自家疫苗制作方法

李小鹏

一、    仪器

恒温干燥箱、组织捣碎机、高压蒸气灭菌器、天平、烧杯、漏斗、铁架台、手术刀、手术剪、镊子、止血钳、广口瓶

二、    原料与物品

甲醛、甘油、纱布、注射用生理盐水（无热源物质，以免注射时发生过敏反应，减少变态反应）、胶手套、自家病猪的内脏组织

三、
制作步骤

1              灭菌
将所需仪器、原料和物品进行高压灭菌。

2              取样
采取自家病猪的内脏器官和组织。一般原则：优先采取含毒量最高的组织或器官，肝—脾—肾—肺—淋巴结（整个采样过程要求无菌操作）。

3              去菌
用注射用生理盐水洗去样品表面的细菌。

4              剪碎
用手术刀、手术剪将样品剪碎，去除其中的结缔组织、血管等难以捣碎部分。

5              称重
用天平称量所剪碎的样品，并记录好其重量。

6              捣碎
用组织捣碎机将称量好的样品捣碎，呈肉汤样，要求越碎越好。

7              冻融
将捣碎好的样品置于冰箱内反复冻融三次，冻融过程中前4小时内，每隔20分钟摇匀一次，尽量使病毒释放出来。

8              过滤
冻融后完全溶解之后，用纱布过滤两次，先用四层纱布过滤一次，再用八层纱布过滤一次即可

9
稀释
用注射生理盐水溶液以1：5的比例将样品稀释。

10          灭活
在稀释好的样品中添加0.4%甲醛（灭活剂）和5~10%甘油（保护剂），再将其置于37℃的恒温干燥箱内灭活24~48小时，尽量使病毒全部被灭活，但又必须最大限度地保持其抗原性。

11          安全检测  用小白鼠进行免疫接种，观察其反应和行为，同时剖解观察其病理变化。

12          无菌检验  用肉汤或琼脂培养基培养，观察其是否有细菌生长。

13
分装

14       免疫接种

15          效力检验

四、  疫苗的使用说明

1
保存
2~8℃冷藏

2
保质期6个月

3
用法用量
使用前必须先充分摇匀，以2ML/头进行肌肉注射，于发病期前10~15天接种，也可用于紧急接种，一般免疫接种后10天左右产生免疫抗体。

唐朝2009

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