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请教:豆粕脲酶活性PH增值法

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发表于 2008-5-22 16:05:01 | 显示全部楼层 |阅读模式
豆粕脲酶活性PH增值法的检测方法是怎样的??
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发表于 2008-5-22 23:48:36 | 显示全部楼层

豆粕脲酶活性PH增值法的检测方法是怎样的??

请查看,美国油脂化学AOCS  ---Urease Activity,Soybean Meals,Flours and Mill Feeds       Ba  9--58
发表于 2008-5-23 10:44:22 | 显示全部楼层

PH增值法

一、原理:豆粕中的脲酶可以使尿素分解产生氨,使体系中PH值增大。用PH计或酸碱指示剂测定其PH变化,以判性。
二、试剂:
1、尿素GB696,分析纯;
2、0.05mol/L磷酸氢二钾溶液:称取5.0706克磷酸氢二钾,加新煮过的蒸馏水(需冷却)溶后转移至500ml容量瓶,定容至刻度。
3、0.05mol/L磷酸二氢钾溶液:称取3.40克磷酸二氢钾,加新煮过的蒸馏水(需冷却)溶后转移至500ml容量瓶,定容至刻度。
4、磷酸缓冲溶液(PH7.0):取61.1毫升的试剂2与38.9毫升的试剂3混合(试剂纯粹时,用此法配制,否则应稍变更两种溶液的比例,使混合液PH值为7.0),此溶液可保存三个月。
三、仪器:
1、PH计
2、恒温水浴锅
四、步骤:
称取经粉碎(约40目,且样品粉碎过程中应避免发热)的样品10.0克,于带塞的锥行瓶中,加水100.0毫升,振荡30分钟,过滤样液备用(宜当天测定)。吸取2.0毫升样液,VC与带塞比色管总。加PH缓冲液(试剂4)8毫升,加0.2克尿素,摇匀11分钟,放置在30±5度水浴中保温30分钟,同时作样液空白,即2.0样液,加8.0毫升缓冲液,在水浴锅中同时保温,管内容物冷却后,测定PH值。
五、计算:
脲酶活性指数=PH1-PH0
PH1:样液对尿素分解后PH值
PH0:样液空白管PH值
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