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发表于 2009-10-10 01:36:13
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检测步骤
1、分别称取样品1g(准确到0.0002g,淀粉含量不大于0.5 g)4份,置于四只150ml三角瓶中,标上记号,如A1、A2、B1、B2。另取两个150ml三角瓶不加试样,作空白,并标上记号,如C1、C2。在这6只三角瓶中各用50ml量筒加入40±1ml 10%磷酸缓冲液。(以上A、B、C都已取了平行样)
2、将A1、A2置于沸水浴中煮沸30分钟,取出后快速冷却至60℃以下。
3、将A1、A2、B1、B2 、C1、C2置于60℃恒温水浴中预热3分钟后,各用5±0.1 ml移液管加入5ml6%β-淀粉酶(5万活力的β-淀粉酶配成15%β-淀粉酶溶液),保温(60℃)1h,(每隔15分钟轻轻摇匀一次)。
4、1h后,将6个三角瓶取出,用移液管分别加入2±0.1 ml 1.79mol/L硫酸溶液,摇匀。再分别加入2±0.1 ml 10%钨酸钠溶液,摇匀。再将它们(6个三角瓶)全部转移到6只100 ml的容量瓶中(需用蒸馏水荡洗三角瓶3次以上,荡洗液也转移至相应的容量瓶内)。最后,用蒸馏水定容至100 ml,并贴上相应的标签。
5、摇晃容量瓶(摇匀),静置2分钟后,用中速定性滤纸过滤。留滤液作为下面测定试液。
6、用5 ml移液管分别吸取上述滤液5±0.05 ml,放入洁净的并贴有相应标签的150 ml的三角瓶中,再用15 ml移液管加入15±0.05 ml 0.1mol/L碱性铁氰化钾溶液于三角瓶,摇匀后,置于沸水浴中准确加热20分钟后取出,用冷水快速冷却至室温,用25 ml移液管缓慢加入25±0.1 ml乙酸盐酸溶液并摇匀。
7、用5 ml移液管加入5±0.05 ml10%碘化钾溶液摇匀,立即用0.05mol/L硫代硫酸钠溶液滴定,当溶液颜色变成淡黄色时,加入几滴10g/L 淀粉指示剂,继续滴定到蓝色消失。各三角瓶分别逐一滴定,并记下相应的滴定量a1、a2、b1、b2、c1、c2ml数。
五、测定结果的计算和表述
计算:所测试样糊化度两次平行测定结果为
α1= c-b1 ×100
c-a1
α1-------为第一个样的糊化度
c-------为两个空白样的ml数的平均数
a1、b1--------为第一个样滴定消耗的ml数
α2= c-b2 ×100
c-a2
α2-------为第二个样的糊化度
c-------为两个空白样的ml数的平均数
a2、b2--------为第二个样滴定消耗的ml数
最后以两次平行测定的平均值,为此样品的糊化度,所得结果取整数。
α=(α1+α2)/2
C ----空白滴定C1、C2的平均值(ml)
α1,α2、b1、b2为6、7步骤得的结果(ml)
在沸水里煮过的为滴定数为分母。 |
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