鸭病毒性肝炎卵黄抗体生产工艺对其使用效果的影响

ZERO · 发表于 2010-3-28 16:10:39

鸭病毒性肝炎卵黄抗体生产工艺对其使用效果的影响

山东信得科技股份有限公司

家禽业务部李峰
262200

青岛研发中心赵风立 266061

肉鸭养殖经过10多年的快速发展，已经成为畜牧养殖中的重要板块，其年均增长率（约10%）远高于肉鸡，市场高峰期年出栏量更是超过了30亿只；但是相对于肉鸡，肉鸭科研乏力，经费投入不足，育种水平与国外相比仍有差距；营养及生理研究工作也刚刚起步，专用生物制品的开发速度以及疾病防控技术也跟不上产业的发展。简易的鸭舍、落后的设备、粗放的管理、传统的技术很难生产出高质量标准的鸭肉产品，农村规模化饲养户由于缺乏系统而全面的技术培训，生产过程中普遍存在着缺乏隔离、消毒、预防、治疗等综合防疫措施的全面落实，给鸭病毒性肝炎等传染病的爆发提供了温床。

鸭病毒性肝炎(Duck virus hepatitis,DVH)病原为鸭肝炎病毒 (Duck epatitis virus,DHV)目前归属于小RNA病毒科的未确定种。ＤＨＶ具有 3个在抗原性互不交叉、无相关性，有着明显差异 ，无交叉保护和交叉中和作用，但引起的病状与病变甚为相似的血清型 (Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型 )。我国于1958年首次在上海地区某些鸭场发现鸭肝炎，迄今已流行半个多世纪，1984年郭玉璞等证实我国鸭肝炎流行株为Ⅰ型。ＤＨＶ-I型又称古典株 , 此病毒流行甚广，呈世界性分布，主要侵害3周龄以内的雏鸭，发病急、传播快、死亡率可达死亡率为 50%～9 0%。

鸭肝炎病毒对氯仿、乙醚、胰蛋白酶和PH3.0都有抵抗力，在56℃加热60min仍可存活，在37℃中能抵抗2%来苏儿作用1h和0.1%福尔马林8h，在15～20℃中的1%福尔马林或2%NaOH中能存活2h，在2%的漂白粉溶液中能存活3h，3%酚、碘制剂可使病毒灭活。在自然环境中，病毒可在污染的孵化器肓雏室中存活10周，在阴湿处粪便中存活37d以上，在4℃存活2年以上，在－20℃则可长达9年。

近年来，美国、印度、法国等国家已发现Ⅰ型 D H V的变异株， 美国已对其分离物进行了比较，证明其确为Ⅰ型 D H V的一个变异株，命名为 B a rn - h a r d t株，与DHV-Ⅰ型在中和试验中呈部分交叉反应。1992年Sandhu也发现一类毒株，与Ⅰ型仅有部分血清学相关性，称之为Ⅰ型的变异株，命名为Ⅰa型。2007年，中国、韩国和台湾的学者也先后报道和证实了DHV-Ⅰ型的变异。

我国自1958年发现本病至1996年前后，各地暴发与流行的鸭肝炎，其疫情均可以被标准DHV-I型疫苗及抗体良好控制。但近几年来，在许多暴发鸭肝炎的鸭场和地区，针对Ⅰ型的主动免疫（疫苗）或被动免疫（抗体）并不能有效地保护雏鸭抵抗DHV的感染（林世棠，苏敬良等）。目前全国养鸭密集地区正在大面积流行的鸭病毒性肝炎，其部分毒株的毒力有所增强，抗原性发生了变异，使得所流行的DVH发病日龄、发病死亡率均有增大倾向，采用鸭病毒性肝炎卵黄抗体的防制效果出现多样化，常发生防治失败，给养鸭业造成了重大经济损失。本文将就鸭病毒性肝炎卵黄抗体生产工艺对其使用效果的影响展开论述。

随着养鸭业的发展，疾病种类越来越多，某些病原体的变异也越来越快，虽然疾病控制手段越来越多，也越来越先进，但疾病感染压力却越来越大，疾病互传的可能性也越来越大，畜禽疾病仍旧是影响养殖效益和人民健康的重要因素之一。无论政府部门还是养殖业户、组织都迫切需要有相应的快速有效的对策来控制疾病的发展，降低死亡，减小损失。毋庸置疑，外源性的特异性抗体是治疗某些特定传染病的最直接最快速最有效的方法。卵黄抗体作为一种价廉易得的外源性特异性抗体，其使用效果已经在临床兽医学上得到了验证和认同。但为什么在畜牧生产实践中，越来越多的人却对鸭病毒性肝炎卵黄抗体的使用效果产生了怀疑，到底出现了什么问题？难道实践不能检验“真理”了吗？信得科技集团山东信得科技股份有限公司作为动保行业的领先者，拥有农业部认证的精制卵黄抗体生产车间，并持有鸭病毒性肝炎、鸡传染性法氏囊炎、小鹅瘟三种精制抗体的国家二类新兽药证书，信得科技集团青岛研发中心博士后科研工作站研发团队在关于卵黄抗体生产工艺对其使用效果的影响方面进行了持久和广泛的研究。

抗体(免疫球蛋白，Ig)是机体受到外来抗原物质刺激后，机体免疫系统细胞产生的可以特异性地识别和结合外来抗原并使之失活的一类球蛋白。家禽经特定抗原免疫后，可产生相应的特异性抗体进入血液循环，当血液流经卵巢时，特异性抗体在卵细胞中逐渐蓄积，并储存于卵黄中，这种抗体称为卵黄抗体(Immunoglobulin of yolk，IgY)，它是卵黄中唯一的免疫球蛋白，具有特异性和针对性,无毒副作用。

鸡、鸭、鹅等禽类的蛋在营养成分上大致相同，主要由蛋黄、蛋清（即蛋白）和蛋壳构成。鸭蛋每个约重60-75克，其中蛋黄占32%，蛋清占57%，其余11%为蛋壳。其中蛋黄又由如下图所示的成分所构成：

从图中可以看出，在治疗鸭病毒性肝炎，使用卵黄抗体时，起到关键作用的是卵黄中的免疫球蛋白（IgY)，IgY的作用非常广泛，其中最主要的作用有以下几种：

v
特定的卵黄抗体能黏附于特定病毒的衣壳上，直接抑制病毒的生长繁殖；

v
可以黏附于细菌的菌毛上，使之不能黏附于粘膜上皮细胞，失去感染能力；

v
能够促进单核巨噬细胞的吞噬作用（调理作用）；

v
中和细菌、霉菌等毒素的毒性（中和毒素）；

v
与病毒抗原结合使病毒失去感染宿主细胞的能力（中和病毒）。

既然鸭病毒性肝炎卵黄抗体的作用即是蛋黄中免疫球蛋白的作用，那么，有无方法把蛋黄中的免疫球蛋白分离出来呢？蛋黄中所含有的大量脂蛋白及脂肪等物质没有任何治疗作用且体积大，粘稠度高，注射困难且难以吸收，注射后对机体的应激大，易造成过敏反应，是外源性致热原，加上注射后易造成注射部位局部组织出血、肿胀、坏死，坏死的组织也会导致机体发热，而发热会造成机体神经调节、体液调节等功能的紊乱，从而导致鸭群采食量减少，抵抗力下降，继发传染性浆膜炎、大肠杆菌等疾病。大量的调查还发现，目前市面上可见的粗制抗体几乎都是地下作坊生产的“三无”产品，生产环境及产品质量令人堪忧。这些粗制抗体不仅抗体效价难以保证，而且通常会污染禽呼肠孤病毒、禽淋巴白血病病毒、网状内皮增生因子、大肠杆菌、沙门氏菌、支原体等外源性致病原。在注射抗体预防或者治疗鸭病毒性肝炎时，极有可能造成垂直传播病原或其他一些细菌、病毒的扩散甚至疾病的爆发，带来严重的经济损失。

此外，由于非法造假者往往试图通过添加大剂量的甲醛、青、链霉素等措施来延长其产品的保质期，增加所谓的使用安全性，但结果往往是造成更大的应激和严重的药物残留。这就是鸭病毒性肝炎粗制抗体的购买者和使用者对粗制抗体的使用效果产生疑问的重要原因之一。

信得科技集团的精制蛋黄抗体采用了物理、化学、生物等多重灭活技术，并结合使用

酸化法、高速离心、超滤等现代生物技术HOF生产工艺
。精制就是将蛋黄中的免疫球蛋白进行分离纯化的过程。已知蛋黄是由水溶相（Water soluble fraction, WSF）和水不溶相（Water insoluble fraction, WIF）构成的乳浊液。WIF主要为脂蛋白构成，而蛋黄抗体存在于蛋黄的WSF中。WSF中的脂蛋白类含量甚微，其物理性状为近乎透明的透明液体。因此蛋黄抗体精制过程即是WSF的分离过程。大量临床使用案例表明，信得精制蛋黄抗体具有效价稳定、效果确实、保存时间长和便于应用的优点。同时精制蛋黄抗体不会在注射部位残留，对胴体品质无任何影响。

下列表格是信得精制蛋黄抗体与市售粗制蛋黄抗体的比较：

项目	信得精制蛋黄抗体	市售粗制卵黄抗体
合法性	合法产品，国家二类新兽药	非法产品
批准文号	国家正式批准文号	三无产品
执行质量标准	国家质量标准	无标准
质量监控	中监所复核合格	无监控
生产环境	GMP车间	地下作坊
生产工艺	HOF综合灭活提取技术	生理盐水或凉开水搅拌分装
产品质量标准	抗体效价达国家标准，无菌、无支原体、无外源性病毒污染	无效价标准，不进行菌检和外源病毒检测，含有大量外源性病原，使用后可能传染其他病毒病、细菌病、支原体病
安全性	安全可靠	不确切
抗体含量	高	低
传播其他疾病	不会	可能会
性状	近似透明	粘稠糊状
刺激性	很小，几乎没有	大
使用方便性	流动性好，易注射	不易注射，有时堵塞针头
贮藏	2-8℃或常温保存	必须冷冻
吸收性	非常好，无残留	差，易形成机化组织
保存期	18个月	短，易腐败变质