【笔记】猪瘟之诊断

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猪瘟之诊断

钟明华 研究员 台湾动物研究所

一、猪瘟及猪瘟病毒
　　猪瘟是高度传染性败血症，以全身性出血为主征，感染率与死亡率均高达95-100%。猪瘟只有一个血清型，猪和野猪是唯一的自然宿主，也是最重要的感染源。猪瘟感染猪及其分泌物排泄物为猪瘟主要传染源。口水、鼻液、眼屎、粪尿、精液等都有病毒。
　　猪瘟病毒为RNA病毒，有封套，其RNA具有感染力。病毒核酸基因全长12.3Kb。
二、猪瘟诊断流程：

临床症状
　　猪瘟发生初期，猪群内往往只有少数猪只呈现症状。感染猪最初呈现精神不振，食欲降低，行动迟钝，体温显著升高（通常在41℃左右）等现象，血液中白血球量亦随着体温上升而减少。病症早期，猪眼部因结膜炎而有大量分泌物，而后是眼睑完全黏着。
　　患病猪呈高热，畏寒。小猪喜聚集成堆，保育后期猪只，临床呈现消瘦，被毛粗乱，并推挤在一起。
　　肉眼病变，病猪皮肤潮红，皮下点状及斑状出血。
　　宏观病变，脾脏梗塞，肾脏结节，淋巴结皮下出血，胸腺萎缩，直肠、盲肠溃疡。
SPF猪人工感染猪瘟病毒试验：
　　临床症状，感染早期下痢，短暂发热；被毛粗乱；临床病理学：肝功能异常；
　　肉眼病变：淋巴结肿大，周边出血；肾脏出血；肝细胞肿大，苍白；肠粘膜潮红；心肌苍白。
　　组织病变，非化脓性脑膜炎；小肠粘膜充血、出血；肝细胞肿大变性；间质性肾炎；心肌炎。
实验室诊断
　　血液学检查：白细胞减少，病毒血症，抗体检测。
　　冷冻切片荧光抗体染色：扁桃体、脾脏、淋巴结、肠管、脑、皮肤、毛囊、舌头。
　　抗体监测：血清中和抗体检测，酶联免疫吸附实验。
　　病毒分离：初代仔猪睾丸细胞培养，猪肾细胞培养。
　　病毒鉴定：间接荧光标示抗体染色（IFA），间接过氧化氢酵素标示抗体染色（IPMA），RT-PCR，核酸测序及DNA晶片技术。
三、猪瘟病毒区别鉴定
　　最后钟研究员阐述了当前猪瘟病毒鉴定及诊断的主流技术为RT-PCR，但需要区分疫苗毒及野毒。如利用RT-PCR技术区别诊断LPC疫苗及猪瘟野毒。在猪瘟诊断中，需要注意一是：为了避免RT-PCR反应的误判，要设计敏感及特殊的引物，RT-PCR反应太过敏感，特异性不足的引物可与疫苗及野外毒株反应，造成混淆而误判；二是：避免形态学肉眼病理之误判，因为其他疾病有类似猪瘟之肉眼病灶。
　　另外谈到了利用基因晶片技术进行猪瘟的诊断，该技术可区分猪瘟疫苗毒，野毒。
　　当前猪瘟依然是危害我国养猪业的最重要的疫病之一，最近猪瘟疾病的发生呈现上升趋势，是规模化猪场优先防控的主要疾病之一。

　　当前猪场猪瘟的防控压力依然严峻，具有6大特点：流行范围广；散发流行；发病年龄小，成年猪带毒现象严重；非典型症状和繁殖障碍型猪瘟增多；混合感染严重；免疫失败现象严重等特点。那么，为了更好的防控猪瘟，精准、及时的实验室诊断尤为重要，主要采用RT-PCR检测技术诊断方法，但存在误判的风险，需要设计更加敏感的诊断方法（如脐带血、扁桃体检测技术），结合临床症状进行综合判断和分析。
　　关于猪瘟防控，最好的措施是实现猪瘟的净化。鉴于发达国家成功消灭猪瘟的方法，结合国内实际情况，因地制宜制定适合国内的猪瘟净化方案，再配合高通量、精准的猪瘟诊断技术（如脐带血、扁桃体检测技术），最终能够成功实现猪瘟的净化。