转载霉形体

jufengs

第二十五章 霉形体（Mycoplasmas）

第一节
概述

     霉形体又称支原体，是一类没有细胞壁的原核细胞型微生物。细胞膜含固醇，能通过0.45um滤菌器；但呈二分裂繁殖，含DNA与RNA。霉形体是目前所知能在无生命培养基中繁殖的最小微生物。过去曾称为类胸膜肺炎微生物(pleuropneumonia-likeorganism，PPLO)，由于它们能形成有分枝的长丝，故称之为支原体。霉形体因其没有细胞壁故归属于柔膜体纲（Mollicute)的支原体目(Mycoplasmatales)。下分3个科：支原体科(Mycoplasmataceae)；无胆甾原体科(Acholeplasma-taceae)，生长时不需要外源性胆固醇；螺原体科(Spiroplasmataceae)，生长至一定阶段呈螺形。在支原体科中又分支原体(Mycoplasma)和脲原体(Ureaplama)2个属。支原体属现知有64个种，而脲原体属仅2个种。

    一、历史

1898年法国人Nocard
Roux
从患有胸膜肺炎的病牛中分离到一种病原体。既不同于细菌也不同于病毒，将该病原体称为胸膜肺炎微生物（Pleuropneumonia
organism，ppo）。后来许多学者从广泛的宿种分离到相似的微生物，尽管它们不引起胸膜肺炎病变，但在形态、培养特性等方面均与ppo极相似。因此，就统称为类胸膜肺炎微生物（Pleuropnemonia
Like
organisms，PPLO）。

1956．Edward
和Freundt
提出“霉形体”。

目前，在医学上译作“支原体”。在兽医学上，译为“霉形体”。

    二、形态及染色

霉形体是原核细胞生物中最小的介于细菌和病毒之间的一类微生物，无细胞壁，具有可塑性，大小125-250nm，很少超过1.0μm。由于个体小，细胞膜又具有弹性，故往往能通过0.45μm滤膜，甚至还能通过比自己还小的滤器，G染色弱阴性，一般用姬姆萨染色（菌体呈淡紫色）。

霉形体最外层是细胞膜，由蛋白质与脂质组成的三层结构。内、外二层主要是蛋白质，中间层为脂质。在脂质中固醇约占36%。凡能作用于固醇的物质，如二性霉素B、皂素、毛地黄苷等能引起霉形体细胞膜的破坏而死亡。有的霉形体在细胞膜外还有一层由多聚糖构成的荚膜，有毒性，是霉形体的一种致病因素。

霉形体以二分裂繁殖为主，也见出芽、分枝或由球体延伸成长丝，然后分节段成为许多球状或短杆状的颗粒。

有的霉形体有一种特殊的顶端结构，能使霉形体粘附在宿主上皮细胞表面。这与霉形体在粘膜上的定植和致病有关。有些霉形体能运动，在霉形体内有许多微丝组织成网，和运动有关。在前进方向微丝成束，向前突出。也有认为顶端结构在表面上呈交替粘附和释放，造成霉形体在表面滑动。

霉形体和其他原核生物一样，基因组是一个环状双链DNA。分子量较小，只有大肠埃希菌的1/5，故其合成和代谢很有限。霉形体用普通染色不易着色，用Giemsa法染色着色很浅。革兰染色阴性。

三、培养特性

1．几种基质

在人工培养基上能生长，霉形体的营养要求比一般细菌高。除无胆甾原体外，培养基中必须加入10%~20%人或动物血清。

血清主要用于提供固醇和其他长链脂肪酸，不但是细胞膜合成需要，且具稳定细胞膜的作用。为抑制细菌生长，常加入青霉素、醋酸铊、叠氮钠等药物。

霉形体一般在pH7.8~8.0间生长，低于7.0则死亡。但溶脲脲原体最适的pH为6.0~6.5，因在培养时溶脲脲原体分解尿素产氨，可使培养基pH升高。当培养基指示剂变色即需移种，否则将迅速死亡。霉形体一般为兼性厌氧，仅个别菌株专性厌氧。有氧条件生长良好，在5％CO2和95％N2的环境中，生长为佳。适宜温度为36℃。霉形体生长缓慢，在含1.4%琼脂的固体培养基上孵育2~3d（有的需要2周）后才长出低倍显微镜下可见的微小菌落（10-600um）。典型的菌落呈荷包蛋样，核心较厚，向下长入培养基，周边为一层薄薄的透明颗粒区。有的整个菌落呈颗粒状。肺炎霉形体的菌落较大，直径100~150μm。溶脲脲原体的菌落最小，仅10~40μm，故曾称“T”株(tinystrain)。霉形体的菌落小，宜在低倍镜下观察。

液体培养基：成份要求复杂，且生长缓慢，一般都需要几天，在液体培养基中霉形体的生长量较少，且个体小，一般不易见到混浊，只有小颗粒沉于管底或混或者根本不变混浊。溶脲脲原体在生长量最大时每ml不超过106~107个菌落形成单位（CFU），故液体清亮。霉形体在固体和液体培养基中生长达高峰后，若继续培养，则很快死亡。在低温下可延长存活时间。在液体培养基中生长时，只有加入一些基质后，根据颜色变化来判断有无霉形体生长。加入的基质一般有葡萄糖、精氨酸等，加入0.002%酚红作为指示剂（四氮唑中不加入）。

     

霉形体在不同基质中的生长表现

基  质  指示剂   培养基pH值   颜色（培养基）  霉形体生长后pH变化   颜色变化

葡萄糖   酚红
7.8
红
7.8-6.8
红-----黄

精氨酸   酚红
7.0
微红
7.0-7.8
微红—红

尿  素   酚红
6.5
黄
6.5-7.4
黄-----红

四氮唑    无
7.6
无色
7.6-6.8
无色-----红

（TTC）

  （某些霉形体能还原培养基中的TTC，形成重氮化合物）

    根据霉形体对基质的要求不同而选用不同的培养基，一般一种霉形体只分解葡萄糖或Arg、尿素，尿原体只分解尿素，不分解其它基质，但亦有分解葡萄糖，Arg或二者均不分解的。

2．菌落特点：在固体培养基上，长成油煎蛋状或脐状的菌落。中心生长点色暗，周边生长点色淡，圆形，菌落很小，必须在显微镜下才能看清，一般为50-500um不等，尿原体菌落更少，10-200um。

中心生长点是怎样形成的呢？

接种于琼脂表面的霉形体进入琼脂间隙，然后呈集团状生长，一旦突出于琼脂表面，则以较快的速度在琼脂表面蔓延生长，成为中心生长点及周边生长区。

四、抵抗力

由于无细胞壁，所以对青霉素有抵抗力，此外对醋酸铊（1/2000-1/8000）有抵抗力，故常用青霉素、醋酸铊为抑菌剂来分离霉形体。青霉素主要作用于G+菌，醋酸铊主要作用于霉菌及一些芽胞菌。

本菌对泰乐菌素、林肯霉素、链霉素、氟哌酸等敏感。

对外界环境的抵抗力很弱，对渗透压敏感。

五、分布及致病性

自然界分布极为广泛，各种家畜、家禽、小动物、人类，阴沟污水，土壤等都存在有，其中许多能使人、畜禽致病。

常感染动物呼吸道、泌尿生殖道、乳腺、眼、腹膜、关节滑液囊膜等。主要营寄生生活，单独感染症状轻微，当细菌或病毒等继发感染或受外界不利因素的作用，引起疾病。

疾病特点是潜伏期长，呈慢性经过，地方性流行。致病菌主要有猪肺炎霉形体，禽败血霉形体、滑液囊霉形体，牛羊霉形体（牛肺疫、肺炎、关节炎、乳房炎）等。

如：人---原发性非典型肺炎（肺炎霉形体）

牛、山羊：传染性胸膜肺炎   猪：地方性肺炎（喘气病）

鸡：慢性呼吸道病（CRD）

植物中：也发现了大量的霉形体，如：柑桔的黄病、立枯病等以前认为是病毒，现已确诊为是霉形体引起的，水稻黄锈病等。有些病原体已经分离出，有的在电镜下看到了霉形体颗粒，称为类霉形体微生物“MLOS”（现已改称为植原体）。

国内已经观察到了许多“MLOS”，但尚未分离出霉形体。从牛瘤胃分离到一类霉形体，严格厌氧称为厌氧原体，美国从自燃过的煤中分离到一类霉形体，能耐热（56℃），耐低pH1-2，称为热原体。

六、分类

原核生物门软皮体纲。1972，1979年颁布建议描述软皮体纲内新种的最低标准。1995，ISTM再次提出了最新的分类标准的建议。

原来软皮体纲仅有1目。最近国际细菌系统分类委员会---软皮体分类分会（ICSB-ISTM）对软皮体纲内的霉形体进行了重新分类。

[可参阅：修正的描述软皮体纲内新种的最低标准]。

目前软皮体纲内有4目，5科，8属共158个成员。

热原体（thermoplasma）分类位置未定。其分类命名如下：

霉形体目---霉形体科---霉形体属、尿原体属

昆虫形体目---昆虫形体科---昆虫形体属、中间形体属

---螺旋形体科---螺旋形体属

无胆甾形体目---无胆甾形体科---无胆甾形体属

厌氧形体目---厌氧形体科---厌氧形体属、无胆甾厌氧形体属

分类的依据

1．纲：此纲微生物的主要特征---①缺乏细胞壁，②在固体培养基上形成油煎蛋状菌落，③能通过200-450nm的细菌滤器，④基因组富含AT，⑤在适宜的条件下，无细胞壁的菌株不能回复为具有细胞壁的细菌。

2．目、科、属的分类是依据形态学、宿主来源、最适生长温度、培养特性及生化特性。

七、
细生物学

1．
细胞超微结构

① 细胞膜
单位膜（单层细胞膜）

在结构上与一般动物细胞膜差别不大，均为三层结构，中层为脂质层，又称为电子透明层（因电子致病度稀薄），形成两暗夹一明的结构。

化学成分：蛋白质、脂、糖等，是细胞生物学研究生物膜的最好材料。

（原因：a胆固醇含量
b类胡萝卜素）

② 遗传物质：核酸（RNA，DNA）游离于细胞质或附于细胞膜上。加：DNA：双股环状。基因组大小为5×108道尔顿，所含的遗传信息量要比细菌少得多，是大肠杆菌的1/5，是原核生物中最小的DNA.G+C含量为23%-30%左右，也比细菌低。

从进化论角度看，越原始，G+C%含量就越低。越进化，G+C%含量就越高。

③ 核糖体位于膜及细胞质中。

④ 酶系统：ATP酶、脱氢酶。

2．繁殖：一般二等分裂----（出芽、丝状断裂等）。一般认为小球状细胞是霉形体增殖的基础，也称为最小繁殖单体。

3．霉形体与其它原核生物的关系：

霉形体也是一种原核生物，但与细菌、立克次氏体、衣原体及其它微生物明显不同。如：细菌，三层结构的单位膜，70s核糖衣体，典型的环状染色体。

但霉形体是目前已知能生活在无细胞培养基上的最小的微生物。由于缺乏细胞壁，就决定了它们特征的菌落形态，滤过性染色特征，生长能被特异性抗体抑制，对多种抗菌素有抵抗力等。

目前，有两种假设来解释霉形体与其它微生物的关系：一种假设是霉形体是一类真正的生物，是通过生物进化演变而来；另一种假设是霉形体来源于细菌，细菌脱去细胞壁后发生了不可逆变异。

霉形体与细菌L型形态极为相似，都没有细胞壁，形体柔软，形态多样，都能通过细菌滤器，对作用于细胞壁的抗菌素有抵抗力。那么，如何区别霉形体与细菌L型？（从7个方面加以区别）。

霉形体与细菌L型的区别

形  态	霉形体	细菌L型
形态	固有生命形态	细菌变异形态
无抗生素培养基	恒定、保持固有形态	可恢复原来细菌形态
对甾醇的需要	除不需甾醇科外，均需甾醇	一般不需要
DNA中G+C%	含量比细菌低	含量高，与细菌相同
对洋地黄皂苷的作用	敏感	有抵抗性
抗体抑制试验	能抑制生长	无抑制作用
菌落	光亮、透明、中心深埋于培养基中	较暗，不透明，生长于基质表面，易于刮割
狄乃氏菌落染色	明显着色，不退色	着色浅、迅速退色

八、霉形体的分离和鉴定

培养方法：人工培养基，鸡胚接种，攻毒(本动物和实验动物)

1、取材：无菌采取呼吸道、泌尿生殖道材料或乳汁、关节液、淋

巴结等作检查。

组织块、分泌物、液体（乳汁、关节液）、淋巴结等立即接种：① 生长培养基。② 不能立即接种生长培养基，应先接种运输培养基（注：应将液体培养基中的醋酸铊去掉，因为醋酸铊可以抑制尿原体生长）。

2、培养基：不同霉形体其成分不一样。

      （1）PPLO肉汤。

  （2）血清：常用的是马血清和猪血清，马血清不灭活，猪血清灭活。

  （3）酵母浸出汁或自溶物：提供促生长因子（主要是Vit B族—辅基、辅酶的主要成分。

（4）抑菌剂：青霉素1000u/ml
醋酸铊1/4000

      （5）基质：葡萄糖、Arg、尿素或四氮唑。

      （6）特殊需要：NAD（辅酶I）烟酰胺鸟嘌呤二核基酸。

3、pH 7.6-7.8

4、气体及温度、湿度

CO2，37℃（霉形体，尿原体），25℃（无胆甾原体）

5、霉形体在不同基质中的生长表现（见前面相关内容）

6、各种培养基形式

    按基质不同可分为：    葡萄糖培养基
Arg培养基

                             尿素培养基          四氮唑培养基

按作用不同可分：      分离培养基          传代培养基

                             保存培养基          运输培养基

       按培养基形式不同：    液体培养基          固体培养基   

                            半固体培养基         双相培养基

7、几种常用的培养基

①
马丁肉汤（琼脂）（牛 、羊）

②
FM-4培养基（固体和液体）（禽类）

③
Goodwin
Frii`s 培养基（猪）

④Edward 培养基

⑤Hayflick培养基
⑥尿原体培养基

九、霉形体的鉴定   主要是通过血清学及生化特性来鉴定。

按照国际细菌分类委员会霉形体分委会的规定，种的鉴定血清学方法包括生长抑制试验（GI），代谢抑制试验（MI）和表面免疫荧光法（epi-IMF）或琼脂平板免疫荧光法。

1、生长抑制试验  在软皮体纲新种的血清学特性鉴定中，生长抑制试验是最有用的技术。

依据是加入抗血清的固体培养基可以抑制相应霉形体的生长。

2、代谢抑制试验：原理是基于抗血清能抑制相应霉形体某些代谢活性（如：葡萄糖发酵、精氨酸水解或尿素分解等），其抑制活性是以阻止pH值变化来显示的。

3、表面免疫荧光法（琼脂平板免疫荧光法）：直接荧光法和间接荧光法。原理: 生长在琼脂平板上的霉形体菌落表面菌体抗原或分与同源抗体            

反应，再与荧光标记的抗抗体结合后，在落射式荧光显微镜下可观察到菌落荧光。

国内毕丁仁（1986）首次用直接表面免疫荧光法对禽源霉形体进行了鉴定。

十、生化特性： 根据对糖类分解能力，分为两群。一群能分解多种糖类产酸不产气，称发酵型；另一群不能分解糖，称为非发酵型，但能利用精氨酸作为碳素和能量来源。

   某些菌株在含血液的培养基中其菌落周围可形成β型或α型溶血。

    禽败血霉形体、肺炎霉形体的菌落能吸附禽类红细胞。

1、葡萄糖发酵：是在需氧和厌氧两种培养条件下估价该霉形体分解葡萄糖产酸的能力。

2、精氨酸水解：产生氨而使pH值升高。

3、β-D-葡萄糖苷酶的检测

各种无胆甾原体的β-D-葡萄糖苷酶水平可能是区分种的有效方法。

对该酶的检测是以七叶苷或杨梅苷的水解为基础。

第二节
猪的霉形体

从猪体内已分离到近二十多种霉形体，有一部分是非致病性的，有些是致病性的。主要是猪肺炎霉形体、猪鼻霉形体、猪滑液霉形体、絮状霉形体、颗粒无胆甾原体等，确认有病原性主要有三种（前三种）。

    一、猪肺炎霉形体---引起喘气病（猪地方流行性肺炎）

在猪肺炎中起主要作用，屠宰猪，肺炎病高达30-60%，其中绝大多数是由于猪肺炎霉形体引起。主要引起的经济损失是饲料报酬降低，成本增高，因而每年养猪场所引起的损失是相当巨大的。

（一）形态

多形态，如环状、灯泡状、球状、两极杆菌状等，0.2-0.4um左右，常有几个集聚成团。

（二）培养

营养要求苛刻，兼性厌氧，对营养要求更高，因而一直未分离到病原，直到1965年国外才分离成功（主要是美国和丹麦的两个实验室几乎同时分离到，我国是1973年由上海所最先分离到）。

1、肉汤：酵解葡萄糖产酸，用酚红作指示剂pH从7.8-6.8，颜色由红变黄，表明可能有霉形体生长，一般需3-5天，但接种量大时，可缩短变色时间，接种量少时变色延长，有时可能达20天以上。

2、固体培养基：在A26的液体培养基中，37℃培养2-10d可长成直径25-100um的菌落，但不呈“煎荷包蛋状”。一般不显示中心脐状，表面呈颗粒状。培养环境要湿润，需要加5-10% CO2。

（三）抵抗力   对外界环境的抵抗力较弱，存活一般不超过26h。病原体在-15℃可保存45d，在甘油中0℃可保存8个月。经冷冻干燥的培养物在4℃可存活4年。

   对常用化学消毒剂敏感。对泰乐菌素、螺旋霉素、林可霉素敏感；青霉素、链霉素、红霉素和磺胺对其无效。

（四）致病性：能引起猪喘气病（Enzootic Pneumoniae of pigs，Epp）。

仅感染猪，引起猪地方流行性肺炎。幼猪最为易感。不良的环境因素和继发感染，常使病情加剧。

经呼吸道直接接触传播，多呈慢性经过，主要症状为咳嗽、喘气、患病猪肺中含有很高量的感染粒子，一般每克肺含107个感染剂量，但在野外条件下，大多数感染猪呈不显临床症状的隐性感染。只是在屠宰时可见有心叶、尖叶、膈叶前沿呈胶样变。病肺组织致病性很强，但一经在培养基中传代几次（可能10次）即失去致病能力。但回归猪后，毒力可返强（只需2-3代）。

（五）微生物学诊断

一般根据临床症状、病理刻检，结合流行病学即可确诊。x光检查具有重要诊断价值。必要时可进行微生物学诊断。

1、取材：病肺组织或呼吸道分泌物。

可以直接用病肺组织与健康组织交界处作触片，然后用姬姆萨染色观察菌体。

2、分离培养：要注意以下几个问题。

① 所用器材、试剂必须与组织培养要求一样。

② 用液体培养基分离（因为到目前为止，还没有发现哪一个实验是用固体培养基分离到这种霉形体）。

③ 要采取抑制猪鼻霉形体生长的措施。因为猪呼吸道的猪鼻霉形体很普通，也很容易生长。一旦混有猪鼻霉形体，由于快速生长将掩盖猪肺炎霉形体的生长。可以采取以下几种方法来抑制猪鼻霉形体的生长：

a：加猪鼻霉形体的抗血清。

b：向培养基中加抗菌素如硫酸卡那霉素或环丝氨酸，对猪鼻霉形体有选择性的抑制作用。

c：将血清浓度提高至适合猪肺炎霉形体生长而不适合猪鼻霉形体生长的范围（如27%）。

④ 即使有了合适的培养基及培养技术，也不是完全有把握能分离到猪肺炎霉形体。

分离方法：用Frii`s培养基或Goodwin氏培养基。

病料采集、处理、洗涤、碾碎、用培养液稀释。10倍稀释至10-5或10-8，37℃培养。也可能高稀释度生长而低稀释度反而不生长。

可能需要盲目传代，传代适应后可接入固体培养基，分离到以后用GI、MI或IMF法进行鉴定。

3、动物接种：可用敏感的小猪接种，用病料经呼吸道（肺、气管、鼻腔）接种。

4、血清学诊断： 间接血凝      感染率从20-80%不等。

ELISA
检查群体感染水平    净化

（六）免疫

病愈后有免疫力，但还可带菌，即所谓传染性免疫。体内有菌时，可以抵抗再感染，一旦无菌则无抵抗力。

康复猪具有较坚强的免疫力。中监所通过近20多年努力已制成了疫苗，保护率达70%以上。

（七）净化（猪喘气病的净化）

净化对象：1、并发其他细菌感染的喘气病猪群；2、在SPF猪场中喘气病猪群。

净化措施：1、要选取大于10月龄的后备母猪，最好选择经产母猪且至少选取后10天不出现分娩者；2、全群每天投给相应的抗生素，如将泰妙灵（6mg/kg体重）拌入饮水中，配制相当于100-200ppm的浓度；3、将所有的猪舍和猪栏彻底冲洗和消毒，在净化期间，应持续一年监控。（临床观察、血清学检测、初乳检样、接触感染试验）。

二、猪滑液霉形体

1、形态特征：与猪肺炎霉形体类似，0.3-0.6um，球状。

2、培养：在肉汤培养中能形成颗粒状沉淀，生长能被猪胃粘蛋白或酵母自溶物刺激，水解精氨酸，不酵解葡萄糖，固体培养基上呈现典型的油煎蛋状外观。

3、抵抗力：较弱，在盖玻片上干燥后30天还存活。

4、病原性：主要是关节炎，3-6月龄易感，瘦肉猪更敏感，通常突然发病，急性跛行，持续3-10天，大多数都逐渐恢复，有些猪跛行渐重，不能站立，一般为非化脓性关节炎，涉及到跗关节、肩关节和肘关节，有些关节由于肌肉丰满而未发现，感染关节内有淡黄色液体，有些是纤维素性，滑膜增重。

流行特征：a. 年龄：3-6月龄；b. 瘦肉型猪；c. 伴随引种而爆发；d.发病率高，可达30-80%不等；e. 典型的临床特征是跛行，大多能恢复；f.成年猪隐性带菌很普通。

5、微生物学诊断

分离: 急性期，即发病的前7天，从忠病关节中分离到猪滑液霉形体，在精氨酸肉汤中产碱，葡萄糖不产酸，能被猪胃粘蛋白刺激生长，菌落呈油煎蛋状，血清学鉴定主要用GI、MI等。

三、絮状霉形体

比猪肺炎霉形体更难分离，营养要求更高，自病变肺可分离到，但病原性很轻微，重要的是这种霉形体与猪肺炎霉形体有共同抗原。

四、猪鼻霉形体：仔猪呼吸道特别是鼻腔的正常寄居菌，也能从患喘气病猪中分离到，但一般认为是继发入侵者，能使葡萄糖培养基迅速产酸。

致病性：

1、正常情况下并不引起任何临床症状，但有小部分幼猪可引起浆膜炎，病程约10-14天后恢复，死亡率低。但胸膜、心包膜和腹膜粘连以及可发生关节炎，实验接种可引起多发性浆膜炎、关节炎以及轻微的致肺炎作用。

2、世界范围的组织细胞的污染问题。

五、颗粒无胆甾原体：为猪鼻腔的正常寄居菌，无病原性。

第三节  禽霉形体

    目前，从禽类共分离到25种霉形体，其中霉形体21种，无胆甾原体3种，尿原体1种，最重要的有三个成员是：鸡毒霉形体（MG）、滑液霉形体（M.S）和火鸡霉形体（MM）。有的将此三种霉形体称为致死性霉形体，此外还有衣阿华霉形体。

     一、鸡毒霉形体（Mycoplasma gallisepticum .MG）

    又名禽败血霉形体，是引起鸡和火鸡等多种禽类慢性呼吸道病(CRD)或火鸡传染性窦炎的病原。

（鸡）临床症状：以呼吸罗音、咳嗽、鼻漏为特征。火鸡：常见窦炎。

1、形态：球形，直径250-500nm，G-，姬姆萨染色着色良好。

2、培养：需氧和兼性厌氧，对营养要求较高。

最常用的是修改的FM-4培养基（其中加有青霉素、醋酸铊）最适pH：7.8，T：37-38℃。

在含马血清或灭活鸡、猪血清的培养基中生长良好，一般常用牛心浸出液培养基，用前加入10％-20％马血清，为了抑制杂菌的生长需加入醋酸铊(1：4000倍)和青霉素1000IU/mL，调pH 7.8-8.0。

在固体培养基中培养3-7天可观察到菌落，呈典型油煎蛋状外观，能凝集鸡和火鸡的红细胞。

在液体培养基中，37℃经2-5d可呈现轻度浑浊，在固体培养基上经3-10d，可形成圆形露滴样小菌落，直径约0.2-0.3mm。

在5-7d龄鸡胚卵黄囊内繁殖良好，并可使鸡胚在接种后5-7d内死亡。

3、生化：能发酵葡萄糖和麦芽糖，产酸不产气。

4、抵抗力：不强。

对理化因素的抵抗力不强，一般的化学消毒剂均能将其杀灭。在肉汤培养物中-30℃能存活2-4年，冻干后在-4℃能存活7年。在卵黄中37℃能存活8周，在孵化的鸡胚中45.6℃经12-24h可被灭活。对青霉素和醋酸铊有抵抗力，对泰乐菌素、红霉素等敏感。

5、致病性：

本菌主要感染鸡和火鸡，引起CRD。病原体存在于病鸡和带菌鸡的呼吸道、卵巢、输卵管和公鸡精液中，带菌鸡胚可垂直传递给后代。

应激因子可协同作用，使病情恶化、症状明显。大肠杆菌特别是O78、O2、Ol株继发感染。

常见窦炎、气管炎、气囊炎。

成年鸡群：最具有特征的自然发病症状是气管罗音、流鼻涕、咳嗽和气囊炎、食量减少、体重减轻。

产蛋鸡群：可使产蛋率下降10-40%，种蛋孵化率下降10-21%，角膜结膜炎（Nunoya等报道）。

肉用仔鸡群：症状通常比成年鸡群中观察到的明显疾病爆发大多在4-8周龄。生长明显受阻，体重减少38%，饲养期延长，饲料转化率降低21%。

本病一年四季均可发生，以寒冷季节较为严重。

火鸡感染主要表现为窦炎、窦部肿胀、少数病例不出现窦炎，以严重的下呼吸道症状为主。

其它的致病微生物（如NDV、IBV、E.coli等）与MG并发感染常导致疾病的严重程度增加和病期延长。

无并发症， 死亡率低 ， 有并发症可达30%。

6、微生物学诊断

分离不易，主要靠血清学试验快速诊断 。

血清学诊断  常用平板凝集试验、试管凝集试验等。抽样检查，检出抗体阳性鸡，判为阳性鸡群。

  ① 分离病原

取材：气管或气囊的渗出液、鼻甲骨、肺的悬浮液或鼻窦的渗出液。

分离培养：一般来说，一份病料同时接种液体和固体培养基进行分离，有助于提高分离率。

接液体培养基后应隔日盲目传代一次，（以免细菌的快速生长而掩盖霉形体的分离，固体培养基至少应在37℃培养5-7天确认无霉形体菌落生长才能判为阴性而丢弃。

②血清学诊断

常规：血清平板凝集试验
SPA

血细胞凝集抑制试验

种的鉴定：GI、MI、IMF，
Dot-ELISA（1989），
ELISA（1985）May。

7、免疫防制： 弱毒苗     灭活苗

对链霉素、土霉素、红霉素、螺旋霉素、泰乐菌素、林肯霉素敏感。

    发达国家对鸡毒霉形体病十分重视。如：美国“全国家禽改进计划”中规定的MG控制方案要求，作为正常的无MG鸡群的子代群，在大于4月龄时必须对全群中至少10%的鸡（不少于300只）进行血液检查，其血清学检查MG为阴性，则证实无MG感染。随后在不超过90天的时间内，对鸡群至少随机抽样150只进行血清学检查，阳性者不留作种用。

二、滑液囊霉形体（M.Synoviae MS）

致鸡和火鸡传染性滑液囊炎，并可通过蛋传播。营养要求更高。

1、形态和染色：与MG相似，直径为200-400mm，在姬姆萨染色片中表现为多形态的球状体。

2、生长需要：

① 需要烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD，辅酶I）。

② 必须要血清才能生长，猪血清较好（10%）

最适生长温度为37℃。

琼脂上的生长可通过将平板置于密封的罐中来完成，这样就可以避免琼脂干燥。

3、生化特性：能发酵葡萄糖和麦芽糖，产酸不产气。

有些菌株可凝集鸡或火鸡的红细胞。

4、微生物学诊断

① 分离鉴定：采取急性病鸡的关节渗出液、肝、脾等材料，分离培养。菌落压片用荧光抗体、酶标抗体检查鉴定。

培养基
FM-4（加NAD）

② 血清学检查：血清平板凝集试验

第四节  牛霉形体

    牛霉形体在霉形体研究历史上具有特殊的位置。Nocard（1898）所培养的霉形体就是被人们所认识的第一个霉形体，这种霉形体被称为丝状霉形体丝状亚种（Myaplasna Mycoides Subsp myeoides）。

目前已从牛分离到近20多种霉形体。

1、
病原性：是牛传染性胸膜肺炎（CBPP）的病原菌，是牛的仅次

于牛瘟的传染病。病变特征是间质性、纤维素性肺炎、肺水肿、间质增宽，病原存在于肺、纵膈淋巴、胸腔渗出液中，随气管，鼻腔排出体外，此病广泛存在并流行，但亚洲只有部分地区有报道。近几十年来该病在欧洲的一些地区亦存在（在欧洲南部有CBPP流行）。目前，很多学者认为CBPP的存在状况在欧洲和非洲区别很大，在欧洲，CBPP构成的死亡率很低。甚至比因为环境气候变化，饲养管理不当引起的损失还小。

《国外兽医学---畜禽传染病》P5.1P47-48《牛传染性胸膜肺炎在欧洲

的流行和研究现状》。

我国解放前及解放初期有流行，目前没有确切的病例报告。

2、生物学特性：利用葡萄糖，不利用精氨酸和尿素。菌体呈多形态，菌落呈典型的油煎蛋状外观，有大菌落型（LC）及小菌落型（SC）两种类型。小菌落型对牛的毒力很强，对羊毒力很弱，大菌落型相反。LC型与SC型血清学上不易区分。

3、诊断  牛肉汤+马血清

① 分离用马丁肉汤加血清 或者用胃肝汤加血清

② 病原鉴定：用GI、 MI、 IMF

③ 血清学诊断：a：用补反（CFT）；b：聚合酶链反应技术（PCR）---检测剖检牛的肺样和胸腔积液的特异性DNA；c：免疫斑点技术（一种ELISA法），但任何单一的方法不可能确切地检出CBPP，只有将上述的方法有效地结合使用才确保诊断的可靠性和准确性。

4、免疫

用弱毒菌苗  牛的兔化弱毒苗效果很好

我国已基本上消灭了此病，但近年来我国有些地区（如云南、新疆、西藏等）可能有发生。

二、牛霉形体

从爆发牛乳房炎牛群中分离到，是引起奶牛乳房炎，致泌乳锐减的病原菌，在感染群中，从非乳房炎牛中也能分离到。

1、特性：利用葡萄糖，不利用精氨酸和尿素，从病料中分离很容易。

2、致病性：致牛的乳房炎，乳汁中滴度很高达106-107。致病力很强，仅用70个CFU就能引起乳房炎。

三、其它霉形体：牛生殖道霉形体   牛鼻霉形体    眼霉形体            

                 加拿大霉形体   尿原体

第五节   羊霉形体   

一、丝状霉形体丝状亚种（M.mycoides
subsp
mycoides）

丝状霉形体山羊亚种（M.mycoides
subsp.capri）

山羊霉形体(M.capricolum)

1、病原性：以上三种均为山羊传染性胸膜肺炎的病原菌。

丝状亚种小菌落型不致山羊致病，但大菌落型可致山羊传染性胸膜肺炎。（CCPP：caprine contagious pleuroreumonia）。

CCPP是山羊特有的一种呼吸道疾病，接触性传染病。

主要症状：以纤维素性胸膜肺炎为主要特征。

病变：肺间质水肿，纤维素性渗出。我国至今尚未报道。

二、无乳霉形体：引起羊的传染性无乳症。我国未见报道。

三、其它霉形体：如 结膜霉形体----结膜炎、角膜炎

maojinbao

不知道实际的应用效果怎么样