已经建立了控制和消除动物疾病的专门技术和知识体系。依靠对病因病理的基础性研究，该组织为全球专门的实验室和兽医服务机构提供了病毒学、细菌学、寄生虫学和免疫学科研工具。

布氏菌病在世界各地均有发生，是一种人畜共患病，病原为布氏杆菌（革兰氏阴性菌），这类细菌包含6种：牛B流产型，羊B. melitensis (3 biovars), 猪B. suis (5 biovars), B. ovis, 狗B. canis, B. neotomae and B. maris. 牛是B流产型主要的宿主，，绵羊和山羊是B. melitensis的主要宿主。原则上讲，布氏杆菌不同亚型感染动物，临场症状有可比性，且都是繁殖障碍。例如，母畜的流产和不孕公畜的睾丸炎和附睾炎。

人类感染布氏杆菌的症状是波浪热，这对农民、实验室工作人员和屠宰工作人员来说是相当危险的。特别是B. melitensis对人类有高度的致病性，是世界上人畜共患病最严重的病原之一。被污染的山羊奶酪已经被频繁的报道说是感染原。

现在已经发展了一些检测布氏杆菌的血清学方法，胶合测试，补体反应和ELISA’s是应用比较广泛的确认方法。所有检测抗体都是针对滑型LPS O链的。无论使用那种检测方法，都应该与注意革兰氏阳性菌的交叉反应，如Francisella tularensis, Campylobacter, Salmonella, Pasteurella, Yersinia enterocolitica 0:9, Escherichia coli O:117 and 0:156。

感染B流产型和B. melitensis后，会出现IgM抗体，紧跟着会出现IgG抗体（IgG1和IgG2）。本试剂盒就是检测血清和牛奶中的IgG1抗体，且是一个经过Bercovich et al（1990）修正的检测试剂盒，也符合欧盟64/432的指示标准。

试剂盒有所有检测是需要的试剂，可以检测440个样品或者220个重复的血清样品。

参考文献

(1) Bercovich, Z. and Taaijke, R. (1990) Enzyme Immunoassay using monoclonal antibodies for the detection of Brucella abortus antibodies in cow milk. J. Vet. Med. B 37, 735-759.

(2) OIE Manual of standards for Diagnostics Test and Vaccines, Fourth Edition, 2000.

应用

本试剂盒是检测牛、山羊、绵羊血清和牛奶样品中布氏杆菌的有效手段。是动物健康免疫程序中检测个体羊或牛布什杆菌抗体的决定性步骤。本试剂盒用来监督、确认整个群体是否有布什杆菌病的发生。

检测原理

本试剂盒是用间接ELISA检测感染牛、绵羊、山羊的布氏杆菌抗体。用超声波降解的非活性的布氏杆菌抗原包被酶标板，加血清和牛奶样品。测试样品中存在流产型和melitensis抗体，孵化后就会和抗原反应。加带有HRP的抗Ig的单克隆抗体酶标结合物，就会和抗原抗体结合物中的抗体反应。之后，加底物，如果检测样品中有特异性抗体出现，就会有颜色反应。

每板中应使用3个对照血清样品，分别为阳性、阴性、和一个弱阳性。这三个血清对照已经根据OIE规定的ELISA国际标准校对过了。样品的OD值应该减去空白的OD值，对比1是检测中最大的OD值，对比2应该是阴性的，pp<20%,对比3为弱阳性的，pp值应该20－45％。

一般评述

如果没有前面的注意事项，此说明书的一些内容很容易变化。但是此试剂盒自从公布之日起一直都是完整而精确的，所以对使用以上操作方法产生的结果负责。

试剂盒成分

1) 酶标板5块 5 test plates 
2) 浓缩酶标记物，1瓶 conjugate(concentrated) 
3) 阳性对照血清，1瓶 1 vial reference serum1(positive) 
4) 阴性对照血清，1瓶 1 vial reference serum2(negative) 
5) 弱阳性对照血清，1瓶1 vial reference serum(weak positive) 
6) 浓缩稀释缓冲液，1瓶 1 vial dilution buffer(concentrated) 
7) 底物液，1瓶（直接使用）1 vial chromogen /substrate (ready to use) 
8) 浓缩洗液，1瓶 1 vial washing fluid (concentrated) 
9) 终止液，1瓶（直接使用）1 vial stop solution(ready to use) 
10) 10个封口膜10 plate sealers