发酵豆粕的常规检测方法及指标

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发酵豆粕各项指标检测方法与标准
1、水份、粗蛋白、粗脂肪、粗纤维、灰份、钙和磷的分析方法全部采用国标法。
2、总有机酸测定采用氢氧化钠滴定的方法和乳酸测定采用气象色谱。
3、pH 的测定采用玻璃电极pHS-3C 型pH 计测定。
4、可溶蛋白的测定方法
5、小肽含量的测定
水份的测定
水份测定直接参见国标 测定完水分后的样品需要测定其中的总有机酸的含量，其数值为A，并计算有机酸的挥发量。 水份含量的计算时应当扣除这部分有机酸的挥发量，否则会出现水分超标现象。
总有机酸检测
试剂：NaOH 标准溶液（邻苯二甲酸氢钾标定），酚酞指示剂 仪器:磁力搅拌器 离心机
方法：
（1）取发酵后鲜样品15g 置于150ml 烧杯中加入溶于100ml 去离子水，在磁力搅拌器上浸提30min。
（2）取部分浸提样离心10min(3000r/min)。
（3）取上清液15ml, 加30ml 去离子水稀释（以消除底色的影响），加酚酞指示剂四滴，用0.1molNaOH 标准溶液滴定，并记录到终点消耗NaOH 体积。（终点到溶液呈现粉红）
计算 总有机酸（％）＝N(NaOH)×V(NaOH) ×0.09008/15×115/15g
N(NaOH):NaOH 标准溶液的浓度； V(NaOH) ：消耗NaOH 标准溶液体积； 0.09008：乳酸的毫克当量。
0.1mol 氢氧化钠的配制与标定
1、配制：称取9.6g 氢氧化钠，溶于100ml 水中，摇匀，注入聚乙烯容器中，密闭放置至溶液清亮。用塑料管虹吸5ml 的上清液，注入2000ml 无二氧化碳水中(将去离子水煮沸5 分后冷却)，摇匀。
2、标定 称取0.67g 于105~110℃烘至恒重的基准的邻苯二甲酸氢钾，准确至0.0001g，溶于50ml 的无二氧化碳水中，加4 滴酚酞指示剂（0.1％），用配制好的氢氧化钠溶液滴定至溶液呈粉红色，同时作空白试验。
3、计算 氢氧化钠标准溶液的浓度按下式
计算 c（NaOH）=m/（V1-V2）×0.2042
式中 c（NaOH）——氢氧化钠标准溶液之物质的量的浓度，mol/l；
V1——滴定用邻苯二甲酸氢钾之用量，ml；
V0——空白试验氢氧化钠溶液之用量，ml；
m——邻苯二甲氢钾之质量，g；
• 0.2042——与1.00ml 氢氧化钠标准液[c（NaOH）=1.000mol/l]相当的以克表示的邻苯二甲氢钾之用量。
0.1％酚酞指示剂的配制：称取1.000 克酚酞，溶解与100ml95％的试剂酒精中，混匀即得。
乳酸测定 称取样品10g 与50ml 的烧杯中，移取30ml 去离子水，在磁力搅拌器上搅拌30min，在 3000r/min 离心10min，取上清液利用气相色谱或液相色谱测定乳酸含量。
pH 的测定 称取样品10g 与50ml 的烧杯中，移取15ml 去离子水，搅拌30min，用 pHS-3C 型pH 计测定溶液的pH 值。 或者用精密pH 试纸测试。
可溶性蛋白的测定 根据AOCSBa11-65 测定蛋白质溶解指数的方法 称取20g 样品于300ml 的匀浆杯中、量取50ml 37＋1℃的去离子水于匀浆杯中，将匀浆杯放在37℃的水浴中，浸泡搅拌5min，在内切式组织匀浆机上匀浆10min，从匀浆杯中取出浆液移入600ml烧杯中，待浆液分层后，移出40ml上清液注入50ml离心管中，并在2700r/min 的转速下离心10min，移取15ml 上清液于凯氏烧瓶中，测定上清液中蛋白质含量和样品总蛋白含量，计算溶解可溶性蛋白质的数量。
小肽含量测定方法 三氯乙酸（TCA）法 三氯乙酸法的原理是利用大分子的蛋白质在TCA 溶液中沉淀，除去酸不溶蛋白质，然后测定酸溶蛋白含量。国外大量资料表明在蛋白质酶水解的研究中测定水解度，通常在酶解液中加入TCA 溶液，是为水解的大分子蛋白质沉淀，而与小分子的酸溶蛋白成分，即肽类和 FAA 离开，测定酸溶蛋白占总蛋白的含量，求得水解 度，即酸溶蛋白占总蛋白的百分比。



粗蛋白≥50％ 小肽（1000d 以下）≥10％ 乳酸≥3.5％ 水分≤10％ 钙 0.5－0.54％ 总磷≥0.74％ /gm 益生菌≥20 亿/克 蛋白酶≥150 粗脂肪≤5.0％ 粗纤维≤3.0％ 无氮浸出物≤28％ 粗灰分≤6.0％ 猪消化能（kcal/kg）3980 猪代谢能（kcal/kg）3600 猪净能（kcal/kg）2320 禽代谢能（kcal/kg）2570 鱼消化能（kcal/kg）3200 奶牛净能（kcal/kg）1090 项目 含量 天门冬氨酸Asp 5.42% 赖氨酸Lys 3.03% 蛋氨酸Met 0.65% 苏氨酸Thr 2.05% 精氨酸Arg 3.50% 甘氨酸Gly 2.25% 丝氨酸Ser 2.43% 异亮氨酸Ile 2.21% 苯丙氨酸Phe 2.37% 缬氨酸Val 2.36% 组氨酸His 1.24% 谷氨酸Glu 9.84% 丙氨酸Ala 2.30% 脯氨酸Pro 2.04% 色氨酸Trp 0.50% 亮氨酸Leu 3.76%
                                    发酵豆粕与普通豆粕、膨化豆粕比较
项目/种类                    豆粕             膨化大豆                  发酵豆粕
工艺                       压榨/浸提         热加工                     发酵、酶解
粗蛋白%                                  44                          3 6 5                                0
粗纤维%                                 6-7                         5                                        5
粗灰分%                                 6.5                         5                                      6
酸碱度                         7.0                         7.0                          4   .0-4.8
细胞壁破裂                      没有破壁            部分破壁             100%破壁
小分子蛋白含量%                         11.0                        9.0                           2 2
胰蛋白酶抑制剂 5-10mg/Kg 5-20mg/Kg 1mg/Kg
脲酶mg/Kg 0.4 / <0.02
棉子糖水苏四糖 12-15 9-12 <0.05
大豆球蛋白ppm 高 高 <10
半球蛋白ppm 高 高 <1
外源凝集素ppm 100-300 100-300 <1
气味 豆腥味 豆腥味 发酵香味
颗粒度 大颗粒 大颗粒 细粉
流散性 中等 不好 佳

kb1026

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yinchunqing1988

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ququ51

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airfate

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zqf823

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